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大鼠外傷性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞中TGF-β1及ICAM-1表達(dá)的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-02 22:19

  本文關(guān)鍵詞:大鼠外傷性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞中TGF-β1及ICAM-1表達(dá)的研究


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【摘要】:目的:外傷性白內(nèi)障的發(fā)展變化是一個(gè)比較復(fù)雜的生理生化過(guò)程,是眾多眼外傷發(fā)展進(jìn)程中都會(huì)存在的情況之一。在某種程度上,外傷性白內(nèi)障與后發(fā)性白內(nèi)障有著大體相同的致病機(jī)理,二者客觀上都是對(duì)晶狀體的一種創(chuàng)傷刺激過(guò)程。因此研究外傷性白內(nèi)障的致病機(jī)理不但可以對(duì)其預(yù)防和診治達(dá)到事半功倍的效果,更有意義的是,可以指導(dǎo)防治后發(fā)性白內(nèi)障的發(fā)生,為患者術(shù)后保存良好視力起到關(guān)鍵性作用。近年來(lái),與白內(nèi)障形成相關(guān)的某些細(xì)胞因子得到了科學(xué)家們的密切關(guān)注。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)可使晶體上皮細(xì)胞發(fā)生異常排列、紡錘形分化并細(xì)胞外基質(zhì)(ext ra ce llular matrix,ECM)積聚增厚而致白內(nèi)障樣改變。細(xì)胞間粘附分子-1(inter cellular adhesionmolecule-1, ICAM-1)介導(dǎo)多種細(xì)胞之間、細(xì)胞-ECM之間彼此附著粘連,同時(shí)也調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)分化、延伸遷移等生物學(xué)行為。本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)觀察TGF-β1和ICAM-1在外傷性白內(nèi)障晶體上皮細(xì)胞(1ens epithelial cell,LEC)中的表達(dá)狀況,探討二者之間的相聯(lián)性以及它們與白內(nèi)障的發(fā)病關(guān)系;為外傷性白內(nèi)障的發(fā)病機(jī)理及其一般發(fā)展規(guī)律提供可能性理論依據(jù);為白內(nèi)障的臨床預(yù)防與治療提供有效的新方向。 方法:取20只體重為280g±30g健康成年大鼠,雌雄皆可。模型組:均在大鼠左眼人為建立穿透?jìng)园變?nèi)障動(dòng)物模型;正常對(duì)照組:未穿刺的對(duì)側(cè)右眼。術(shù)后將大鼠隨機(jī)抽取為12h(0.5d),24h(1d),72h(3d),168h(7d)4個(gè)時(shí)段組,每組各有5只,仔細(xì)察看各組大鼠晶狀體混濁纖維化的程度狀況。通過(guò)免疫組化染色法觀察大鼠LEC中ICAM-1的表達(dá)變化情況,用同樣的方法觀察TGF-β1的表達(dá)情況,比較造模前后各組中二者的含量水平;分析各組LEC內(nèi)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1與ICAM-1的相關(guān)性。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件管理數(shù)據(jù),P<0.05代表具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果: 1.造模后用裂隙燈觀察各組外傷性白內(nèi)障的發(fā)展情況:對(duì)側(cè)眼組大鼠晶狀體始終未見(jiàn)纖維化;模型組晶狀體均出現(xiàn)不一樣程度的混濁,且纖維化程度呈時(shí)間依賴性。術(shù)后12h(0.5d)僅限于針頭劃傷的地方呈輕微混濁;術(shù)后1d混濁面積逐漸擴(kuò)張,呈淡白色云片狀;術(shù)后3d范圍更大且混濁加深,呈白色絮狀混濁及斑片狀混濁;術(shù)后5d呈白色凝塊樣大面積混濁。此后白內(nèi)障纖維化進(jìn)展大致趨于穩(wěn)固不變。 2.采用免疫組織化學(xué)染色方法測(cè)出各組LEC中TGF-β1、ICAM-1的表達(dá):①TGF-β1的表達(dá)情況:正常對(duì)側(cè)眼組可見(jiàn)到少數(shù)散在TGF-β1蛋白表達(dá),模型組各時(shí)間點(diǎn)TGF-β1較對(duì)側(cè)眼組的陽(yáng)性表達(dá)率明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t0.5d=5.269,t1d=9.610,t3d=20.857,t7d=31.790,每組間均P0.05);在四個(gè)時(shí)間組中,模型組的TGF-β1表達(dá)逐漸增多(F=235.592,P0.05;組間多重比較,各組間P 0.05),此目的因子在對(duì)側(cè)眼組中的表達(dá)無(wú)明顯變化(F=0.565,P0.05)。②ICAM-1的表達(dá)情況:對(duì)側(cè)眼組沒(méi)有發(fā)現(xiàn)目的因子的蛋白染色,,模型組各時(shí)間點(diǎn)ICAM-1較對(duì)側(cè)眼組的陽(yáng)性表達(dá)率明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t0.5d=25.332,t1d=32.933,t3d=43.507,t7d=56.482,每組間均P0.05);在四個(gè)時(shí)間組中,模型組ICAM-1含量逐漸增加(F=92.383,P0.05;組間多重比較,各組間P0.05),而對(duì)側(cè)眼組的ICAM-1無(wú)明顯變化(F=0.047,P0.05)。 ③經(jīng)線性相關(guān)性分析證明,模型組LEC中TGF-β1表達(dá)與ICAM-1呈顯著正相關(guān)(r=0.863P0.05)。 結(jié)論: 1.外傷性白內(nèi)障病理表現(xiàn)為晶狀體蛋白異常改變以及上皮細(xì)胞非正常纖維化生長(zhǎng)、延伸和上皮-間充質(zhì)變化。 2.外傷性白內(nèi)障LEC中TGF-β1、ICAM-1的陽(yáng)性染色均高于對(duì)側(cè)眼組,且二者具有明顯相關(guān)性。說(shuō)明當(dāng)晶狀體受到創(chuàng)傷應(yīng)激時(shí),促進(jìn)TGF-β1及ICAM-1產(chǎn)生增多,共同參與外傷性白內(nèi)障的形成及發(fā)展過(guò)程。
【關(guān)鍵詞】:外傷性白內(nèi)障 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 晶狀體上皮細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R776.1
【目錄】:
  • 摘要7-9
  • Abstract9-12
  • 前言12-13
  • 材料與方法13-17
  • 1. 實(shí)驗(yàn)對(duì)象13
  • 2. 主要試劑13
  • 3. 主要儀器13-14
  • 4. 動(dòng)物模型14
  • 5. 實(shí)驗(yàn)分組14
  • 6. 標(biāo)本處理14
  • 7. 指標(biāo)測(cè)定14-16
  • 8. 數(shù)據(jù)分析16-17
  • 結(jié)果17-20
  • 1. 造模后用裂隙燈觀察各組大鼠單眼外傷性白內(nèi)障晶狀體的形成情況17
  • 2. 免疫組化檢結(jié)果17-20
  • 討論20-26
  • 結(jié)論26-27
  • 參考文獻(xiàn)27-29
  • 綜述29-37
  • 參考文獻(xiàn)35-37
  • 致謝37-38

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 陳建糧;細(xì)胞間粘附分子1表達(dá)的調(diào)控[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊(cè));2000年05期

2 肖瑛;高志娟;潘慶敏;趙敬杰;;TGF-β1、bFGF在先天性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞內(nèi)表達(dá)增強(qiáng)[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2007年10期

3 郝思國(guó),孫關(guān)林,鄔維禮,吳英理;TGF-β1對(duì)臍血體外擴(kuò)增中造血祖細(xì)胞生物學(xué)特性影響[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2004年01期

4 萬(wàn)光明,張效房;外傷性白內(nèi)障動(dòng)物模型的制作探討[J];眼外傷職業(yè)眼病雜志.附眼科手術(shù);2002年06期

5 王向華;李秋明;鄭廣瑛;;兒童外傷性白內(nèi)障手術(shù)后影響視力恢復(fù)的原因分析[J];眼外傷職業(yè)眼病雜志(附眼科手術(shù));2007年06期

6 徐國(guó)興,胡建章,鄭衛(wèi)東,張聲,王婷婷;基質(zhì)金屬蛋白酶2和金屬蛋白酶2組織抑制因子及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β_1在糖尿病性白內(nèi)障患者晶狀體上皮細(xì)胞的表達(dá)及意義[J];中華眼科雜志;2003年07期



本文編號(hào):781208

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