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乳源酪蛋白糖巨肽作用人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29調(diào)控炎癥活力研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-01 05:03

  本文選題:酪蛋白糖巨肽 切入點(diǎn):結(jié)腸癌細(xì)胞HT- 出處:《食品科學(xué)》2017年15期


【摘要】:為進(jìn)一步闡釋乳源酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)的抗炎及修復(fù)腸道炎癥的功效,本研究在確定了乳源CGMP對(duì)脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)誘導(dǎo)的結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29NF-κB亞單位p65蛋白的影響和乳源CGMP調(diào)控核轉(zhuǎn)錄因子(nuclear factor,NF)-κB信號(hào)通路的基礎(chǔ)上,通過(guò)構(gòu)建表達(dá)乳源CGMP和NF-κB必需調(diào)節(jié)蛋白(NF-κB essential modulator,NEMO)的質(zhì)粒,共轉(zhuǎn)HT-29細(xì)胞,免疫共沉淀測(cè)定兩個(gè)蛋白的相互作用。最后采用線(xiàn)粒體膜電位法測(cè)定乳源CGMP對(duì)HT-29細(xì)胞的促凋亡作用。結(jié)果表明,乳源CGMP與NEMO(NF-κB essential modulator)30 h共轉(zhuǎn)HT-29細(xì)胞中,乳源CGMP與NEMO蛋白均表達(dá),且表現(xiàn)出二者的相互作用。乳源CGMP可與NEMO相互作用影響NF-κB信號(hào)通路;同時(shí)乳源CGMP還促進(jìn)HT-29細(xì)胞凋亡,呈時(shí)間依賴(lài)性,其中0.1μg/m L的CGMP作用效果最好。乳源CGMP與NEMO相互作用是間接作用于IκB激酶(IκB kinase,IKK)而作用于?IκB,進(jìn)而影響NF-κB信號(hào)通路。研究揭示了乳源CGMP調(diào)控NF-κB信號(hào)通路的另一種途徑,也充分說(shuō)明乳源CGMP可通過(guò)作用多種抗炎途徑發(fā)揮其調(diào)控作用。
[Abstract]:In order to further elucidate the anti-inflammatory effect of casein glycomacropeptidec CGMPs and the effect of repairing intestinal inflammation, In this study, we determined the effect of milk source CGMP on the p65 protein of human colon cancer cell line HT-29NF- 魏 B induced by lipopolysaccharide polysaccharide (LPSs) and the regulation of nuclear transcription factor nuclear factor nuclear factor- 魏 B signaling pathway by milk source CGMP. CGMP and NF- 魏 B essential regulatory proteins (NF- 魏 B essential modulator Nemo) were constructed and co-transformed into HT-29 cells. The interaction of two proteins was assayed by immunoprecipitation. Finally, the apoptotic effect of CGMP on HT-29 cells was determined by mitochondrial membrane potential method. The results showed that the expression of CGMP and NEMO protein in breast derived CGMP and NEMONF- 魏 B essential modulator)30 h cotransfected HT-29 cells were detected. Milk source CGMP could interact with NEMO to influence NF- 魏 B signaling pathway, and milk source CGMP could promote HT-29 cell apoptosis in a time dependent manner. The effect of 0.1 渭 g / mL CGMP was the best. The interaction of milk source CGMP and NEMO was mediated by I 魏 B kinase I 魏 B kinase (Ike). I 魏 B, which in turn affects NF- 魏 B signaling pathway. This study revealed another pathway of regulation of NF- 魏 B signaling pathway by CGMP, and fully demonstrated that milk source CGMP can play its regulatory role by acting on a variety of anti-inflammatory pathways.
【作者單位】: 天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院天津市食品生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31071522) 天津商業(yè)大學(xué)國(guó)家基金培育項(xiàng)目(160120)
【分類(lèi)號(hào)】:R151;TS252.1

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本文編號(hào):1694070


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