本文關(guān)鍵詞：納豆菌糖肽對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用及相關(guān)機(jī)理的研究

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【摘要】：本文研究了納豆菌糖肽(BNGP),對(duì)正常狀態(tài)及脂多糖(LPS)激活狀態(tài)巨噬細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用及其相關(guān)機(jī)制,采用不同濃度的BNGP單獨(dú)處理或LPS和不同濃度的BNGP共同處理RAW264.7巨噬細(xì)胞,檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo),研究結(jié)果如下:1、從小鼠腹腔中分離、培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞,采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖作用,中性紅吞噬試驗(yàn)檢測(cè)吞噬能力,Griess試劑檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中NO含量,酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子(IL-1β、TNF-α)、促炎介質(zhì)(PGE2)含量。試驗(yàn)結(jié)果顯示:納豆菌糖肽(BNGP)在31.25-500μg/mL濃度范圍內(nèi)對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的代謝活力均有顯著提升作用,在62.5-500μg/m L濃度范圍內(nèi)對(duì)細(xì)胞分泌NO、IL-1β、TNF-α、PGE2有顯著的促進(jìn)作用,并呈現(xiàn)出一定的劑量相關(guān)性,其中BNGP濃度為500μg/mL時(shí)促進(jìn)作用最大。當(dāng)細(xì)胞處于LPS激活狀態(tài)時(shí),BNGP在62.5-500μg/m L濃度范圍內(nèi)能協(xié)同LPS增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力,但能抑制IL-1β、TNF-α、PGE2的分泌,而對(duì)NO的分泌無(wú)顯著影響。2、培養(yǎng)RAW264.7巨噬細(xì)胞,采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖作用,中性紅吞噬試驗(yàn)檢測(cè)吞噬能力,Griess試劑檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中NO含量,酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子(IL-1β、TNF-α)、促炎介質(zhì)(PGE2)含量,Western Blot檢測(cè)COX-2和iNOS蛋白表達(dá)水平。試驗(yàn)結(jié)果表明:BNGP在62.5-500μg/m L濃度范圍內(nèi)能提高正常狀態(tài)的RAW264.7巨噬細(xì)胞的代謝活力,增加NO、IL-1β、TNF-α、PGE2的分泌量,提高COX-2和iNOS的表達(dá)量,高濃度(125μg/mL)能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力;當(dāng)細(xì)胞處于LPS激活狀態(tài)時(shí),BNGP在62.5-500μg/mL濃度范圍內(nèi)能抑制IL-1β、TNF-α、PGE2的分泌,濃度為500μg/m L時(shí)可抑制NO的產(chǎn)生及iNOS的表達(dá),高濃度(125μg/m L)則能下調(diào)COX-2的表達(dá)。3.采用流式細(xì)胞術(shù)分析BNGP對(duì)LPS-FITC與RAW264.7巨噬細(xì)胞表面受體結(jié)合的干擾作用,免疫熒光分析BNGP對(duì)NF-κB p65核轉(zhuǎn)位的影響,Western blot檢測(cè)BNGP對(duì)NF-κB p65在細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核的表達(dá),對(duì)NF-κB的抑制性蛋白IκB-α磷酸化的影響。結(jié)果顯示:(1)500μg/m L BNGP能極顯著減少FITC-LPS結(jié)合到巨噬細(xì)胞上的量。(2)62.5-500μg/m L BNGP組的發(fā)生核轉(zhuǎn)位的細(xì)胞比例均極顯著高于對(duì)白對(duì)照組;高濃度BNGP(500μg/mL)能顯著減少由LPS誘導(dǎo)發(fā)生核轉(zhuǎn)位的細(xì)胞比例,而低濃度BNGP(≤250μg/m L)則與LPS組無(wú)顯著差異。(3)BNGP單獨(dú)作用于細(xì)胞時(shí),可劑量依賴性地激活NF-κB從胞質(zhì)轉(zhuǎn)移入核;BNGP與LPS共同作用時(shí),能夠弱化由LPS刺激細(xì)胞引起的NF-κB劇烈的核轉(zhuǎn)位現(xiàn)象。(4)BNGP能促使細(xì)胞質(zhì)中與NF-κB結(jié)合的IκB-α蛋白發(fā)生磷酸化作用;BNGP與LPS共同作用時(shí),能抑制由LPS引起的大量IκB-α蛋白發(fā)生磷酸化作用。
【學(xué)位授予單位】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R151

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1 賈力敏 ,陳曉蔚,江曉,尹姣 ,江漢湖;納豆菌對(duì)致病者生長(zhǎng)抑制作用的初步研究[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2002年05期

2 張麗妍;郝敏;李秋莎;;納豆菌糖苷酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)研究[J];中國(guó)藥物評(píng)價(jià);2013年05期

3 蘇麗萍;納豆菌所具有的抗菌活性──對(duì)于O-157的抑菌效果[J];世界科學(xué);1997年11期

4 林治鑫;張麗妍;谷宇;蘆明春;;納豆菌產(chǎn)糖苷酶的發(fā)酵工藝優(yōu)化[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2013年12期

5 王振強(qiáng);申森;;利用納豆菌提取抗菌物質(zhì)的研究[J];食品與機(jī)械;2007年05期

6 沈柱英;黃占旺;曹靖文;;納豆菌糖肽對(duì)免疫功能低下小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用[J];營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào);2014年04期

7 ;[J];;年期

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1 董英;孫艷輝;;豆渣為基質(zhì)發(fā)酵納豆菌的優(yōu)化[A];農(nóng)業(yè)機(jī)械化與新農(nóng)村建設(shè)——中國(guó)農(nóng)業(yè)機(jī)械學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2006年

2 王娟;陳渝;鮑金勇;黃東;;納豆菌的功能、培養(yǎng)條件及其應(yīng)用[A];第三屆“益生菌、益生元與健康研討會(huì)”論文集[C];2004年

3 張麗靖;楊郁;;納豆菌的抑菌效果及其在豆?jié){保鮮中的應(yīng)用[A];2008年中國(guó)微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

4 袁芳;劉方;;納豆菌Bacillus natto胞內(nèi)抗氧化活性物質(zhì)的研究[A];2008年中國(guó)微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 張文樸;發(fā)酵：成就味美保健食品[N];大眾科技報(bào);2005年

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1 易燦;納豆菌液體發(fā)酵條件優(yōu)化及抗菌物質(zhì)分離純化研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

2 翁其敏;直投式納豆菌發(fā)酵劑的菌種篩選與制備[D];江西農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 丁振濤;副溶血弧菌防治用納豆菌微生態(tài)制劑的研制與開(kāi)發(fā)[D];中山大學(xué);2012年

4 許鵬;產(chǎn)抗菌物質(zhì)的納豆菌選育及發(fā)酵特性的研究[D];安徽工程大學(xué);2012年

5 蒲月華;納豆菌抗菌肽對(duì)對(duì)蝦中金黃色葡萄球菌和單增李斯特菌的控制效應(yīng)及數(shù)學(xué)模型建立[D];廣東海洋大學(xué);2013年

6 陳怡岑;PSE肉保鮮方法及其肉丸制作工藝的研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 王文秀;納豆菌發(fā)酵蛤蜊工藝及其發(fā)酵物中多糖、醇溶物研究[D];青島大學(xué);2015年

8 李元莉;免疫學(xué)方法篩選干酪乳桿菌和納豆菌原生質(zhì)體融合子的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

9 陳雅欣;納豆制備過(guò)程中納豆菌的大豆皂苷酶及大豆異黃酮苷酶[D];大連工業(yè)大學(xué);2010年

10 曹靖文;納豆菌糖肽對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用及相關(guān)機(jī)理的研究[D];江西農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：1211370