【摘要】：目的： 有文獻(xiàn)提示亞硫酸鈉具有致突變作用、脂質(zhì)過氧化作用,一些在體實驗也顯示了亞硫酸鈉的肝損傷作用。本課題組在前期研究二氧化硫毒性時發(fā)現(xiàn)高濃度的二氧化硫可以引起肝細(xì)胞內(nèi)脂滴數(shù)量的明顯增加。為了進(jìn)一步研究亞硫酸鈉對肝臟脂肪代謝的干擾作用,本課題以人正常二倍體HL-7702肝細(xì)胞作為模型,檢測食品添加劑亞硫酸鈉作用肝細(xì)胞以后,肝細(xì)胞內(nèi)與脂肪代謝密切相關(guān)的分子二酰甘油�；D(zhuǎn)移酶1(DGAT1)、載脂蛋白E (apoE)以及載脂蛋白B100(apoB100)在轉(zhuǎn)錄以及翻譯水平的變化,以期探討亞硫酸鈉誘發(fā)肝細(xì)胞脂肪積累效應(yīng)及作用途徑。 方法： 以正常人二倍體肝細(xì)胞株HL-7702為研究對象,經(jīng)不同濃度的Na2SO3及陽性對照1.0mmol/L的油酸作用12h、24h、48h以后,采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中載脂蛋白B100(apoB100)以及載脂蛋白E (apoE)的分泌情況；采用免疫沉淀法和Western Blotting法檢測肝細(xì)胞內(nèi)DGAT1、apoB100和apoE的蛋白表達(dá)水平；采用定量聚合酶鏈反應(yīng)法(Q-PCR)檢測肝細(xì)胞內(nèi)DGAT1、apoE以及apoB100mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果： 1、Na2SO3對肝細(xì)胞內(nèi)DGAT1mRNA表達(dá)水平的影響：染毒12h,2.5mmol/L、10.0mmol/L Na2SO3組肝細(xì)胞內(nèi)DGAT1mRNA的表達(dá)水平明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；染毒24h和48h,僅10.0mmol/L Na2SO3染毒組肝細(xì)胞內(nèi)DGAT1mRNA的表達(dá)水平明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 2、Na2SO3對肝細(xì)胞內(nèi)apoE mRNA表達(dá)水平的影響：染毒12h,2.5mmol/L、10.0mmol/L Na2SO3染毒組肝細(xì)胞內(nèi)apoE mRNA的表達(dá)水平明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；染毒24h,僅10.0mmol/L Na2SO3染毒組肝細(xì)胞內(nèi)apoE mRNA的表達(dá)水平明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 3、Na2SO3對肝細(xì)胞內(nèi)apoB100mRNA表達(dá)水平的影響：染毒12h,2.5mmol/L、10.0mmol/L Na2SO3染毒組肝細(xì)胞內(nèi)apoB100mRNA的表達(dá)水平明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；染毒24h和48h后,僅10.0mmol/L Na2SO3染毒組肝細(xì)胞內(nèi)apoB100mRNA的表達(dá)水平明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 4、Na2SO3對肝細(xì)胞內(nèi)DGAT1蛋白含量的影響：染毒12h和24h,僅10.0mmo/L Na2SO3處理組肝細(xì)胞內(nèi)DGAT1蛋白表達(dá)明顯升高,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；染毒肝細(xì)胞48h后,10.0mmo/L Na2SO3染毒組以及1.0mmol/L油酸組肝細(xì)胞內(nèi)DGAT1蛋白表達(dá)均明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 5、Na2SO3對肝細(xì)胞內(nèi)apoE蛋白表達(dá)的影響：染毒12h和24h,各Na2SO3染毒組以及1.0mmol/L油酸組肝細(xì)胞內(nèi)apoE的蛋白表達(dá)水平均明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；染毒48h,各Na2SO3染毒組肝細(xì)胞內(nèi)apoE的蛋白表達(dá)水平明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 6、Na2SO3對肝細(xì)胞內(nèi)apoB100蛋白表達(dá)的影響：染毒12h、24h、48h,各Na2SO3染毒組肝細(xì)胞內(nèi)apoB100的蛋白表達(dá)水平均有明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 7、Na2SO3對肝細(xì)胞培養(yǎng)上清中apoB100含量的影響：染毒12h、24h、48h,各Na2SO3染毒組以及1.0mmol/L油酸組肝細(xì)胞外培養(yǎng)上清中apoB100的表達(dá)量均有明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)； 8、Na2SO3對肝細(xì)胞培養(yǎng)上清中apoE含量的影響：染毒24h后,10.0mmol/L Na2SO3處理組以及1.0mmol/L油酸組肝細(xì)胞培養(yǎng)上清中apoE的含量明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；染毒48h后,0.1mmol/L以及10.0mmol/L Na2SO3染毒組肝細(xì)胞外培養(yǎng)上清中apoE的含量有明顯增加,與陰性對照組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論： 1.一定劑量的Na2SO3可增加肝細(xì)胞內(nèi)DGAT1的含量,促進(jìn)肝細(xì)胞內(nèi)甘油三酯的合成。 2.一定劑量的Na2SO3可增加肝細(xì)胞內(nèi)apoE的蛋白表達(dá)量,但是對apoE的基因表達(dá)影響不明顯。表明apoE可能是通過受體途徑促進(jìn)了肝細(xì)胞內(nèi)甘油三酯的分泌外排。 3.一定劑量的Na2SO3可增加肝細(xì)胞apoB100的含量,從而可能會促進(jìn)肝細(xì)胞極低密度脂蛋白(VLDL)的分泌外排,影響肝細(xì)胞的脂肪代謝。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R114

【參考文獻(xiàn)】

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1 王俊麗;劉汶;;非酒精性脂肪性肝病中醫(yī)藥研究現(xiàn)狀[J];北京中醫(yī)藥;2010年01期

2 胡容融;氨基酸輸液中抗氧劑亞硫酸鹽的控制與測定[J];廣東藥學(xué)院學(xué)報;2001年04期

3 黨衛(wèi)紅;;亞硫酸鹽的毒性作用[J];河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2008年04期

4 白劍英;;食品添加劑亞硫酸鹽的研究進(jìn)展[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué);2007年04期

5 黨衛(wèi)紅;徐啟紅;;亞硫酸鹽在食品加工中的應(yīng)用[J];食品工程;2008年03期

6 高秀英，張香馥，張紅英，焦青，，李盈禮;石家莊市市售饅頭中二氧化硫殘留量的調(diào)查分析[J];衛(wèi)生研究;1994年06期

7 黃惠玲;陶文慶;;食品中亞硫酸鹽的檢驗及其控制措施[J];檢驗檢疫科學(xué);2006年04期

8 白劍英,孟紫強(qiáng);二氧化硫?qū)Ω闻K組織學(xué)結(jié)構(gòu)的影響[J];中華病理學(xué)雜志;2004年02期

9 徐世文;美國FDA頻頻召回 歐盟RASFF多次預(yù)警——亞硫酸鹽超標(biāo):中國食品出口的“結(jié)”[J];中國檢驗檢疫;2005年04期

10 王勃;載脂蛋白B基因多態(tài)性與冠心病的關(guān)系[J];中國誤診學(xué)雜志;2002年06期

本文編號：2518135