本文關(guān)鍵詞：三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)毒性靶器官及效應(yīng)分子的篩選

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【摘要】：目的:本論文研究了三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)的急性毒性效應(yīng)。從人群資料分析氯化消毒劑及其副產(chǎn)物與疾病相關(guān)的流行病學(xué)特征,從動(dòng)物、器官、細(xì)胞及分子水平,測(cè)定三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)的急性毒性,鑒定三氯異氰尿酸可能的毒性靶器官,篩選三氯異氰尿酸致靶器官早期損傷的效應(yīng)分子,為三氯異氰尿酸的人群暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供數(shù)據(jù),并對(duì)三氯異氰尿酸的毒性效應(yīng)機(jī)制進(jìn)行了探索。方法:1.文獻(xiàn)綜述三氯異氰尿酸及氯化消毒副產(chǎn)物及其相關(guān)疾病的流行病學(xué)概況,為實(shí)驗(yàn)提供流行病學(xué)依據(jù)。2.用不同濃度的三氯異氰尿酸溶液暴露斑馬魚(yú),觀察急性毒性反應(yīng),確定三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)的96h半數(shù)致死濃度(LC50)。3.根據(jù)三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)的96h半數(shù)致死濃度,設(shè)計(jì)暴露劑量。分別觀察暴露后斑馬魚(yú)的腦、肝臟、精巢和卵巢等組織器官的病理變化,初步篩選出三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)急性損傷的靶器官。4.通過(guò)病理組織切片和透射電鏡觀察靶器官肝臟細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化,輔助確定靶器官。5.暴露24h后,取肝臟組織,雙向熒光差異電泳結(jié)合質(zhì)譜成像技術(shù)MALDI-TOF/TOF-MS分析篩選差異蛋白,并且鑒定差異蛋白及其功能。6.對(duì)經(jīng)過(guò)篩選鑒定出的差異蛋白質(zhì)蛋進(jìn)行相關(guān)生物信息學(xué)分析。7.用蛋白印記法驗(yàn)證差異蛋白表達(dá)量。從而在分子水平上,用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法分析三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)的急性毒作用的效應(yīng)分子。結(jié)果:1.我們研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),斑馬魚(yú)對(duì)不同濃度三氯異氰尿酸的急性毒性反應(yīng)不同。三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)的96h半數(shù)致死濃度為551.056μg/L。2.三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)的腦、精巢、卵巢的毒性作用不明顯。3.三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)肝臟造成急性損傷,損傷隨著染毒濃度的增高而增大的趨勢(shì)。初步篩選出肝臟是三氯異氰尿酸毒性作用的主要靶器官之一。4.三氯異氰尿酸暴露引起斑馬魚(yú)肝臟組織發(fā)生細(xì)胞凋亡、組織充血、組織形成部分空洞等病理變化,細(xì)胞核和線粒體病變最嚴(yán)重,可能引起斑馬魚(yú)發(fā)生疾病和死亡,并且隨著染毒濃度增加,損傷也逐漸增大。5.經(jīng)過(guò)雙向熒光差異電泳技術(shù)和質(zhì)譜鑒定,我們發(fā)現(xiàn)了BHMT、HPDA、FABP10A、ALDOB等表達(dá)差異蛋白。6.三氯異氰尿酸會(huì)造成斑馬魚(yú)肝臟組織細(xì)胞中的BHMT蛋白的表達(dá)抑制。結(jié)論:1.三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)急性毒性根據(jù)《全球化學(xué)品分類和標(biāo)簽協(xié)調(diào)手冊(cè)》(The Globally Harmonized System of ClassificationLabelling of Chemicals,GSH)以LC50為標(biāo)準(zhǔn)分類,屬于高毒物質(zhì)。2.經(jīng)三氯異氰尿酸暴露后,斑馬魚(yú)腦、精巢和卵巢病理變化不明顯,肝臟可能是三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)急性毒性的主要靶器官之一。3.BHMT蛋白可能是三氯異氰尿酸對(duì)斑馬魚(yú)急性毒性的早期效應(yīng)分子。
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R114

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本文編號(hào)：1244007