本文關(guān)鍵詞：WERI-Rb1腫瘤干細(xì)胞的分離擴(kuò)增及鑒定

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【摘要】：目的分離培養(yǎng)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系WERI-Rb1中的腫瘤干細(xì)胞,建立腫瘤干細(xì)胞的鑒定方法。方法將WERI-Rb1細(xì)胞系接種至無血清培養(yǎng)基,對其中的腫瘤干細(xì)胞行分離、培養(yǎng)擴(kuò)增及傳代,觀察細(xì)胞形態(tài),采用旁群細(xì)胞檢測、克隆形成實(shí)驗(yàn)、CD133流式細(xì)胞儀檢測、熒光定量PCR等方法對腫瘤干細(xì)胞特性進(jìn)行鑒定。結(jié)果體外擴(kuò)增培養(yǎng)的WERI-Rb1細(xì)胞系呈疏松葡萄狀團(tuán)塊,WERI-Rb1細(xì)胞系中存在比例穩(wěn)定的旁群細(xì)胞(0.075±0.017)%,無血清培養(yǎng)基可分離擴(kuò)增培養(yǎng)出WERI-Rb1中的腫瘤干細(xì)胞,形成類l 似胚胎干細(xì)胞的克隆團(tuán)塊,后者具備較高的克隆形成能力,克隆形成率為(31.70±1.89)%,且干細(xì)胞標(biāo)記物CD133的基因及蛋白均高表達(dá),CD133基因表達(dá)量為WERI-Rb1的(2.25±0.19)倍。結(jié)論本研究闡明了視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系WERI-Rb1腫瘤干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增及鑒定方法,證明了WERI-Rb1中腫瘤干細(xì)胞的存在,為后續(xù)對視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的治療提供線索,為進(jìn)一步研究視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤腫瘤干細(xì)胞及胚胎干細(xì)胞等的特性對比提供細(xì)胞來源。
【作者單位】： 暨南大學(xué)附屬深圳眼科醫(yī)院;深圳市眼科醫(yī)院 深圳眼科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤 腫瘤干細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng)
【分類號】：R739.7
【正文快照】： 腫瘤干細(xì)胞是腫瘤中具有干細(xì)胞特性的一類細(xì)胞,既具備高度增殖能力與自我更新能力,也具備多向分化潛能。隨著第1個腫瘤干細(xì)胞——白血病干細(xì)胞的成功分離鑒定[1],許多實(shí)驗(yàn)室已從多種腫瘤組織中分離出了腫瘤干細(xì)胞。目前已有前期研究從人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma,Rb)組織

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本文編號：995928