【摘要】：目的：探討乙醇對(duì)小鼠生育力的影響，間接反映酒精對(duì)男性生育力的影響，為男性不育的預(yù)防和治療提供科學(xué)依據(jù)。 方法：實(shí)驗(yàn)選用7～12周齡雄性健康昆明小鼠50只，體重25g～30g，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為對(duì)照組，試驗(yàn)組(4組)。根據(jù)每天灌喂乙醇的量，將試驗(yàn)組分成0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml四組。小鼠預(yù)飼1周后開始灌喂給藥，每日1次。試驗(yàn)于小鼠灌胃的第4，第8，第12天進(jìn)行切片制作、HE染色、生精細(xì)胞凋亡的凝膠電泳法檢測、TUNEL法定量檢測生精細(xì)胞凋亡、以及Bc1-2/Bax免疫組織化學(xué)試驗(yàn)。 結(jié)果: ⑴對(duì)照組和0.1ml/kg組小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)發(fā)育正常，生精上皮完整。0.2ml/kg組曲精小管上皮細(xì)胞層數(shù)未見顯著減少，初級(jí)生精細(xì)胞和次級(jí)生精細(xì)胞結(jié)構(gòu)疏松，但生精上皮基本能保持完整。0.3ml/kg組曲精小管上皮細(xì)胞層數(shù)亦未見減少，初級(jí)生精細(xì)胞和次級(jí)生精細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞，精原細(xì)胞數(shù)目極度減少，核形態(tài)不規(guī)則。0.4ml/kg組睪丸組織結(jié)構(gòu)已出現(xiàn)嚴(yán)重受損，曲精小管生精上皮已從基膜上脫落、與結(jié)締組織分離，初級(jí)生精細(xì)胞和次級(jí)生精細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完全被破壞，上皮細(xì)胞分層不可辨；精原細(xì)胞消失，次級(jí)精母細(xì)胞和精子細(xì)胞細(xì)胞核體積明顯減小，形態(tài)不規(guī)則，管腔中無精子。 ⑵睪丸組織生精細(xì)胞凋亡DNA特征性梯狀帶的檢測在第4d和8d時(shí)，對(duì)照組、0.1ml/kg組、0.2ml/kg組、0.3ml/kg組、0.4ml/kg組均未見凋亡的特征性梯狀條帶；而在第12d時(shí)，對(duì)照組和0.1ml/kg組沒有檢測出特征性梯狀條帶，溶劑組檢測出明顯的特征性梯狀條帶。 ⑶T UNEL法定量檢測生精細(xì)胞凋亡，第4天時(shí)，0.3ml/kg組、0.4ml/kg組的生精細(xì)胞凋亡指數(shù)較對(duì)照差異顯著（P＜0.05）；第8天時(shí)0.2ml/kg組和0.3ml/kg組的生精細(xì)胞凋亡指數(shù)較對(duì)照組差異顯著（P＜0.05），0.4ml/kg組的生精細(xì)胞凋亡指數(shù)較正常組和陰性組差異極顯著（P＜0.01）；第12天時(shí)，0.3ml/kg組、0.4ml/kg組較正常組的生精細(xì)胞凋亡指數(shù)差異顯著（P＜0.05），其中第8天0.4ml/kg組在所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中最高達(dá)到0.4，，為實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中最大值。 ⑷乙醇對(duì)雄性小鼠睪丸生精細(xì)胞凋亡調(diào)控基因Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)，隨著乙醇濃度的升高陽性表達(dá)面積增大，呈現(xiàn)一定的劑量－效應(yīng)關(guān)系，隨著乙醇濃度的增加灰度值降低。隨著乙醇濃度的增加陽性表達(dá)面積比降低，乙醇各濃度組灰度值均比對(duì)照組低，但是比較差異不顯著（P＞0.05），說明高劑量的乙醇會(huì)使Bcl-2蛋白的表達(dá)濃度減少。 結(jié)論：持續(xù)高劑量的乙醇能夠誘導(dǎo)促凋亡基因Bax蛋白的表達(dá)，阻止抑制凋亡基因Bcl-2蛋白的表達(dá)，持續(xù)高劑量的乙醇能夠誘發(fā)睪丸生殖細(xì)胞的凋亡，以致?lián)p傷小鼠的生殖能力。
【圖文】：

圖 2-1 對(duì)照組 8d 睪丸組織（×400） 圖 2-2 0.1ml/kg 組 8d 睪丸組織（×400）Fig.2-1 Tissues of 8d testicle from control group（×400） Fig.2-2 Tissues of 8d testicle from 0.1ml/kggroup（×400）圖2-3 0.2ml/kg組8d睪丸組織（×400） 圖2-4 0.3ml/kg組8d睪丸組織（×400）Fig.2-3 Tissues of 8d testicle from 0.2ml/kg group（×400） Fig.2-4 Tissues of 8d testicle from 0.3ml/kg group（×400）

圖 2-1 對(duì)照組 8d 睪丸組織（×400） 圖 2-2 0.1ml/kg 組 8d 睪丸組織（×400）Fig.2-1 Tissues of 8d testicle from control group（×400） Fig.2-2 Tissues of 8d testicle from 0.1ml/kggroup（×400）圖2-3 0.2ml/kg組8d睪丸組織（×400） 圖2-4 0.3ml/kg組8d睪丸組織（×400）Fig.2-3 Tissues of 8d testicle from 0.2ml/kg group（×400） Fig.2-4 Tissues of 8d testicle from 0.3ml/kg group（×400）
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R114

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本文編號(hào)：2538649