本文關(guān)鍵詞：PCDH8基因?qū)Ρ茄拾┘?xì)胞株CNE-1作用機(jī)制的研究

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【摘要】：目的探討PCDH8基因表達(dá)對鼻咽癌細(xì)胞體外增殖、周期、侵襲、藥物敏感性等生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制研究。 方法采用脂質(zhì)體介導(dǎo)將質(zhì)粒pcDNA3.1-PCDH8（實(shí)驗組）與質(zhì)粒pcDNA3.1（對照組）轉(zhuǎn)染至鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1，應(yīng)用RT-PCR、Westernblot技術(shù)檢測轉(zhuǎn)染后CNE-1細(xì)胞中PCDH8mRNA及蛋白的表達(dá)情況；通過CCK-8細(xì)胞生長曲線試驗，，流式細(xì)胞周期試驗，Transwell侵襲試驗、CCK-8細(xì)胞藥物敏感性試驗及裸鼠皮下種植瘤模型，進(jìn)一步對轉(zhuǎn)染PCDH8基因的細(xì)胞株CNE-1的增殖能力、生長周期、細(xì)胞侵襲能力、對化療藥物的敏感性及其體內(nèi)成瘤能力進(jìn)行分析，并與轉(zhuǎn)染對照質(zhì)粒的細(xì)胞株進(jìn)行對比。通過Real time PCR檢測實(shí)驗組與對照組MMP-9、MMP-2、VEGF基因mRNA水平表達(dá)變化，Western blot檢測實(shí)驗組與對照組CDK-4、P21、P27、JNK基因蛋白水平表達(dá)變化，了解PCDH8基因在鼻咽癌細(xì)胞內(nèi)的作用機(jī)制。 結(jié)果①RT-PCR、Western blot檢測表明轉(zhuǎn)染質(zhì)粒pcDNA3.1-PCDH8的實(shí)驗組細(xì)胞株中PCDH8mRNA及蛋白成功表達(dá)并明顯高于轉(zhuǎn)染質(zhì)粒pcDNA3.1的對照組細(xì)胞株（P0.05）。②CCK-8細(xì)胞生長曲線試驗表明試驗組細(xì)胞株的生長速度明顯低于對照組（P0.05）。③流式細(xì)胞周期試驗檢測實(shí)驗組細(xì)胞株G0/G1期較對照組增加，S期細(xì)胞較對照組減少（P0.05）；④Tramswell侵襲試驗表明實(shí)驗組細(xì)胞株侵襲能力明顯低于對照組（P0.05）。⑤CCK-8細(xì)胞藥物敏感性試驗表明PCDH8基因表達(dá)能顯著提高鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1對順鉑化療藥物的敏感性（P0.05）；⑥裸鼠鼻咽癌皮下移植瘤模型中表達(dá)PCDH8基因的實(shí)驗組CNE-1細(xì)胞的成瘤能力低于對照組CNE-1細(xì)胞（P0.05）。⑦Realtime PCR試驗證明在mRNA水平上MMP-9在實(shí)驗組的表達(dá)量低于對照組（P0.05），而MMP-2、VEGF在實(shí)驗組的表達(dá)量與對照組無明顯差別(P0.05)；⑧Western bolt試驗中CDK-4、P27、JNK基因在實(shí)驗組中的表達(dá)高于實(shí)驗組的表達(dá)（P0.05）。P21在實(shí)驗組中的表達(dá)高于對照區(qū)但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。結(jié)論脂質(zhì)體成功介導(dǎo)pcDNA3.1-PCDH8與pcDNA3.1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入鼻咽癌CNE-1細(xì)胞株并建立穩(wěn)定細(xì)胞株。PCDH8基因的表達(dá)能降低CNE-1細(xì)胞的增殖、侵襲能力，延緩細(xì)胞分裂周期，提高對順鉑化療藥物的敏感性，降低鼻咽癌細(xì)胞體內(nèi)成瘤能力。PCDH8基因可能通過MMP-9、CDK-4、P27、JNK基因及相關(guān)通路，作用于鼻咽癌細(xì)胞，在抑癌方面起到一定作用。
【關(guān)鍵詞】：PCDH8 鼻咽癌 CNE-1
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R739.63
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 第一部分 PCDH8 基因轉(zhuǎn)染鼻咽癌細(xì)胞株 CNE-1 及其對細(xì)胞生物學(xué)行為的影響12-30
• 1 實(shí)驗材料與方法12-22
• 2 結(jié)果22-28
• 3 討論28-30
• 第二部分 PCDH8 基因?qū)θ吮茄拾┘?xì)胞株 CNE-1 相關(guān)蛋白的影響30-41
• 1 材料與方法30-35
• 2 結(jié)果35-38
• 3 討論38-41
• 全文總結(jié)41-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 附插圖47-51
• 文獻(xiàn)綜述51-58
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 致謝58-59
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文59-60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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2 鄧偉;黃天壬;陳萬青;張思維;鄭榮壽;利基林;;中國2003—2007年鼻咽癌發(fā)病與死亡分析[J];腫瘤;2012年03期

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本文編號：979035