發(fā)布時(shí)間：2019-02-15 23:58

【摘要】：目的通過(guò)研究甲狀腺激素受體alpha1(Thyroid hormone receptor alpha 1,TRα1)、beta1(Thyroid hormone receptor beta 1,TRβ1)在甲狀腺和乳腺組織中蛋白和基因水平的變化,以及鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體(Sodium/iodide symporter,NIS)和脫碘酶1(Deiodinase 1,Dio1)在自身調(diào)節(jié)中的作用,探討孕期、哺乳期補(bǔ)碘對(duì)哺乳期Wistar大鼠甲狀腺和乳腺的影響。方法孕0日大鼠隨機(jī)分為適碘(normal iodide,NI)組,10倍高碘(10 times high iodide,10 HI)組和100倍高碘(100 times high iodide,100 HI)組。通過(guò)攝入正常飼料和不同濃度碘化鉀(potassium iodide,KI)的去離子水,使三組大鼠攝碘量分別為7.5μg/d、75μg/d和750μg/d。Wistar大鼠分別喂養(yǎng)至哺乳7天、14天和21天時(shí)處死。采用過(guò)硫酸銨消化砷鈰催化分光光度法測(cè)定大鼠尿碘和甲狀腺以及乳腺組織碘含量;測(cè)量大鼠體重和甲狀腺重量,計(jì)算甲狀腺臟體比;采用直接化學(xué)發(fā)光法和ELISA法測(cè)定大鼠血清甲狀腺激素水平;采用Mito SOX,通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)哺乳7天、14天和21天大鼠甲狀腺和乳腺線粒體超氧化物生成;采用Western blot方法檢測(cè)大鼠甲狀腺和乳腺蛋白TRα1、TRβ1和NIS表達(dá)的變化;采用Real-time Quantitative PCR(QPCR)檢測(cè)大鼠甲狀腺和乳腺TRα1、TRβ1、NIS和Dio1m RNA表達(dá);HE染色觀察甲狀腺和乳腺組織形態(tài)學(xué)變化;免疫組化染色觀察TRα1、TRβ1表達(dá)及NIS和CD4+T淋巴細(xì)胞的空間分布。結(jié)果1.甲狀腺臟體比:Wistar大鼠自孕0日起NI、10 HI和100 HI攝入直至哺乳7天、14天和21天各組大鼠甲狀腺臟體比無(wú)明顯變化(p0.05)。2.尿碘中位數(shù)以及組織碘含量:在哺乳7天,14天和21天,與NI組相比,10HI組和100 HI組尿碘中位數(shù)、甲狀腺和乳腺組織碘含量顯著增加(p0.05);與10 HI組相比,100 HI組也顯著增加(p0.05)。3.血清甲狀腺激素水平:與NI組和10 HI組相比,100 HI組母鼠血清FT3水平和FT3/FT4比值降低,FT4水平升高,TPOAb和Tg Ab水平升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。4.Western blot和QPCR:在哺乳7天、14天和21天,與NI組和10 HI組相比,100 HI組大鼠甲狀腺和乳腺TRα1、TRβ1和NIS蛋白和m RNA表達(dá)顯著下降(p0.05);與NI組相比,10 HI組大鼠甲狀腺和乳腺NIS蛋白和m RNA表達(dá)也顯著下降(p0.05)。5.線粒體超氧化物生成:在哺乳7天、14天和21天,與NI組和10 HI組相比,甲狀腺和乳腺細(xì)胞線粒體超氧化物生成在100 HI組顯著增加(p0.05)。6.HE染色:哺乳7天、14天和21天100 HI組甲狀腺和乳腺結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,伴有腺泡融合。100 HI組甲狀腺組織有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。7.免疫組化染色:在哺乳7天、14天和21天,隨著碘攝入量的增加,哺乳期大鼠甲狀腺和乳腺TRα1、TRβ1蛋白表達(dá)逐漸減弱。TRα1和TRβ1在細(xì)胞核表達(dá);NIS在細(xì)胞漿表達(dá),NI組偶見(jiàn)細(xì)胞膜分布。100 HI組甲狀腺組織可見(jiàn)CD4+T淋巴細(xì)胞表達(dá)。結(jié)論1.孕期、哺乳期10倍碘補(bǔ)充哺乳期母鼠可通過(guò)尿碘排出的增加、NIS下調(diào)、乳腺泌乳來(lái)維持母體甲狀腺功能正常。2.孕期、哺乳期100倍碘補(bǔ)充可導(dǎo)致哺乳期母鼠甲狀腺淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),同時(shí)降低的TRα1和TRβ1可能影響TH介導(dǎo)的生理活動(dòng)及正常轉(zhuǎn)錄。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R153.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2423826