R848對變應(yīng)性鼻炎的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時間:2022-02-24 15:05
目的:Resiquimod(R848)是一種Toll-like receptor7/8(TLR7/8)激動劑,目前研究表明R848具有抑制2型免疫的巨大潛能,但具體作用機(jī)制尚未十分清楚。本實驗研究R848對卵清蛋(ovalbumin,OVA)和重組小鼠IL-33(recombinant mouse IL-33,rmIL-33)構(gòu)建的小鼠變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis,AR)的作用及機(jī)制。方法:利用OVA和rmIL-33構(gòu)建BALB/c小鼠AR模型,用R848進(jìn)行干預(yù)治療。用末次rmIL-33滴鼻打噴嚏和抓鼻子計數(shù)評估rmIL-33刺激小鼠鼻部癥狀改變,Hematoxylin and eosin(H&E)和Periodic Acid-Schiff(PAS)染色分別檢測小鼠鼻黏膜嗜酸性粒細(xì)胞浸潤、杯狀細(xì)胞增生情況,免疫熒光染色(immunofluorescence staining,IF)檢測鼻部ST2的表達(dá)水平,酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)檢測血清中上皮細(xì)胞來源的細(xì)胞因子IL-33、IL-25...
【文章來源】:廣西中醫(yī)藥大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
引言
1、材料和方法
1.1 實驗動物
1.1.1 OVA構(gòu)建AR模型和R848干預(yù)
1.1.2 rmIL-33構(gòu)建AR模型和R848干預(yù)
1.2 小鼠的行為學(xué)觀察
1.3 標(biāo)本收集和制備
1.3.1 血清收集
1.3.2 單個脾細(xì)胞制備
1.3.3 石蠟切片制備
1.3.4 鼻粘膜收集
1.4 檢測方法
1.4.1 組織化學(xué)染色
1.4.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測
1.4.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(Flow cytometric Analysis,FCM)
1.4.4 實時熒光定量PCR(Quantitative real-time RT-PCR,qRT-PCR)
1.5 統(tǒng)計學(xué)分析
2、結(jié)果
2.1 R848降低OVA誘導(dǎo)的AR小鼠鼻粘膜IL-25和IL-33,但對TSLP表達(dá)無影響
2.2 R848降低OVA誘導(dǎo)的AR小鼠鼻粘膜ST2的表達(dá)水平
2.3 R848升高OVA誘導(dǎo)的AR脾臟Th1/Th2細(xì)胞比例
2.4 R848減輕rmIL-33刺激引起小鼠的鼻部癥狀
2.5 R848降低rmIL-33刺激引起小鼠的鼻部嗜酸性粒細(xì)胞浸潤、杯狀細(xì)胞增生和ST2表達(dá)
2.6 R848升高rmIL-33刺激小鼠的IFN-γ并降低IL-17表達(dá)水平
2.7 R848降低rmIL-33刺激小鼠鼻黏膜的IL-17mRNA表達(dá)量并升高IFN-γ和Foxp3mRNA表達(dá)量
2.8 R848降低rmIL-33刺激小鼠脾臟Th17細(xì)胞比例并升高Th1和Treg細(xì)胞比例
3、討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷及攻讀學(xué)位期間獲得的科研成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]IL-33及其受體ST2與變應(yīng)性鼻炎發(fā)病機(jī)制的相關(guān)性探討[J]. 杜云艷,羅英,楊春平,柳佳麗,萬俊,王琨. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2015(09)
[2]固有免疫中模式識別受體及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)——當(dāng)代免疫學(xué)中最偉大的發(fā)現(xiàn)之一[J]. 金伯泉. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(01)
本文編號:3642969
【文章來源】:廣西中醫(yī)藥大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
引言
1、材料和方法
1.1 實驗動物
1.1.1 OVA構(gòu)建AR模型和R848干預(yù)
1.1.2 rmIL-33構(gòu)建AR模型和R848干預(yù)
1.2 小鼠的行為學(xué)觀察
1.3 標(biāo)本收集和制備
1.3.1 血清收集
1.3.2 單個脾細(xì)胞制備
1.3.3 石蠟切片制備
1.3.4 鼻粘膜收集
1.4 檢測方法
1.4.1 組織化學(xué)染色
1.4.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測
1.4.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(Flow cytometric Analysis,FCM)
1.4.4 實時熒光定量PCR(Quantitative real-time RT-PCR,qRT-PCR)
1.5 統(tǒng)計學(xué)分析
2、結(jié)果
2.1 R848降低OVA誘導(dǎo)的AR小鼠鼻粘膜IL-25和IL-33,但對TSLP表達(dá)無影響
2.2 R848降低OVA誘導(dǎo)的AR小鼠鼻粘膜ST2的表達(dá)水平
2.3 R848升高OVA誘導(dǎo)的AR脾臟Th1/Th2細(xì)胞比例
2.4 R848減輕rmIL-33刺激引起小鼠的鼻部癥狀
2.5 R848降低rmIL-33刺激引起小鼠的鼻部嗜酸性粒細(xì)胞浸潤、杯狀細(xì)胞增生和ST2表達(dá)
2.6 R848升高rmIL-33刺激小鼠的IFN-γ并降低IL-17表達(dá)水平
2.7 R848降低rmIL-33刺激小鼠鼻黏膜的IL-17mRNA表達(dá)量并升高IFN-γ和Foxp3mRNA表達(dá)量
2.8 R848降低rmIL-33刺激小鼠脾臟Th17細(xì)胞比例并升高Th1和Treg細(xì)胞比例
3、討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷及攻讀學(xué)位期間獲得的科研成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]IL-33及其受體ST2與變應(yīng)性鼻炎發(fā)病機(jī)制的相關(guān)性探討[J]. 杜云艷,羅英,楊春平,柳佳麗,萬俊,王琨. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2015(09)
[2]固有免疫中模式識別受體及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)——當(dāng)代免疫學(xué)中最偉大的發(fā)現(xiàn)之一[J]. 金伯泉. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(01)
本文編號:3642969
本文鏈接:http://www.sikaile.net/yixuelunwen/yank/3642969.html
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