【摘要】：隨著人們膳食結構的變化及人口老齡化的加劇,目前高血脂癥已成為誘發(fā)心腦血管疾病發(fā)生的重要因素。研究表明:高脂血癥與人們飲食有著密切關系,通過調整人們的食物結構是達到干預高脂血癥的有效途徑之一。苦蕎作為我國特有的食物資源,其中的苦蕎蛋白已被證明具有降血脂等多種功效,但目前對其降脂機理的研究還不夠完善。本文通過高脂膳食+鏈脲佐菌素(STZ)注射的方式建立代謝紊亂小鼠模型,研究對苦蕎蛋白飲食干預后小鼠的血脂血糖代謝(血漿總甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、空腹葡萄糖(GLU)和胰島素(INS))的影響,并結合血漿代謝組學分析技術與腸道微生物組學技術(Illumina二代測序技術)從分子水平探究苦蕎蛋白的降脂機理。(1)通過對小鼠血漿的分析發(fā)現:實驗進行6周后,高脂模型組的小鼠肝指數較對照組有顯著增加(68.5%),而苦蕎蛋白組的肝指數與高脂模型組相比,下降了 13.2%,脂肪肝現象得到緩解。高脂模型組的TC及LDL-C含量較對照組相比有顯著提升,分別為86.1%和80.5%,苦蕎蛋白組的TC和LDL-C含量較高脂模型組有顯著降低,分別為48.1%和47.7% (P0.05),改善了脂代謝。高脂模型組小鼠出現了顯著的糖耐量受損現象,而苦蕎蛋白可顯著改善糖代謝。同時,血漿中炎癥因子(脂多糖(LPS)、白細胞介素-6 (IL-6)、腫瘤壞死因子a (TNF-0a))較高脂模型組均有顯著下降(P0.05),表明苦蕎蛋白對于由高脂膳食引起的炎癥反應有一定的抑制作用。(2)利用UPLC-IT-TOF技術獲得小鼠血漿代謝輪廓,并結合HMDB、KEGG、MetPA數據庫輔助分析,發(fā)現由高脂膳食誘導的小鼠代謝紊亂主要與亞油酸代謝、甘油磷脂代謝、鞘脂類代謝、色氨酸代謝、花生四烯酸代謝、糖代謝6條代謝通路相關,并初步鑒別出其中磷脂酰膽堿、亞油酸、磷脂酸、溶血磷脂酰膽堿、甘油、磷脂酰乙醇胺、葡糖苷酸、鞘磷脂、半乳糖神經酰胺、腦苷脂、葡糖神經酰胺、前列腺素G2共12個潛在的生物標志物。(3)利用高通量測序技術(Illumina二代測序技術)對小鼠糞便樣品進行微生物組學研究:Alpha多樣性分析(OTU數、Shannon指數、simpson指數、Chaol指數、ACE指數)結果顯示,對照組的物種豐富度都要顯著高于高脂組和苦蕎蛋白組,但苦蕎蛋白組的菌群多樣性要顯著高于高脂組,說明苦蕎蛋白能使高脂小鼠體內的菌群多樣性顯著增加,更接近于對照組。Beta多樣性分析(PCoA分析、LEfSe分析)結果顯示,三組小鼠糞便樣品之間具有顯著差距,且苦蕎蛋白干預組與對照組的組間差異要小于高脂模型組與對照組之間的差異,表明苦蕎蛋白具有抑制高脂膳食造成的腸道菌群紊亂的作用。綜上所述,苦蕎蛋白可調節(jié)高脂膳食引起的小鼠腸道菌群結構失衡,這可能是其干預高脂膳食性血脂血糖代謝紊亂的重要作用途徑之一。
[Abstract]:With the change of people's dietary structure and the aggravation of population aging, hyperlipidemia has become an important factor to induce cardiovascular and cerebrovascular diseases. The study shows that hyperlipidemia is closely related to people's diet, and it is one of the effective ways to interfere with hyperlipidemia by adjusting people's food structure. Tartary buckwheat (Tartary buckwheat), as a unique food resource in China, has been proved to have many functions such as lowering blood lipid, but the study on its mechanism is not perfect. A model of hyperlipidemic mice with streptozotocin (STZ) was established by injecting high-fat dietary streptozotocin (STZ) into mice. The blood lipid and blood glucose metabolism (total triglyceride (TG), total cholesterol (TC),) of mice treated with Tartary buckwheat protein diet was studied. Effects of high density lipoprotein (HDL-C), low density lipoprotein (LDL-C), fasting glucose (GLU) and insulin (INS), The mechanism of Tartary buckwheat protein (Tartary buckwheat protein) was studied at molecular level by combining plasma metabolomics analysis technique with intestinal microbiome technique (Illumina second generation sequencing technique). (1) the results showed that: after 6 weeks of experiment, the mechanism of Tartary buckwheat protein was analyzed. The liver index of the hyperlipidemic model group was significantly higher than that of the control group (68.5%), while the liver index of Tartary buckwheat protein group was 13.2g lower than that of the hyperlipidemic model group, and the fatty liver phenomenon was alleviated. The contents of TC and LDL-C in the high-fat model group were significantly higher than those in the control group (86.1% and 80.5%, respectively). The TC and LDL-C contents in the Tartary buckwheat protein group were significantly lower than those in the high-fat model group. It was 48.1% and 47.7% (P0.05), which improved lipid metabolism. Hyperlipidemia model mice showed impaired glucose tolerance, while Tartary buckwheat protein significantly improved glucose metabolism. At the same time, plasma inflammatory factors (lipopolysaccharide (LPS), interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor a (TNF-0a) were significantly lower than those in the hyperlipidemia model group (P0.05). The results indicated that Tartary buckwheat protein could inhibit the inflammatory reaction induced by high fat diet. (2) the plasma metabolic profile of mice was obtained by UPLC-IT-TOF technique and was analyzed by HMDB,KEGG,MetPA database. It was found that the metabolic disorder induced by high fat diet in mice was mainly related to the metabolism of linoleic acid, glycerol phospholipid, sphingolipid, tryptophan, arachidonic acid and glucose. Phosphatidylcholine, linoleic acid, phosphatidic acid, lysophosphatidylcholine, glycerol, phosphatidylethanolamine, glucuronide, sphingomyelin, galactose ceramide, cerebral glucoside, glucosamine, There are 12 potential biomarkers of prostaglandin G2. (3) microflora of mouse fecal samples was studied by high-throughput sequencing (Illumina second-generation sequencing technique): Alpha diversity analysis (OTU number, Shannon index, simpson index, Chaol index, OTU number, Shannon index, simpson index, Chaol index, OTU number, Shannon index, simpson index, Chaol index). The results of ACE index showed that the species richness of the control group was significantly higher than that of the high-fat group and the Tartary buckwheat protein group, but the microbial diversity of the Tartary buckwheat protein group was significantly higher than that of the high-fat group. The results showed that Tartary buckwheat protein could significantly increase the diversity of bacteria in high-fat mice, and was closer to the control group. The results of Beta diversity analysis (PCoA analysis, LEfSe analysis) showed that there was a significant difference between the fecal samples of the three groups. The difference between the intervention group and the control group of Tartary buckwheat protein was smaller than that between the high-fat model group and the control group, which indicated that Tartary buckwheat protein could inhibit the intestinal flora disorder caused by high-fat diet. To sum up, Tartary buckwheat protein can regulate the imbalance of intestinal flora induced by high-fat diet in mice, which may be one of the important ways to interfere with hyperlipidemic blood glucose metabolism disorder.
【學位授予單位】：上海應用技術大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R151

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本文編號：2413099