【摘要】：目的:膳食鐵攝入過(guò)量或者防治缺鐵性貧血而過(guò)量補(bǔ)鐵均可對(duì)機(jī)體帶來(lái)不利影響。目前鐵過(guò)量對(duì)腸道影響的相關(guān)研究較少,因此,擬研究過(guò)量鐵攝入對(duì)大鼠腸道黏膜及腸道菌群影響,并探討其可能的作用機(jī)制。方法:選擇6周齡雄性Wistar大鼠(SPF級(jí))48只,將大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為4組,分別為低鐵組、正常鐵組、中鐵組、高鐵組,每組12只,分別飼喂鐵含量不同的飼料(50、120、250、500mg/kg)。各組大鼠自由飲用去離子水,連續(xù)喂養(yǎng)8周,實(shí)驗(yàn)期間觀察大鼠一般情況及體質(zhì)量、進(jìn)食量變化,在第八周末收集各組大鼠糞便標(biāo)本。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用10%水合氯醛,按0.5m L/100g對(duì)大鼠進(jìn)行腹腔麻醉,腹主動(dòng)脈取血后處死大鼠,分離血漿后置于-80℃保存。檢測(cè)大鼠血清鐵蛋白、內(nèi)毒素、腫瘤壞死因子水平,并測(cè)定腸組織勻漿中白細(xì)胞介素6(IL-6)、白細(xì)胞介素10(IL-10)及分泌型免疫球蛋白(SIg A)水平及丙二醛(MDA)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)水平;HE染色觀察各組大鼠腸粘膜組織形態(tài)學(xué)改變;根據(jù)細(xì)菌的16S r DNA序列設(shè)計(jì)雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬、腸球菌屬和大腸桿菌的特異性引物,提取待測(cè)糞便標(biāo)本基因組DNA,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)測(cè)定16S r DNA拷貝數(shù),分析四種菌群的數(shù)量;16S r DNA高通量測(cè)序進(jìn)行糞便腸道菌群結(jié)構(gòu)分子生態(tài)學(xué)分析。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)第8周,大鼠體重增長(zhǎng)及進(jìn)食量分析顯示,高鐵組大鼠體質(zhì)量比正常鐵組下降了20.0%(P0.05),平均攝食量下降了11.9%(P0.05)。小腸粘膜細(xì)胞因子及粘膜免疫水平分析,高鐵組大鼠小腸組織中IL-6表達(dá)量為108.6pg/m L,明顯高于正常鐵組的84.7pg/m L(P0.05);而高鐵組大鼠小腸組織中IL-10表達(dá)量為50.5pg/m L,明顯低于正常鐵組的71.7pg/m L(P0.05);高鐵組大鼠小腸組織SIg A表達(dá)量為62.3pg/m L,明顯低于正常鐵組(67.1pg/m L)(P0.05);與正常鐵組相比,低鐵組大鼠血清內(nèi)毒素水平顯著降低,高鐵組大鼠血清內(nèi)毒素水平則顯著升高(P均0.05);而中鐵組、高鐵組大鼠血清腫瘤壞死因子水平顯著升高。腸組織氧化應(yīng)激分析顯示,與正常鐵組相比,高鐵組腸組織勻漿SOD水平降低了32.3%(P0.05),中鐵組SOD水平降低了11.9%(P0.05);而高鐵組腸組織勻漿MDA水平升高了139.9%(P0.05),中鐵組MDA水平升高了33.7%(P0.05)。組織學(xué)分析結(jié)果顯示,低鐵組和正常鐵組大鼠的腸道黏膜形態(tài)無(wú)異常,中鐵組大鼠黏膜有輕微損傷,頂端微絨毛有輕微脫落,高鐵組可見(jiàn)絨毛形態(tài)不規(guī)則,部分腸粘膜上皮細(xì)胞壞死。腸道主要菌群變化分析,與正常鐵組相比,高鐵組大鼠糞便乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量顯著減少(P均0.05),大腸桿菌的數(shù)量顯著增多(P0.05)。低鐵組、中鐵組與正常鐵組相比,腸道菌群數(shù)量無(wú)明顯變化。高鐵組腸道厚壁菌門及擬桿菌門等優(yōu)勢(shì)菌門、柔膜菌門及迷蹤菌門等非優(yōu)勢(shì)菌門均較正常鐵組有差異,各組大鼠分布在前5位的菌屬有明顯差異,鐵過(guò)量攝入會(huì)引起腸道菌群多樣性降低,并使菌門、菌屬豐度改變。結(jié)論:膳食鐵過(guò)量攝入可影響大鼠正常的生長(zhǎng)發(fā)育,并引起小腸粘膜炎性損傷。過(guò)量鐵攝入可引起大鼠腸道菌群失調(diào),其中乳酸桿菌、雙歧桿菌降低,血清中腫瘤壞死因子和內(nèi)毒素水平升高可能與腸道菌群紊亂有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R151

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2478852