本文關鍵詞：美國捐獻的中期保存角膜復雜環(huán)境運輸前后內(nèi)皮細胞活性研究

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【摘要】：研究背景：據(jù)2008年第2次全國殘疾人抽樣調(diào)查統(tǒng)計，中國目前共有視力殘疾1233萬人，其中因角膜病致盲約400萬人，角膜病為第2位致盲原因【1】。其中大部分角膜病致盲患者可以通過角膜移植手術(shù)重見光明。由于角膜供體來源嚴重匱乏，我國每年角膜移植手術(shù)的數(shù)量僅為4000~5000例，其中部分采用我國供體捐獻角膜，，保存方法以短期保存為主，多不超過24小時。小部分采用美國供體捐獻角膜，保存方法以M-K液及Optisol液中期保存為主，保存時間4d-14d。極小部分采用長期冷凍或甘油保存。相比之下，中期保存角膜更有利于受體與供體對接，同時使受體獲得質(zhì)量較高角膜【2】。為使角膜盲患者提供進一步的復明機會，在我國角膜捐獻不能滿足實際臨床需要之前，擴大角膜供體源，沈陽陸軍總院采用美國捐獻角膜，給角膜盲患者帶來福音，但由于捐獻及接收原因，無形中使角膜獲得至臨床應用的運輸及保存時間延長，復雜及長時間的運輸條件，對角膜保存技術(shù)及質(zhì)量提出了更高要求，為使我國角膜盲患者用上合格高質(zhì)量角膜，手術(shù)更可靠，要求對供體角膜質(zhì)量進行快速、客觀及系統(tǒng)評價，其中以內(nèi)皮細胞活性及數(shù)目最為關鍵。而內(nèi)皮細胞對于角膜移植，術(shù)后角膜移植排斥，角膜水腫等并發(fā)癥有重要意義，評價內(nèi)皮細胞經(jīng)長途長時間復雜環(huán)境運輸直至臨床應用前活性及質(zhì)量，從而探討角膜中長期保存意義。本文研究對2012年3月至2013年3月我院接受美國捐獻角膜共77例，總結(jié)如下。 目的：評價中期保存角膜經(jīng)復雜環(huán)境長時間長距離運輸后的質(zhì)量及臨床適用性，進而為指導我國角膜保存及運輸規(guī)范化提供依據(jù)。 方法：對2012年3月~2013年3月我院接受并應用于臨床的角膜77例按運輸時間長短及采用保存液不同進行分組，通過對內(nèi)皮細胞進行臺盼藍-茜素紅染色、病理切片及掃描和透射電鏡檢查，對其內(nèi)皮細胞數(shù)目、活性及超微結(jié)構(gòu)系統(tǒng)分析。 結(jié)果：1.內(nèi)皮細胞存活率及數(shù)目：中期4d-7d（I）及8d-14d（II）保存組角膜內(nèi)皮細胞數(shù)目無明顯差異（P0.05），且兩組與超過14d（III）保存組之間存在明顯差異（P0.05），且細胞多呈六角形（圖3）。M-K液及Optisol液保存組內(nèi)皮細胞數(shù)目無明顯差異（P0.05）。 2.內(nèi)皮細胞存活率：超14d保存組（M-K液1例及Optisol液3例）內(nèi)皮細胞存活率均明顯下降，臺盼藍染色示細胞核大量藍染（圖1，2），不適用于臨床，放棄穿透性及內(nèi)皮細胞角膜移植。 3.病理切片檢查：篩選最佳病理切片（圖4-9），可見I、II組角膜五層結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)皮細胞呈單層連續(xù)貼附于后彈力層后，細胞核深紫色，細胞壁完整。III組內(nèi)皮細胞完全脫失。 4.內(nèi)皮細胞超微結(jié)構(gòu)觀察： 4.1篩選最佳保存掃描電鏡可見I組及II組角膜內(nèi)皮細胞多呈六角形，連接緊密，大小均勻，表面平整，微絨毛豐富（圖10），III組內(nèi)皮細胞失去正常結(jié)構(gòu)，間隙增大，部分細胞壁溶解，表面絨毛脫落（圖11）。 4.2對應透射電鏡可見I組和II組角膜內(nèi)皮細胞細胞膜和核完整，細胞核呈長橢圓形，且均勻平整，微絨毛豐富（圖12）。III組內(nèi)皮細胞部分核溶解，線粒體腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，并有空泡形成（圖13）。 結(jié)論：1.美國眼庫捐獻角膜經(jīng)中期保存，并經(jīng)長途運輸后內(nèi)皮細胞活性及數(shù)目符合角膜移植臨床標準【3】，適用于臨床，其運輸時間以4d-14d為宜。 2.常用中期保存液M-K液及Optisol液均具有良好的保持角膜內(nèi)皮細胞活性及數(shù)目作用，二者保存效果之間無明顯差異。
【關鍵詞】：角膜內(nèi)皮細胞 中期保存 活性 超微結(jié)構(gòu)
【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R772.2
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 材料和方法13-17
• 結(jié)果17-19
• 討論19-22
• 討論22-23
• 附表23-26
• 附圖26-33
• 參考文獻33-34
• 綜述34-41
• 參考文獻39-41
• 致謝41-42

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 樂學工;角膜內(nèi)皮“泵”[J];眼科研究;1996年02期

2 高明宏,藍平,陳偉,安天義,孟彤柏;簡化四步法低溫保存角膜的實驗研究[J];中國實用眼科雜志;2000年06期

本文編號：653968