【摘要】：【目的】 研究雌性小鼠斷乳后暴露大豆異黃酮對其卵巢早期發(fā)育的影響，為大豆異黃酮對卵巢早期發(fā)育毒性作用影響的進一步研究及其機制的探討提供科學(xué)依據(jù)。 【方法】 （一）短期暴露實驗方法 1.剛斷乳雌性ICR小鼠48只，按體重隨機分為4組，染毒劑量分別為200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg、0mg/kg大豆異黃酮,以10ml/kg/d灌胃染毒,連續(xù)染毒14天。觀察指標(biāo)：體重變化，陰道開放情況，血清E_2、P_4水平，卵巢卵泡發(fā)育和細(xì)胞凋亡情況，及Caspase-3、Caspase-8及Caspase-9mRNA的表達。 2.剛斷乳雌性ICR小鼠40只，按體重隨機分為4組，染毒處理同方法1。染毒結(jié)束注射PMSG10IU/ml，48小時后腹腔注射HCG8IU/ml。隨后將雌性小鼠按照2:1與雄性小鼠同籠。觀察指標(biāo)：受孕率、受精卵數(shù)目和受精卵形態(tài)。 （二）亞慢性暴露實驗方法 1.剛斷乳雌性ICR小鼠36只，按體重隨機分為3組，第一組為對照組，以10ml/kg/d連續(xù)灌胃蒸餾水35天，第二組為短期暴露組，即染毒劑量為200mg/kg大豆異黃酮，以10ml/kg/d連續(xù)灌胃染毒14天，接著給予灌胃蒸餾水21天，第三組為亞慢性暴露組，即染毒劑量為200mg/kg大豆異黃酮,以10ml/kg/d連續(xù)灌胃染毒35天。觀察指標(biāo)：體重變化，陰道開放情況，血清E_2、P_4水平，卵巢卵泡發(fā)育和細(xì)胞凋亡情況，及Caspase-3、Caspase-8及Caspase-9mRNA的表達。 2.剛斷乳雌性ICR小鼠30只，按體重隨機分為3組，染毒處理同方法1。染毒結(jié)束后注射PMSG10IU/ml，48小時后腹腔注射HCG8IU/ml。隨后將雌性小鼠按照2:1與雄性小鼠同籠。觀察指標(biāo)：受孕率、受精卵和受精卵形態(tài)。 【結(jié)果】 （一）短期暴露實驗結(jié)果 1.小鼠體重各劑量組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 2.小鼠陰道開放率隨染毒劑量的增加呈上升趨勢，高劑量組及中劑量組與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 3.高劑量組小鼠血清E_2平均水平和對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)，高劑量小鼠血清P_4平均水平與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。 4.高劑量組小鼠卵巢生長卵泡構(gòu)成比與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 5.小鼠卵巢電鏡觀察對照組與劑量組未見明顯異常形態(tài)變化，卵巢細(xì)胞凋亡率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 6.高劑量組Caspase-3和Caspase-9mRNA相對表達量與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)，Caspase-8mRNA與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 7.各劑量組小鼠受孕率與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，高劑量組小鼠受精卵數(shù)目與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。 （二）亞慢性暴露實驗結(jié)果 1.小鼠體重各劑量組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 2.亞慢性暴露組和短期暴露組小鼠陰道開放時間均比對照組提前，且與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 3.亞慢性暴露組小鼠血清E_2平均水平與短期暴露組及對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），對照組及短期暴露組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；亞慢性暴露組小鼠血清P_4平均水平高于對照組及短期暴露組，但各組間相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 4.亞慢性暴露組中閉鎖卵泡構(gòu)成比高于其他兩組，但各組間卵巢各級卵泡構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 5.亞慢性暴露組卵巢顆粒細(xì)胞染色質(zhì)增多,成塊狀,染色質(zhì)邊集,細(xì)胞漿破壞較明顯,可見凋亡小體，亞慢性暴露組閉鎖卵泡卵巢細(xì)胞凋亡率高于其他兩組，與短期暴露組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 6.亞慢性暴露組卵巢組織Caspase-3,Caspase-8及Caspase-9mRNA相對表達量均高于其他兩組，但各組間Caspase-3，Caspase-8mRNA相對表達量差異比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。亞慢性暴露組卵巢組織Caspase-9mRNA相對表達量與其他兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)，短期暴露組和對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 7.各劑量組小鼠受孕率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，亞慢性暴露組小鼠受精卵數(shù)目與其他兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 【結(jié)論】 1.短期暴露大豆異黃酮對斷乳后雌性小鼠主要發(fā)揮雌激素樣作用，使得卵巢發(fā)育提前，表現(xiàn)為陰道開放時間提前，血清雌激素水平升高，生長卵泡、成熟卵泡構(gòu)成比升高，受精卵數(shù)目增加；若這種暴露停止的話，近期觀察卵巢功能和形態(tài)未發(fā)現(xiàn)明顯異常，對以后產(chǎn)生何種影響尚無定論，是否與成年后卵巢早衰等疾病發(fā)生有關(guān)需要深入探索。 2.亞慢性暴露大豆異黃酮對斷乳后雌性小鼠主要發(fā)揮抗雌激素樣作用，影響小鼠卵巢發(fā)育，表現(xiàn)為血清雌激素水平下降，閉鎖卵泡構(gòu)成增加，，卵巢顆粒細(xì)胞凋亡的增加，受精卵數(shù)目減少。但產(chǎn)生的影響是否可逆，具體的影響機制如何，本研究尚未涉及，有待進一步探討。
【圖文】：

24E 間質(zhì)腺 F 雙卵卵泡圖 3-4 光鏡下觀察卵巢卵泡結(jié)構(gòu)3.6 大豆異黃酮對小鼠卵巢細(xì)胞凋亡的影響3.6.1 透射電鏡定性觀察小鼠卵巢細(xì)胞凋亡及超微結(jié)構(gòu)改變圖 3-5 顯示：各劑量組未見明顯的異常。

200mg/kg group×5000 200mg/kg group×6300圖 3-5 透射電鏡觀察卵巢細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)3.6.2 TUNNEL 法定量檢測凋亡如圖 3-6 顯示：電鏡觀察下：對照組可見部分原始卵泡、初級卵泡顆粒細(xì)胞凋亡，高劑量組生長卵泡顆粒細(xì)胞未見明顯凋亡如表 3-5 所示：各劑量組間卵巢細(xì)胞凋亡率的比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。Table 3-5 The cell apoptotic rat of ovaries treated SIF(%)表 3-5 大豆異黃酮對卵巢細(xì)胞凋亡率的影響組別 (mg/kg) 切片數(shù)原始卵泡 生長卵泡 成熟卵泡/黃體 閉鎖卵泡0 12 0.769 0.945 0.671 19.8350 12 0.926 0.863 0.607 22.78100 12 0.755 0.645 0.510 21.91200 12 0.678 0.787 0.561 22.17Chi-Square test; Pearson Chi-Square=13.554，compared with the control group
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R114

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 賈海泉,金宏;大豆異黃酮抗輻射損傷的作用[J];氨基酸和生物資源;2004年02期

2 ;國家藥監(jiān)局發(fā)布兩種保健食品產(chǎn)品的申報新規(guī)定[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報;2009年28期

3 毛峻琴,宓鶴鳴;大豆異黃酮的研究進展[J];中草藥;2000年01期

4 楊桂蓮,朱明元,黃憶明;大豆異黃酮對去卵巢小鼠血常規(guī)的影響[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2003年05期

5 莊穎,趙紅,張玉媛,馬孺林,韓慧;大豆異黃酮對大鼠血脂和抗脂質(zhì)過氧化作用的探討[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2004年02期

6 ;大豆異黃酮恢復(fù)女人青春的雌激素[J];科學(xué)養(yǎng)生;2004年09期

7 耿精忠;大豆異黃酮:呵護女性健康[J];養(yǎng)生大世界;2004年01期

8 王龍梓,劉兆平;大豆異黃酮防治動脈粥樣硬化作用研究進展[J];齊魯藥事;2005年04期

9 魏思忱;白文元;;大豆異黃酮與肝病[J];臨床肝膽病雜志;2006年04期

10 ;大豆異黃酮對大鼠慢性移植腎腎病防治作用[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué)(學(xué)術(shù)版);2008年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 金迪;蔡東聯(lián);張玉珍;馮曉慧;周金花;;172名上海地區(qū)成人飲食及尿雌馬酚和代謝產(chǎn)物的調(diào)查研究[A];生命發(fā)展機遇——窗口期營養(yǎng)——達能營養(yǎng)中心第十二屆學(xué)術(shù)年會會議論文集[C];2009年

2 江英;武占省;李春;李新;;大豆異黃酮分離純化工藝的研究[A];第一屆全國化學(xué)工程與生物化工年會論文摘要集(上)[C];2004年

3 劉兆平;張曉鵬;李麗;張文眾;賈旭東;崔文明;王偉;李寧;;大豆異黃酮和雙酚A聯(lián)合暴露對新生兒期雌性大鼠的影響[A];中國毒理學(xué)會第二屆全國中青年學(xué)者科技論壇會議論文集[C];2007年

4 張文眾;李寧;;大豆異黃酮內(nèi)分泌毒性研究[A];第四屆第二次中國毒理學(xué)會食品毒理學(xué)專業(yè)委員會與營養(yǎng)食品所毒理室聯(lián)合召開學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

5 汪海波;何東平;;大豆異黃酮及大豆皂甙的抗氧化性研究[A];中國糧油學(xué)會第三屆學(xué)術(shù)年會論文選集（下冊）[C];2004年

6 金宏;王先遠(yuǎn);許志勤;南文考;李培兵;吳健全;高蘭興;;大豆異黃酮對電離輻射小鼠抗氧化功能的影響[A];中國營養(yǎng)學(xué)會第九次全國營養(yǎng)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2004年

7 代毅;;健身運動處方與大豆異黃酮聯(lián)合作用對絕經(jīng)后婦女體成分和骨代謝的影響[A];第七屆全國體育科學(xué)大會論文摘要匯編（二）[C];2004年

8 張曉鵬;劉兆平;李麗;張文眾;宋雁;李寧;;新生兒期暴露大豆異黃酮對大鼠生殖系統(tǒng)的影響[A];中國毒理學(xué)會第二屆全國中青年學(xué)者科技論壇會議論文集[C];2007年

9 ;大豆異黃酮、乳類與健康[A];中國營養(yǎng)學(xué)會第七屆青年工作委員會第二次學(xué)術(shù)交流會議論文集[C];2011年

10 宋立華;蔡東聯(lián);;大豆異黃酮的生物學(xué)效應(yīng)及其與人類健康的關(guān)系[A];首屆長三角科技論壇——營養(yǎng)與保健食品發(fā)展分論壇論文集[C];2004年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 中國疾病預(yù)防控制中心 營養(yǎng)與食品安全所 劉兆平 盧承前;大豆異黃酮與女性慢性疾病[N];科技日報;2002年

2 德以;含大豆異黃酮藥物有可能致癌[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2004年

3 記者 東海;西施蘭研制成功大豆異黃酮雌激素[N];消費日報;2005年

4 張坤盛;如何打開大豆異黃酮產(chǎn)品市場[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

5 葉圓圓;保健品的新感覺[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2005年

6 雷鳴;如何減少異黃酮的損失[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2008年

7 丁文;大豆異黃酮市場潛力大[N];中國醫(yī)藥報;2003年

8 丁 鄉(xiāng);開發(fā)大豆異黃酮市場前景廣闊[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

9 江和平;大豆異黃酮有助于女性度過更年期[N];大眾科技報;2006年

10 楊凱;“維他奶”——精心呵護全家健康![N];消費日報;2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 蔣守群;大豆異黃酮對嶺南黃羽肉雞生產(chǎn)性能、肉品質(zhì)的影響和抗氧化作用機制研究[D];浙江大學(xué);2007年

2 李海燕;大豆異黃酮的開發(fā)及其物質(zhì)基礎(chǔ)的研究[D];吉林大學(xué);2012年

3 馬麗娟;大豆異黃酮對心肌的保護作用及其機制研究[D];吉林大學(xué);2006年

4 黃進;大豆活性成分的結(jié)構(gòu)與功能評價[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

5 葛喜珍;卵巢切除大鼠主動脈晚期糖化終末產(chǎn)物和血脂的變化及大豆異黃酮的干預(yù)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2003年

6 乞永艷;大豆子葉異黃酮類次生代謝物的誘導(dǎo)及其微粒體部分蛋白的初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2005年

7 左玉幫;從豆粕中提取大豆異黃酮的研究[D];天津大學(xué);2008年

8 潘利華;大豆異黃酮糖苷的超臨界流體萃取及固定化酶轉(zhuǎn)化研究[D];合肥工業(yè)大學(xué);2009年

9 王建華;植物雌激素防治去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松的實驗研究及其作用機制探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2003年

10 陳磊;手性液相色譜在藥理活性化合物分離中的應(yīng)用[D];天津大學(xué);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 盧彩霞;葛根異黃酮及大豆異黃酮在烤乳豬貯藏加工過程中的抗氧化作用研究[D];西南大學(xué);2010年

2 孫艷梅;β-葡萄糖苷酶水解大豆異黃酮糖苷的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

3 李文亮;大豆異黃酮的提取制備技術(shù)及分析測試方法的研究[D];中國人民解放軍軍需大學(xué);2001年

4 劉麗;大豆異黃酮防治電離輻射損傷作用及其機制的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2003年

5 滕麗新;大豆異黃酮對大鼠實驗性腎間質(zhì)纖維化影響的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2002年

6 彭珍珍;番茄紅素與大豆異黃酮對荷瘤小鼠輻射損傷的保護[D];蘭州大學(xué);2010年

7 井樂剛;大豆乳清中大豆異黃酮的提取純化及其生物活性的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

8 朱建林;大豆異黃酮對去卵巢小鼠認(rèn)知功能的影響[D];中南大學(xué);2003年

9 程靜;大豆異黃酮聯(lián)合順鉑對人肺腺癌A549細(xì)胞的影響[D];延邊大學(xué);2006年

10 趙晉忠;不同大豆品種品質(zhì)的生化研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

本文編號：2519431