本文關鍵詞：PM2.5中的礦物粉塵對V79細胞毒性研究

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【摘要】：目的：選取PM2.5中礦物主要成分方解石、鈉長石、石英、絹云母等粉塵，將四種礦物粉塵分別作用于中國倉鼠肺細胞（Chinese Hamster LungCell，V79細胞），研究其對細胞產生的毒性作用，探討其產生毒性作用的相關機制。方法：（1）采用X射線熒光光譜分析法測定原礦物樣品化學組成，經激光粒度分析儀分析四種礦物粉塵粒徑分布。（2）實驗組選取處于對數生長期的V79細胞，調整細胞濃度后分別加入50、100、200、400μg/ml的四種礦物粉塵懸液，設置陰性對照組加入相同劑量的細胞培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24h后。用噻唑藍（MTT）實驗檢測細胞增殖情況，比較各組細胞的存活率。（3）瑞氏-吉姆薩(Wright-Giemsa)染色，油鏡下觀察各組細胞形態(tài)改變，計數微核細胞千分率。（4）彗星實驗（SCGE）檢測各組細胞DNA的損傷程度。每種濃度隨機選取100個細胞彗星圖像，CASP彗星分析軟件分析彗星圖像，以尾矩(OTM)作為分析指標。（5）直線相關分析方法分析V79細胞存活率同微核率、尾矩（OTM）值相關性。（6）酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測各組細胞上清液中白細胞介素-6（IL-6）含量，分析礦物粉塵產生毒性作用的相關機制。結果：（1）實驗所選用礦物粉塵石英、絹云母、鈉長石的化學組成成分中所含二氧化硅（SiO2）含量最高，而礦物粉塵方解石所含氧化鈣（CaO）含量最高；四種礦物粉塵經檢測其平均粒徑均2.5um，符合實驗要求。（2）同對照組相比較，四種礦物粉塵均能影響V79細胞存活率，隨礦物濃度的增高，細胞存活率降低，細胞存活率與礦物粉塵的濃度呈現劑量-效應關系；與礦物鈉長石、方解石相比較，礦物石英、絹云母導致細胞存活率下降更加明顯。（3）隨著四種礦物粉塵濃度的增加，，細胞微核率均有增加，其微核率從大到小順序為：絹云母＞石英＞鈉長石＞方解石。各粉塵組在400ug/ml的高濃度時，其微核率同陰性對照組比較，均具有統(tǒng)計學意義（P0.05），鈉長石、石英和絹云母三種礦物在此濃度的細胞微核率與陰性對照組更是有顯著統(tǒng)計學意義（P0.01）。（4）四種礦物粉塵對V79細胞的DNA損傷呈現劑量-效應關系，礦物粉塵濃度越高，DNA損傷越明顯。鈉長石、石英和絹云母高濃度暴露組的細胞OTM值與陰性對照組比較，具有統(tǒng)計學意義（P0.05）。（5）暴露在不同礦物粉塵中的細胞存活率的變化同細胞微核率的變化均呈現負相關，細胞存活率的變化同細胞OTM值的變化同樣均呈現負相關。（6）四種礦物粉塵均能使V79細胞培養(yǎng)液上清液中的IL-6含量升高，其中石英和絹云母暴露組濃度升至100μg/ml及以上，其IL-6含量與陰性對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P0.05）。而鈉長石、方解石兩種礦物同對照組相比，差異不具有統(tǒng)計學意義。結論：四種PM2.5中的主要礦物粉塵方解石、鈉長石、石英、絹云母均能導致細胞毒性，其細胞毒性與礦物粉塵的濃度呈劑量-效應關系；四種礦物粉塵均能增加細胞微核數量，對細胞DNA產生明顯的損傷效應，進一步證實礦物粉塵對細胞能產生毒性作用；四種礦物粉塵能刺激細胞炎性因子增加，由此推測炎癥因子激活可能是礦物粉塵對細胞產生毒性的機制之一。
【學位授予單位】：瀘州醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R114

【參考文獻】

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本文編號：1278388