第三代LMP1 CAR-T細(xì)胞的制備及對(duì)鼻咽癌細(xì)胞殺傷作用研究
發(fā)布時(shí)間:2021-12-19 01:57
鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是耳鼻咽喉頭頸外科最常見的惡性腫瘤,常因病灶復(fù)發(fā)和頭頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移而影響患者生存質(zhì)量。目前放療為鼻咽癌治療的首選,但是由于鼻咽癌早期癥狀并不典型,患者往往錯(cuò)過治療的最佳階段,徹底清除鼻咽癌細(xì)胞存在較大困難。以T細(xì)胞過繼治療為基礎(chǔ)發(fā)展而來的嵌合抗原受體(chimeric antigen receptor,CAR)T細(xì)胞治療技術(shù)因其特有的靶向性,特異性殺傷腫瘤細(xì)胞成為腫瘤免疫治療的“新貴”。目前,以CD19為標(biāo)靶的代表性CAR-T細(xì)胞治療血液系統(tǒng)惡性腫瘤(特別是B細(xì)胞前體急性淋巴細(xì)胞白血。┤〉妹黠@的療效,并被美國FDA批準(zhǔn)上市。雖有CD19 CAR-T細(xì)胞順利治愈復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤的個(gè)案,然而大部分實(shí)體瘤缺少特異性靶標(biāo)和體內(nèi)免疫逃逸機(jī)制,始終是CAR-T細(xì)胞應(yīng)用于實(shí)體瘤必須攻克的兩大難點(diǎn)。研究表明,鼻咽癌可由EB病毒感染所致。EB病毒介導(dǎo)鼻咽上皮細(xì)胞非極化,通過對(duì)EMT通路的調(diào)控誘導(dǎo)鼻咽部上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)化,干擾正常鼻粘膜細(xì)胞的生理功能,促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲,并且抑制其凋亡。EB病毒潛伏膜蛋白1(latent memb...
【文章來源】:南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
LMP1CAR慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建
1 CAR 慢病毒表達(dá)載體在 X-293T 細(xì)胞中的表達(dá)。泳道;泳道 2:CD19 CAR 轉(zhuǎn)染的 X-293T 細(xì)胞;泳道 3:LT 細(xì)胞。e expression of LMP1 CAR lentiviral expression vector in cted X-293T cells; 2: X-293T cells transfected by CD19 CActed by LMP1 CAR.
圖 1:T 細(xì)胞與 LMP1 CAR-T 細(xì)胞表面抗原的檢測(cè)胞術(shù)檢測(cè)鼻咽癌細(xì)胞表面抗原 LMP1 的表達(dá)數(shù)期生長的鼻咽癌細(xì)胞 CNE1、CNE2、HONE1、C666-1 人 LMP1 抗體,二抗選擇 FITC 標(biāo)記鼠源抗羊的熒光抗體照,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)鼻咽癌細(xì)胞表面抗原 LMP1 的表達(dá)檢測(cè)鼻咽癌的結(jié)果如圖紅色曲線,同型對(duì)照抗體檢測(cè)結(jié)果果表明,鼻咽癌細(xì)胞 CNE1 中 LMP1 的表達(dá)與同型對(duì)照LMP1 高表達(dá);鼻咽癌細(xì)胞 CNE2 與 C666-1 中 LMP1 的表分,為 LMP1 低表達(dá);而鼻咽癌細(xì)胞 HONE1 與 SUNE1 對(duì)照抗體并不能區(qū)分,為 LMP1 低表達(dá)甚至不表達(dá)(圖 2)擇 LMP1 高表達(dá)的鼻咽癌細(xì)胞株 CNE1,LMP1 低表達(dá)的及 LMP1 不表達(dá)的鼻咽癌細(xì)胞株 HONE1 用于后續(xù)的研究
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]宮頸癌細(xì)胞高遷移率族警報(bào)素的分泌與腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞的相關(guān)性[J]. 李晶,魏楓,楊帆,鄭禹,趙華,任秀寶. 中國腫瘤生物治療雜志. 2017(03)
[2]T cells expressing a LMP1-specific chimeric antigen receptor mediate antitumor effects against LMP1-positive nasopharyngeal carcinoma cells in vitro and in vivo[J]. Xiaojun Tang,Yan Zhou,Wenjie Li,Qi Tang,Renjie Chen,Jin Zhu,Zhenqing Feng. The Journal of Biomedical Research. 2014(06)
本文編號(hào):3543560
【文章來源】:南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
LMP1CAR慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建
1 CAR 慢病毒表達(dá)載體在 X-293T 細(xì)胞中的表達(dá)。泳道;泳道 2:CD19 CAR 轉(zhuǎn)染的 X-293T 細(xì)胞;泳道 3:LT 細(xì)胞。e expression of LMP1 CAR lentiviral expression vector in cted X-293T cells; 2: X-293T cells transfected by CD19 CActed by LMP1 CAR.
圖 1:T 細(xì)胞與 LMP1 CAR-T 細(xì)胞表面抗原的檢測(cè)胞術(shù)檢測(cè)鼻咽癌細(xì)胞表面抗原 LMP1 的表達(dá)數(shù)期生長的鼻咽癌細(xì)胞 CNE1、CNE2、HONE1、C666-1 人 LMP1 抗體,二抗選擇 FITC 標(biāo)記鼠源抗羊的熒光抗體照,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)鼻咽癌細(xì)胞表面抗原 LMP1 的表達(dá)檢測(cè)鼻咽癌的結(jié)果如圖紅色曲線,同型對(duì)照抗體檢測(cè)結(jié)果果表明,鼻咽癌細(xì)胞 CNE1 中 LMP1 的表達(dá)與同型對(duì)照LMP1 高表達(dá);鼻咽癌細(xì)胞 CNE2 與 C666-1 中 LMP1 的表分,為 LMP1 低表達(dá);而鼻咽癌細(xì)胞 HONE1 與 SUNE1 對(duì)照抗體并不能區(qū)分,為 LMP1 低表達(dá)甚至不表達(dá)(圖 2)擇 LMP1 高表達(dá)的鼻咽癌細(xì)胞株 CNE1,LMP1 低表達(dá)的及 LMP1 不表達(dá)的鼻咽癌細(xì)胞株 HONE1 用于后續(xù)的研究
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]宮頸癌細(xì)胞高遷移率族警報(bào)素的分泌與腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞的相關(guān)性[J]. 李晶,魏楓,楊帆,鄭禹,趙華,任秀寶. 中國腫瘤生物治療雜志. 2017(03)
[2]T cells expressing a LMP1-specific chimeric antigen receptor mediate antitumor effects against LMP1-positive nasopharyngeal carcinoma cells in vitro and in vivo[J]. Xiaojun Tang,Yan Zhou,Wenjie Li,Qi Tang,Renjie Chen,Jin Zhu,Zhenqing Feng. The Journal of Biomedical Research. 2014(06)
本文編號(hào):3543560
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