發(fā)布時間：2017-10-05 01:30

  本文關鍵詞：硫醇轉移酶在高糖誘導大鼠糖尿病性白內障形成中的作用

  更多相關文章： 硫醇轉移酶 糖尿病性白內障 高糖 抗氧化酶

【摘要】：目的:硫醇轉移酶(Thioltransferase,TTase)是晶狀體內重要的氧化還原酶,通過還原細胞內氧化損傷產生的硫醇化蛋白,來調節(jié)細胞內巰基的穩(wěn)態(tài),維持細胞內部氧化還原平衡。糖尿病的高血糖狀態(tài),能通過多種途徑誘發(fā)氧化應激反應,導致糖尿病性白內障發(fā)生。為進一步探究糖尿病性白內障與TTase作用之間的關系,闡明TTase在糖尿病性白內障發(fā)生發(fā)展中的作用機制,本研究采用離體糖尿病性白內障模型,觀察高糖對晶狀體氧化損傷修復系統(tǒng)的影響,分析相關氧化還原系統(tǒng)指標變化,探討TTase對晶狀體氧化還原系統(tǒng)可能的保護作用。方法:1.用不同濃度葡萄糖(5.5mmol/L,35.5mmol/L,65.5mmol/L,95.5mmol/L葡萄糖)及相應的甘露醇等滲對照在體外培養(yǎng)大鼠晶狀體7d,建立糖尿病性白內障離體動物模型,動態(tài)觀察晶狀體的混濁情況。測定晶狀體中TTase、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性,氧化型谷胱甘肽(GSSG)與總谷胱甘肽(T-GSH)的比值。2.根據(jù)不同濃度葡萄糖培養(yǎng)的實驗結果,選用35.5mmol/L葡萄糖作為高糖孵育離體大鼠晶狀體,分別于1d、3d、5d和7d測定各組的ttase活性和gssg/t-gsh比值,通過qrt-pcr檢測各組晶狀體的ttasemrna相對含量。并于第7d行晶狀體he和免疫組化方法觀察ttase表達情況。結果:1.高糖組晶狀體較早出現(xiàn)霧狀混濁,在第1d就出現(xiàn)有部分晶狀體出現(xiàn)霧狀混濁,對照組保持相對透明(p0.05);在高糖刺激下,高糖組gssg/t-gsh比值均較正常對照組增加,其組間互相比較無顯著性差異,相應等滲對照組和正常對照組比較差異無顯著性;高糖組的sod和cat較正常對照組降低(p0.05),不同葡萄糖濃度處理組間差異無顯著性。ttase活性增加較正常對照組增加,并在含35.5mmol/l葡萄糖的高糖組中最高(1.743±0.20mu/mgprotein,p0.01)。2.he和免疫組化染色結果顯示,高糖組與正常對照組比較,晶狀體纖維細胞呈腫脹、變性、空泡樣變,有較明顯的差別,正常對照組、等滲對照組的差異不明顯;高糖組gssg/t-gsh比例明顯隨時間增加,1d、3d、5d和7d比值分別為24.89±2.8%、35.99±2.49%、32.81±6.04%和30.99±4.17%,為正常對照的2.21、3.89、2.38和2.74倍(p0.01);在1d、3d、5d和7d時ttase的活性分別為1.25±0.31mu/mgprotein、1.49±0.23mu/mgprotein、1.61±0.20mu/mgprotein和1.91±0.28mu/mgprotein,呈逐漸增長趨勢,分別為正常對照組的1.58、2.28、2.21和2.21倍,且與正常對照組比較均有顯著性差異(p0.01)。qrt-pcr檢測ttasemrna相對含量顯示,35.5mmol/l高糖組在1d時的表達為正常對照組的2.44倍(p0.05),之后3d、5d、7d的表達驟然上升后略有下降,分別為正常對照組的6.58、6.78和3.88倍(p0.05)。相對應的等滲對照組與正常組間比較未見顯著性差異結論:1.高糖環(huán)境可以激活晶狀體內的抗氧化系統(tǒng),使晶狀體發(fā)生抗氧化應激反應,大量消耗gsh,致gssg含量相應增加,gssg/t-gsh比例增高,cat和sod部分失活,晶狀體抗氧化能力下降。而ttase表達適應性增加、酶活性增高,提示ttase可能參與了對抗高糖誘導的氧化應激,發(fā)揮著抵抗氧化應激、調節(jié)晶狀體的氧化還原穩(wěn)態(tài)的保護作用。2.由高糖引起的糖尿病性白內障,其在形態(tài)學上的變化與TTase蛋白表達之間尚未發(fā)現(xiàn)有直接關聯(lián),但TTase活性于早期就有大幅增加,相應時間里反映晶狀體內抗氧化狀態(tài)的GSSG/T-GSH增高。通過qRT-PCR檢測各組晶狀體的TTase mRNA相對含量也證實了這一點,提示TTase可能在糖尿病性白內障發(fā)生的早期就起到重要的保護作用,從而延緩白內障的發(fā)展。
【關鍵詞】：硫醇轉移酶 糖尿病性白內障 高糖 抗氧化酶
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R776.1;R587.2
【目錄】：

• 縮略語表4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 文獻回顧13-25
• 1 材料25-28
• 1.1 實驗動物25
• 1.2 主要試劑25-26
• 1.3 儀器設備26-27
• 1.4 主要溶液配制27-28
• 2 方法28-39
• 2.1 大鼠離體糖尿病性白內障模型的建立28-29
• 2.2 高糖孵育離體晶狀體混濁程度的動態(tài)觀察29
• 2.3 高糖孵育晶狀體標本的采集29-30
• 2.4 晶狀體病理組織和免疫組織化學觀察30-31
• 2.5 晶狀體相關生化指標的測定31-38
• 2.6 統(tǒng)計學處理38-39
• 3 結果39-47
• 3.1 不同濃度高糖孵育晶狀體混濁的變化39-40
• 3.2 晶狀體病理組織和免疫組織學觀察40-41
• 3.3 晶狀體相關生化指標的測定41-47
• 4 討論47-51
• 小結51-52
• 參考文獻52-59
• 附錄59-62
• 個人簡歷和研究成果62-63
• 致謝63-64

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 丁穎;巨朝娟;常英霞;劉繼敏;宋耕;;糖尿病性白內障超聲乳化吸出人工晶狀體植入術療效觀察[J];河北醫(yī)藥;2007年07期

2 王敏;;糖尿病性白內障198例圍術期護理[J];齊魯護理雜志;2011年17期

3 蔡敏玲;;糖尿病性白內障患者的手術護理[J];微創(chuàng)醫(yī)學;2012年06期

4 張曉林;糖尿病性白內障人工晶狀體植入術[J];眼科新進展;1999年06期

5 夏小平,張曉,夏海濤;糖尿病性白內障發(fā)病的有關因素研究[J];江西醫(yī)藥;2000年04期

6 蔣雪羚;真性糖尿病性白內障一例報告[J];中國糖尿病雜志;2000年02期

7 徐海燕;真性糖尿病性白內障1例報道[J];臨床薈萃;2001年09期

8 曹征,夏小平;糖尿病性白內障發(fā)病的有關因素研究[J];臨床眼科雜志;2002年01期

9 姜青麗,王芳,郭玲;對糖尿病性白內障患者實施健康教育的體會[J];齊齊哈爾醫(yī)學院學報;2002年11期

10 廖長琦,李民初;青年糖尿病性白內障1例[J];四川醫(yī)學;2002年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 安四蘭;;糖尿病性白內障手術的術前術后護理[A];全國五官科護理學術交流暨專題講座會議論文匯編[C];2006年

2 李靜華;;個性化健康教育在糖尿病性白內障患者中的應用[A];中華護理學會2009全國五官科護理學術交流暨專題講座會議論文匯編[C];2009年

3 楊躍華;;手術治療糖尿病性白內障患者的膳食指導[A];中國營養(yǎng)學會第六屆臨床營養(yǎng)學術會議論文摘要匯編[C];1997年

4 董淑珍;;糖尿病性白內障與微量元素[A];中國營養(yǎng)學會第八屆微量元素營養(yǎng)學術會議論文摘要匯編[C];2003年

5 李漫麗;戚卉;吳雅臻;崔妤;李沭巖;;葡萄糖調節(jié)蛋白78在糖尿病性白內障發(fā)病機制中的研究[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

6 王冰凌;張國華;;消翳自擬方治療糖尿病性白內障的經(jīng)驗總結[A];內分泌代謝病中西醫(yī)結合研究——臨床與基礎[C];2010年

7 王宇鷹;;糖尿病性白內障患者的健康教育[A];全國第五屆糖尿病護理學術交流暨專題講座會議論文匯編[C];2007年

8 李樹杰;畢宏生;崔彥;王慧;;綠茶防治糖尿病性白內障的效果及機制研究[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

9 施瓊;嚴宏;;肌肽與阿司匹林滴眼液聯(lián)合對早期糖尿病性白內障的抑制作用[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

10 柴飛燕;嚴宏;;谷胱甘肽乙酯和肌肽對延緩糖尿病性白內障的動物和細胞生物學研究[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳 銘　;年老更應防眼病[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 羅怡;晚期糖基化終末產物在糖尿病性白內障中的作用及其分子機制研究[D];復旦大學;2008年

2 解孝鋒;線粒體活性氧與糖尿病性白內障的關系及茶多酚干預作用的實驗研究[D];山東中醫(yī)藥大學;2010年

3 郝麗娜;葛根素、八肽膽囊收縮素逆轉糖尿病性白內障形成及其機制初探[D];河北醫(yī)科大學;2004年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫峰;糖尿病性白內障術后黃斑厚度光學相干斷層掃描的觀察研究[D];蘇州大學;2015年

2 于罡;硫醇轉移酶在高糖誘導大鼠糖尿病性白內障形成中的作用[D];第四軍醫(yī)大學;2014年

3 馬武彬;重組人核糖核酸酶抑制因子對糖尿病性白內障及新生血管性青光眼的防治作用研究[D];大連醫(yī)科大學;2007年

4 馬楠;晚期糖基化終末產物及其受體在糖尿病性白內障發(fā)病中的作用[D];第四軍醫(yī)大學;2011年

5 呂莎;糖尿病性白內障術后角膜內皮細胞的變化研究[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

6 魏科;光學相干斷層掃描對糖尿病性白內障術后黃斑厚度變化的臨床觀察[D];中南大學;2011年

7 丁正華;氨基胍滴眼液對大鼠糖尿病性白內障作用的實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學;2006年

8 李蕊;中藥影響糖尿病性白內障形成的實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2009年

9 張健;一氧化氮對老年性白內障糖尿病性白內障的影響及意義[D];山東大學;2006年

10 李樹杰;STZ誘導的大鼠糖尿病性白內障的發(fā)病機制及綠茶的防治效果研究[D];山東中醫(yī)藥大學;2007年

，

本文編號：974034