發(fā)布時(shí)間：2018-01-23 08:05

  本文關(guān)鍵詞： 苯甲酸鈉 毒性評(píng)價(jià) 蛋白質(zhì) 光譜 學(xué) 分子對(duì)接　出處：《山東大學(xué)》2012年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：隨著社會(huì)的發(fā)展和科技的進(jìn)步,人們對(duì)于自身健康和環(huán)境安全越來(lái)越關(guān)注,對(duì)于周邊物質(zhì)的毒性研究范圍越來(lái)越廣,甚至許多原來(lái)認(rèn)定無(wú)害的物質(zhì)的安全性也被重新評(píng)估,并獲得更加深入的研究。食品添加劑中的防腐劑就是這樣的一類(lèi)物質(zhì)。苯甲酸鈉是使用時(shí)間最長(zhǎng)、使用范圍最廣的防腐劑,能夠伴隨食物通過(guò)消化道進(jìn)入生物體內(nèi),通過(guò)各種方式與體內(nèi)的大分子生命物質(zhì)作用,影響或者破壞這些分子的生物功能,從而對(duì)機(jī)體產(chǎn)生毒性效應(yīng)。為保障人體健康和安全,對(duì)這些具有潛在威脅物質(zhì)的毒性做出全面的評(píng)價(jià),將會(huì)為制訂合理的使用標(biāo)準(zhǔn)提供參考和技術(shù)支持。 本論文以分子毒理學(xué)為理論基礎(chǔ),通過(guò)多種光譜學(xué)技術(shù)和分子對(duì)接方法,在體外模擬生理環(huán)境,研究食品添加劑苯甲酸鈉進(jìn)入人體后對(duì)在運(yùn)輸、消化和排出體外過(guò)程中接觸較多的的四種重要蛋白質(zhì)——血清白蛋白、血紅蛋白、胰蛋白酶、過(guò)氧化氫酶——的毒性作用機(jī)理,為系統(tǒng)評(píng)價(jià)苯甲酸鈉的生理毒性提供參考,也為預(yù)防和治療相關(guān)疾病提供新的思路和方法。 本論文共分四章內(nèi)容,其中主要包含四部分實(shí)驗(yàn),主要結(jié)論包括： 第一部分以牛血清白蛋白(BSA)為靶,利用熒光光譜、紫外可見(jiàn)光譜、圓二色光譜等光譜學(xué)手段,從分子水平上研究苯甲酸鈉與血液中血清白蛋白作用的情況。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),苯甲酸鈉進(jìn)入BSA溶液后會(huì)造成BSA熒光靜態(tài)淬滅,引起熒光基團(tuán)微環(huán)境極性增強(qiáng)、蛋白質(zhì)骨架松散、α-螺旋等二級(jí)結(jié)構(gòu)含量降低等變化。苯甲酸鈉能進(jìn)入BSA分子內(nèi)部,與BSA以1：1結(jié)合形成新的復(fù)合物。兩者結(jié)合的主要作用力為范德華力和氫鍵。形成的復(fù)合物隨溫度升高可能部分分解。結(jié)合產(chǎn)物用分子對(duì)接軟件進(jìn)行結(jié)構(gòu)模擬,結(jié)果顯示苯甲酸鈉會(huì)進(jìn)入BSA分子內(nèi)部,通過(guò)一個(gè)氫鍵與與一個(gè)精氨酸(Arg-482)相連。 第二部分以牛血紅蛋白(BHb)為靶,利用熒光光譜、紫外可見(jiàn)光譜、圓二色光譜等光譜學(xué)手段,從分子水平上研究苯甲酸鈉與血液中的血紅蛋白作用的情況。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),苯甲酸鈉進(jìn)入BHb溶液后會(huì)造成BHb以靜態(tài)淬滅為主的熒光淬滅,引起熒光基團(tuán)微環(huán)境極性增強(qiáng)、蛋白質(zhì)骨架松散、α-螺旋和β-折疊等二級(jí)結(jié)構(gòu)含量等變化。苯甲酸鈉能進(jìn)入BHb分子內(nèi)部,與BHb以1：1或者1：2形成新的結(jié)合產(chǎn)物,其中以1：1型結(jié)合產(chǎn)物為主。兩者結(jié)合的主要作用力為范德華力和氫鍵。結(jié)合物隨溫度升高可能部分分解。結(jié)合產(chǎn)物用分子對(duì)接軟件進(jìn)行結(jié)構(gòu)模擬,結(jié)果顯示苯甲酸鈉與BHb的蘇氨酸(Thr-38)和天冬氨酸(Asp-97)各通過(guò)一個(gè)氫鍵相連。 第三部分以胰蛋白酶為靶,利用熒光光譜、紫外可見(jiàn)光譜、圓二色光譜等光譜學(xué)手段,從分子水平上研究苯甲酸鈉與重要消化酶中的胰蛋白酶作用和對(duì)其活性影響的情況。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),苯甲酸鈉進(jìn)入胰蛋白酶溶液后會(huì)造成其熒光靜態(tài)淬滅,引起熒光基團(tuán)微環(huán)境極性增強(qiáng)、蛋白質(zhì)骨架松散、β-折疊等二級(jí)結(jié)構(gòu)含量降低等的結(jié)構(gòu)變化,并引起胰蛋白酶的活性增強(qiáng)。苯甲酸鈉能進(jìn)入胰蛋白酶分子內(nèi)部,與其以1：1結(jié)合形成新產(chǎn)物。兩者結(jié)合的主要作用力為范德華力和氫鍵。結(jié)合物隨溫度升高可能部分分解。結(jié)合產(chǎn)物用分子對(duì)接軟件進(jìn)行結(jié)構(gòu)模擬,結(jié)果顯示苯甲酸鈉與胰蛋白酶的絲氨酸(Ser-164)通過(guò)一個(gè)氫鍵相連。 第四部分以牛過(guò)氧化氫酶為靶,利用熒光光譜、紫外可見(jiàn)光譜、圓二色光譜等光譜學(xué)手段,從分子水平上研究苯甲酸鈉與重要消化酶中的過(guò)氧化氫酶的作用情況。苯甲酸鈉進(jìn)入牛過(guò)氧化氫酶溶液后會(huì)造成其分子熒光增強(qiáng),引起各種熒光基團(tuán)微環(huán)境極性等化學(xué)性質(zhì)的改變,使蛋白質(zhì)骨架松散,但在較大的濃度范圍內(nèi)對(duì)于過(guò)氧化氫酶二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響并不顯著。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R114

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 許元明;農(nóng)娟;;化學(xué)合成食品防腐劑的研究進(jìn)展[J];山東化工;2013年03期

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本文編號(hào)：1457138