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基于近紅外免疫層析技術(shù)的食源性副溶血弧菌快速檢測(cè)方法研究

發(fā)布時(shí)間:2018-11-07 09:14
【摘要】:建立一種應(yīng)用近紅外熒光免疫層析技術(shù)快速檢測(cè)副溶血弧菌的方法。采用近紅外熒光標(biāo)記副溶血弧菌單克隆抗體,將副溶血弧菌多克隆抗體和羊抗鼠IgG多克隆抗體噴涂于硝酸纖維膜上分別作為檢測(cè)線和質(zhì)控線,研制檢測(cè)副溶血弧菌的近紅外免疫層析試紙條及配套標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。研究表明,所建立的近紅外免疫法對(duì)檢測(cè)副溶血弧菌具有良好的特異性和較高的靈敏度,最低檢測(cè)限為1.2×10~2 CFU/mL,與沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、單增李斯特菌無(wú)交叉反應(yīng)。通過(guò)效果評(píng)價(jià)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),與傳統(tǒng)檢測(cè)方法相比較,所建立的近紅外熒光法檢測(cè)時(shí)間時(shí)間最短,檢測(cè)限與RT-PCR法接近。近紅外熒光法在45 min內(nèi)即可完成檢測(cè),可用于食品中副溶血弧菌的高效檢測(cè),為食品安全監(jiān)管提供可靠的技術(shù)支持。
[Abstract]:A method for rapid detection of Vibrio parahaemolyticus by near infrared fluorescence immunochromatography was established. The polyclonal antibody of Vibrio parahaemolyticus and the polyclonal antibody of sheep anti-mouse IgG were sprayed on the membrane of nitric acid fiber as the detection line and the quality control line, respectively, using near-infrared fluorescence labeling monoclonal antibody against Vibrio parahaemolyticus. A near-infrared immunochromatographic strip for the detection of Vibrio parahaemolyticus was developed. The results showed that the established near infrared immunoassay had good specificity and high sensitivity for the detection of Vibrio parahaemolyticus. The lowest detection limit was 1.2 脳 10 ~ 2 CFU/mL, with Salmonella, Staphylococcus aureus, Escherichia coli. Listeria monocytogenes had no cross reaction. Compared with the traditional detection method, the established near infrared fluorescence method has the shortest detection time and the detection limit is close to that of RT-PCR method. Near-infrared fluorescence method can be used to detect Vibrio parahaemolyticus in food in 45 min. It can provide reliable technical support for food safety supervision.
【作者單位】: 北京出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;出入境食品安全檢測(cè)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;常德出入境檢驗(yàn)檢疫局;天津出入境檢驗(yàn)檢疫局工業(yè)產(chǎn)品安全技術(shù)中心;
【基金】:質(zhì)檢公益性行業(yè)科研專項(xiàng)項(xiàng)目(201410049) 國(guó)家質(zhì)檢總局科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015IK011)
【分類號(hào)】:R155.3

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2 高圍n,

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