本文關(guān)鍵詞： 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增 金黃色葡萄球菌 耐熱核酸酶　出處：《現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)》2017年22期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的建立一種基于顏色判斷結(jié)果的金黃色葡萄球菌(簡(jiǎn)稱金葡菌)快速、敏感和特異的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法并應(yīng)用于食源性疾病樣品的金葡菌篩查。方法針對(duì)金葡菌耐熱核酸酶(thermostable nuclease,nuc)基因特異性序列的6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)2對(duì)引物,建立LAMP方法。利用LAMP和普通PCR方法同時(shí)檢測(cè)金葡菌和對(duì)照組菌株來(lái)驗(yàn)證LAMP方法的特異性;將金葡菌菌液作10倍系列稀釋后利用LAMP和PCR方法同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)來(lái)評(píng)價(jià)兩者的敏感度,利用LAMP和PCR方法分別對(duì)330份食源性疾病樣品進(jìn)行檢測(cè)來(lái)比較兩者的檢出率。結(jié)果 LAMP方法可以利用肉眼進(jìn)行結(jié)果判斷,其特異性與普通PCR相當(dāng),但其敏感性比普通PCR高10倍,LAMP方法檢測(cè)下限為10 cfu/ml,PCR方法檢測(cè)下限為100 cfu/ml;LAMP和普通PCR方法對(duì)食源性疾病樣品的檢出率相符。結(jié)論可視化金葡菌LAMP方法是一個(gè)快速、敏感和特異的方法,可應(yīng)用于食源性疾病樣品中金葡菌的篩查。
[Abstract]:Objective to establish a rapid method for staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) based on color judgment. Loop-mediated isothermal amplification was amplified by sensitive and specific loop mediated isothermal amplification. Methods the method was used to screen Staphylococcus aureus from foodborne disease samples. Methods Thermostable nuclease was used against thermostable nuclease of Staphylococcus aureus. Two pairs of primers were designed for 6 regions of nuclear gene specific sequence. The LAMP method was established. The specificity of the LAMP method was verified by both LAMP and PCR methods for the simultaneous detection of Staphylococcus aureus and control strains. The sensitivity of Staphylococcus aureus solution was evaluated by LAMP and PCR methods after dilution of 10-fold series. LAMP and PCR methods were used to detect 330 foodborne disease samples to compare the detection rate of the two methods. Results LAMP method can be used to judge the results with the naked eye. Its specificity was similar to that of normal PCR, but its sensitivity was 10 times higher than that of PCR. The detection limit of lamp method was 10 cfu/ml. The detection limit of PCR method is 100cfur / ml; The detection rates of LAMP and PCR were consistent with those of foodborne disease samples. Conclusion the visual LAMP method is a rapid, sensitive and specific method for the detection of foodborne diseases. It can be used in the screening of Staphylococcus aureus in foodborne disease samples.
【作者單位】： 長(zhǎng)沙縣食品安全檢測(cè)中心;長(zhǎng)沙市疾病預(yù)防控制中心;
【基金】：湖南省衛(wèi)生計(jì)生委2015年度科研計(jì)劃項(xiàng)目(No.B2015-153)
【分類號(hào)】：R155.5
【正文快照】： 金黃色葡萄球菌(簡(jiǎn)稱金葡菌)是一種革蘭陽(yáng)性球菌,不但能夠造成感染部位的化膿性炎癥,還可以產(chǎn)生毒素引起食源性疾病[1]。金葡菌及其腸毒素引起的食源性疾病是重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題,國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)生委通報(bào)情況顯示,2015年全國(guó)共報(bào)告食物中毒突發(fā)公共衛(wèi)生事件169起,中毒5 962人,死

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