年齡相關性黃斑變性(AMD)是當今導致全球人類失明的主要原因之一。玻璃體腔注射抗VEGF抗體和VEGF Trap是目前臨床上治療該類疾病的主要治療方式,并取得顯著效果。但是,由于玻璃體腔注射并發(fā)癥、藥物耐受、患者依從性差等不足仍然需要探索新的治療手段。目的本課題從細胞水平和動物水平初步探討多靶點酪氨酸激酶抑制劑-樂伐替尼抑制脈絡膜新生管的作用及機制,為探索更安全、有效的抗新生血管類AMD眼底疾病治療提供新的策略。方法1.樂伐替尼體外抗血管作用。通過CCK-8法檢測樂伐替尼對人脈絡膜微血管內皮細胞(HCMECs)、人腦血管周細胞(HBVPs)的增殖抑制作用;細胞劃痕法和基質膠體外小管形成實驗分別檢測樂伐替尼對HCMECs細胞遷移、成管的影響;2.Alamar Blue檢測法檢測不同濃度樂伐替尼對體外培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜母細胞瘤Y79(Y79)代謝影響,LDH法分析樂伐替尼對Y79細胞的細胞毒性作用;3.Western blot法檢測樂伐替尼對HCMECs和HBVPs細胞表面血管相關受體VEGF2R、FGF2R及PDGFRβ蛋白表達及其活化形式—磷酸化水平的影響,初步探究樂伐替尼抗血管生成的信號...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一部分 樂伐替尼對細胞的增殖、遷移、成管及細胞毒性作用研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
    3 結果
        3.1 樂伐替尼對HCMEC和HBVP細胞的增殖抑制結果
        3.2 樂伐替尼對Y79細胞的毒性作用和代謝影響檢測結果
        3.3 樂伐替尼對VEGF和bFGF引起的HCMECs細胞遷移抑制結果
        3.4 樂伐替尼對VEGFl65聯(lián)合bFGF引起的HCMECs細胞成管抑制結果
    4 討論
    5 結論
第二部分 樂伐替尼對HCMEC和HVBP細胞中血管相關膜蛋白表達水平影響研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
    3 結果
        3.1 HCMEC細胞中VEGFR、FGFR及其磷酸化蛋白水平表達檢測結果
        3.2 HBVP細胞中PDGFRβ及其磷酸化蛋白水平表達檢測結果
    4 討論
    5 結論
第三部分 樂伐替尼對轉基因斑馬魚節(jié)間血管生長及發(fā)育的影響研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
    3 結果
        3.1 樂伐替尼對轉基因斑馬魚節(jié)間血管生長抑制研究結果
        3.2 樂伐替尼對轉基因斑馬魚胚胎發(fā)育影響觀察結果
    4 討論
    5 結論
第四部分 樂伐替尼在小鼠脈絡膜新生血管(CNV)動物模型體內的抗血管作用研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
    3 結果
        3.1 樂伐替尼對激光致小鼠脈絡膜病灶區(qū)域熒光滲漏面積的影響
        3.2 樂伐替尼對CNV模型鼠眼球組織病理改變的影響結果
    4 討論
    5 結論
第五部分 樂伐替尼在SD大鼠血漿及視網(wǎng)膜組織中的藥代動力學分析
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
    3 結果
    4 討論
    5 結論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
致謝



本文編號：3904490