本文關(guān)鍵詞： 氯乙烯(VC) RASSFA DNA甲基化 mRNA表達(dá)　出處：《毒理學(xué)雜志》2017年01期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：目的通過(guò)檢測(cè)氯乙烯(VC)染毒大鼠肝細(xì)胞RASSF1A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的水平及mRNA的表達(dá)量,探討RASSF1A基因在氯乙烯致癌過(guò)程中的表觀遺傳機(jī)制。方法選取96只健康雄性SD大鼠,隨機(jī)分為4組:陰性對(duì)照組(0mg/kg)和低劑量(5 mg/kg)、中劑量(25 mg/kg)、高劑量(125 mg/kg)3個(gè)氯乙烯染毒組。腹腔注射,隔日染毒,每周3次。每組分別于6、8和12周隨機(jī)處死8只,取其肝臟。采用甲基化特異性實(shí)時(shí)熒光定量(QMSP)檢測(cè)大鼠肝細(xì)胞RASSF1A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的水平,采取實(shí)時(shí)熒光定量(QPCR)測(cè)定RASSF1A mRNA表達(dá)量的改變。結(jié)果染毒6周時(shí),RASSF1A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平各組間無(wú)明顯變化,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);但RASSF1A mRNA的表達(dá)量隨著劑量的增加而升高,且高劑量組、中劑量組與對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。染毒8周時(shí),RASSF1A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平和mRNA的表達(dá)量在各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。染毒12周時(shí),RASSF1A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平隨著染毒劑量的增加而明顯升高,高劑量組與其他各組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);mRNA的表達(dá)量隨著染毒劑量的增加而出現(xiàn)下降,且對(duì)照組和低劑量組與高劑量組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。此外,在高劑量組中,8周時(shí)RASSF1A啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平較6周時(shí)低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而12周時(shí)啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平較6周時(shí)高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);mRNA表達(dá)量隨著染毒時(shí)間的延長(zhǎng)而下降,且8和12周mRNA表達(dá)量與6周時(shí)相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),在其余各組中,不同染毒時(shí)間下RASSF1A甲基化水平及mRNA表達(dá)量均未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論氯乙烯長(zhǎng)期染毒可致大鼠肝細(xì)胞RASSF1A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平的升高,并引起其mRNA的表達(dá)量下降,可能參與氯乙烯致癌的表觀遺傳機(jī)制。
[Abstract]:Objective to detect the methylation level of RASSF1A gene promoter and the expression of mRNA in rat hepatocytes exposed to vinyl chloride (VC). To explore the epigenetic mechanism of RASSF1A gene in carcinogenesis of vinyl chloride. Methods 96 healthy male SD rats were selected. They were randomly divided into 4 groups: negative control group (0 mg / kg), low dose (5 mg / kg) and middle dose (25 mg / kg). High dose of 125mg / kg vinyl chloride was injected intraperitoneally three times a week. Eight rats were randomly killed in each group at 6 weeks and 12 weeks respectively. The methylation of the promoter region of RASSF1A gene in rat hepatocytes was detected by methylation specific real-time fluorescence quantitative quantitation (QMSPs). The expression of RASSF1A mRNA was measured by real-time fluorescence quantitative PCR. Results there was no significant change in methylation level of promoter region of RASSF1A gene at 6 weeks after exposure. The difference was not statistically significant (P 0.05). However, the expression of RASSF1A mRNA increased with the increase of dose, and the difference between the high dose group and the control group was statistically significant at 8 weeks after exposure. There was no significant difference in the methylation level of RASSF1A promoter region and the expression of mRNA among the groups. The methylation level of the promoter region of RASSF1A gene increased with the increase of exposure dose, and the difference between the high dose group and other groups was statistically significant (P 0.05). The expression of mRNA decreased with the increase of the exposure dose, and the difference between the control group and the low dose group was statistically significant compared with the high dose group (P 0.05). In addition, in the high dose group, there was a significant difference between the two groups. The methylation level of RASSF1A promoter at week 8 was lower than that at week 6, the difference was statistically significant (P 0.05), but the level of methylation in promoter region at week 12 was higher than that at week 6. The difference was statistically significant (P 0.05). The expression of mRNA decreased with the prolongation of exposure time, and the expression of mRNA at 8 and 12 weeks was significantly higher than that at 6 weeks (P 0.05). There was no significant difference in RASSF1A methylation level and mRNA expression under different exposure time (P0.05). Conclusion chronic exposure to vinyl chloride can increase the methylation level of RASSF1A gene promoter in rat hepatocytes. It may be involved in the epigenetic mechanism of carcinogenesis of vinyl chloride.
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院衛(wèi)生毒理教研室;
【基金】：山西省基礎(chǔ)研究計(jì)劃項(xiàng)目(2013011059-1) 山西省回國(guó)留學(xué)人員科研資助項(xiàng)目(2016-056)
【分類(lèi)號(hào)】：R114
【正文快照】： 氯乙烯(Vinyl chloride,VC)是工業(yè)生產(chǎn)聚氯乙烯(江蘇溥博生物科技有限公司)。(PVC)的單體原料,2013年我國(guó)聚氯乙烯年產(chǎn)量達(dá)1動(dòng)物天平(意歐儀器儀表有限公司),Line Gene529.54萬(wàn)噸,年均增長(zhǎng)率達(dá)6.4%,成為世界第一大生9660熒光定量?jī)x(杭州博日科技有限公司),Little產(chǎn)國(guó)和第一大

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1451441