本文關(guān)鍵詞：SUMO蛋白在體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)及對氧化應(yīng)激的調(diào)控作用

  更多相關(guān)文章： 小泛素相關(guān)修飾物 人晶狀體上皮細(xì)胞 白內(nèi)障 高糖 氧化應(yīng)激

【摘要】：目的觀察小泛素相關(guān)修飾物(SUMO)在體外正常培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞系(SRA01/04)內(nèi)的表達(dá)以及由高糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激條件下SUMO的變化,探討其對氧化應(yīng)激的調(diào)控作用。方法通過免疫細(xì)胞化學(xué)染色法,檢測SUMO1,2/3,4蛋白在正常培養(yǎng)的SRA01/04內(nèi)的表達(dá)及分布;通過RT-PCR法,觀察不同濃度和時間高糖處理時SUMO 1~4 mRNA的表達(dá)變化。按濃度實(shí)驗(yàn)分組:葡萄糖濃度分別為5.5、12.5、25、50 mmol/L作用24 h。按時間實(shí)驗(yàn)分組:葡萄糖濃度50 mmol/L作用0、6、12、24 h。將GFP-SUMO2質(zhì)粒轉(zhuǎn)入細(xì)胞后通過CCK8檢測法和AV/PI雙染流式細(xì)胞儀檢測高糖(50 mmol/L)處理后,轉(zhuǎn)染與非轉(zhuǎn)染組的細(xì)胞存活率和細(xì)胞凋亡率。結(jié)果免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果 ,SUMO 1~4蛋白在SRA01/04細(xì)胞內(nèi)主要分布于細(xì)胞核,SUMO 2/3同時少量分布于胞質(zhì);RT-PCR結(jié)果可見,與低糖組比較,高糖組隨著糖濃度增加SUMO1~SUMO4 mRNA表達(dá)增加(P0.05);與50 mmol/L高糖處理0 h比較,隨著處理時間增加SUMO1~SUMO4 m RNA表達(dá)增加(P0.05)。與非轉(zhuǎn)染組比較,轉(zhuǎn)染GFPSUMO2的SRA01/04經(jīng)高糖處理后存活率增加,凋亡率降低(P0.05)。結(jié)論 SUMO蛋白在SRA01/04內(nèi)陽性表達(dá),一定程度高糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激影響SUMO mRNA表達(dá)。
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院眼科;遼寧省晶狀體學(xué)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 小泛素相關(guān)修飾物 人晶狀體上皮細(xì)胞 白內(nèi)障 高糖 氧化應(yīng)激
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81170836) 遼寧省自然科學(xué)基金(201202260;2013021016)
【分類號】：R776.1
【正文快照】： 白內(nèi)障是一種常見且嚴(yán)重致盲疾病之一,一般認(rèn)為氧化損傷是其重要致病途徑,晶狀體上皮細(xì)胞過度凋亡是其重要病理機(jī)制[1]。高濃度血糖易導(dǎo)致1型糖尿病患者并發(fā)糖尿病性白內(nèi)障,并加速2型糖尿病患者年齡相關(guān)性白內(nèi)障的形成[2,3],大量實(shí)驗(yàn)已證高糖誘導(dǎo)氧化損傷引起晶狀體上皮細(xì)胞過

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本文編號：785453