維生素C與過氧化氫對(duì)老年豚鼠耳蝸外毛細(xì)胞大電導(dǎo)鈣激活鉀通道電流的影響
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【摘要】:目的研究過氧化氫(H2O2)及維生素C對(duì)老年豚鼠耳蝸外毛細(xì)胞大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(large conductance Ca2+-activated potassium channels,BKCa channels)電流的影響及其機(jī)制。方法采用急性酶分離方法分離25只老年豚鼠耳蝸外毛細(xì)胞,以膜片鉗全細(xì)胞記錄方式觀察BKCa通道電流(5只豚鼠);記錄到穩(wěn)定、正常的BKCa通道電流后,向新鮮分離貼壁外毛細(xì)胞的2ml浴槽的浴液中加入H2O2稀釋液40μl,使浴液中H2O2濃度為4μmol/L,觀察H2O2對(duì)BKCa通道電流的影響(5只豚鼠);再分組加入維生素C溶液10、20、40μl(各組5只豚鼠),使浴液中維生素C終濃度分別為25、50、100μg/ml,觀察H2O2和維生素C聯(lián)合作用對(duì)BKCa通道電流的影響。結(jié)果 1膜片鉗全細(xì)胞記錄模式下,記錄到一串幅值較大、快速激活、幾乎不失活的電流,激活電壓大于-40~-30mV,電流隨膜電位的增加而增強(qiáng),并表現(xiàn)出外向整流的特性;加入BKCa通道特異性阻斷劑伊比利亞毒素(iberiotoxin,IbTX)100nmol/L后,通道活動(dòng)完全阻斷,證實(shí)為BKCa通道電流。2加入H2O2后,用藥3分鐘內(nèi),當(dāng)VT為+50mV時(shí),BKCa通道峰值電流密度最大值從22.09±0.27pA/pF升至43.53±1.09pA/pF,增幅97.06%。H2O24μmol/L+25、50、100μg/ml維生素C時(shí),BKCa通道電流表現(xiàn)濃度依賴性抑制,電流幅值和峰值電流密度隨著維生素C濃度增加而減小,I-V曲線下降,洗脫后仍不能恢復(fù)至加藥前正常水平。結(jié)論老年豚鼠耳蝸外毛細(xì)胞存在氧自由基/BKCa途徑,而維生素C可減輕氧自由基對(duì)外毛細(xì)胞BKCa通道的影響。
【作者單位】: 瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科;宜賓市第一人民耳鼻咽喉科;
【關(guān)鍵詞】: 大電導(dǎo)鈣激活鉀通道 外毛細(xì)胞 氧自由基 維生素C 過氧化氫
【基金】:四川省衛(wèi)生廳科學(xué)研究項(xiàng)目(130358)資助
【分類號(hào)】:R764
【正文快照】: △四川省衛(wèi)生廳科學(xué)研究項(xiàng)目(130358)資助1瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科(瀘州646000);2宜賓市第一人民耳鼻咽喉科of vitamin C to electric current of BKCa channels.Results 1In the whole-cell mode of patch-clamp,the rapidactivation and non-deactivation elec
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