目的:表觀遺傳修飾與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),其中組蛋白修飾是一種常見的表觀遺傳調(diào)控基因表達(dá)的方式,以往有研究表明PHF19基因參與組蛋白修飾過程,并與腫瘤有關(guān)。本課題將研究PHF19在鼻咽癌組織中的表達(dá)情況,以及PHF19對(duì)鼻咽癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲能力的影響,探討其在鼻咽癌發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮的作用。方法:1.應(yīng)用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)12例鼻咽癌和12例鼻咽粘膜慢性炎組織中PHF19 mRNA的表達(dá)水平;應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)97例鼻咽癌和58例鼻咽粘膜慢性炎組織中PHF19蛋白的表達(dá)水平。2.分別設(shè)計(jì)并包裝含PHF19基因干擾片段和空載片段的慢病毒,感染鼻咽癌細(xì)胞株CNE1,經(jīng)嘌呤霉素篩選得到穩(wěn)定細(xì)胞株,分別作為PHF19沉默實(shí)驗(yàn)組和空載組,未處理的細(xì)胞作為對(duì)照組。3.應(yīng)用qRT-PCR和免疫蛋白印跡法檢測(cè)不同組別細(xì)胞中PHF19 mRNA和蛋白的表達(dá)水平。4.應(yīng)用MTT實(shí)驗(yàn)觀察各組細(xì)胞在培養(yǎng)24h、48h、72h、96h的增殖情況(以O(shè)D值表示);進(jìn)行平板克隆形成實(shí)驗(yàn),待平板中出現(xiàn)肉眼可見克隆時(shí),終止培養(yǎng)并計(jì)算克隆形成數(shù)。5.應(yīng)用細(xì)胞劃痕、Transwell遷移實(shí)驗(yàn)研究PHF19沉默對(duì)...

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
個(gè)人簡(jiǎn)歷
1.中文摘要
2.英文摘要
3.前言
4.材料與方法
5.結(jié)果
6.討論
7.結(jié)論
8.參考文獻(xiàn)
9.附錄
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào)：3777070