目的:青光眼作為全球不可逆性致盲的首要原因,是一組以視神經(jīng)結(jié)構(gòu)性損傷及視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞進(jìn)行性凋亡為特征的退行性視網(wǎng)膜疾病。近年來有研究顯示細(xì)胞因子在青光眼發(fā)病過程中具有不可忽視的作用。在青光眼患者房水和外周血中檢測發(fā)現(xiàn)CXCL8等細(xì)胞因子的異常表達(dá),同時細(xì)胞體外培養(yǎng)實驗曾報道CXCL8對神經(jīng)元細(xì)胞表現(xiàn)為毒性作用,提示CXCL8可能參與了視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡及視神經(jīng)損傷過程。白細(xì)胞介素8又稱CXCL8,屬CXC趨化因子亞家族,通過結(jié)合其受體CXCR1/2,廣泛參與炎癥,血管生成,腫瘤細(xì)胞增殖及遷移的調(diào)節(jié)。CXCR1/2拮抗劑G31P可與CXCR1/2高親和力結(jié)合,阻斷CXCL8發(fā)揮作用,在抗炎抗腫瘤等研究中應(yīng)用廣泛。本次實驗?zāi)康臑樘骄緾XCL8對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡的損傷及其受體拮抗劑G31P能否減緩其影響。方法:1.細(xì)胞的培養(yǎng):體外培養(yǎng)小鼠RGC-5細(xì)胞,常規(guī)培養(yǎng)于含10%FBS、100 U·m L^-1青、鏈霉素的DMEM-F12培養(yǎng)基中。靜置于37℃、5%CO₂的細(xì)胞培養(yǎng)箱中,24h后換液。2.細(xì)胞分組:將處于對數(shù)生長期的RGC-5分成以... 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

RGC-5細(xì)胞CXCR1和CXCR2表達(dá)情況.(A):正常對照組及CXCL8處理24h后RGC-5細(xì)胞內(nèi)CXCR1/2mRNA表達(dá)水平.瓊脂糖電泳結(jié)果顯示RT.(B-C):PCR電泳統(tǒng)計學(xué)軟件分析

圖 2 CCK-8 試驗檢測對照組和不同濃度 CXCL8 處理3 G31P 拮抗 CXCL8 誘導(dǎo)的 RGC-5 細(xì)胞凋亡應(yīng)用Hoechst 33258 染色法觀察了 CXCL核的影響，以驗證 CXCL8 對 RGC-5 細(xì)胞活性以及 G31P 處理是否可改變其作用。在 CXCL現(xiàn)為濃染片段化的藍(lán)色熒光，有細(xì)胞凋亡的特胞染色質(zhì)濃縮，凋亡現(xiàn)象減輕，正常對照組視通過流式細(xì)胞術(shù)對各組細(xì)胞凋亡率進(jìn)行測胞凋亡的影響。由圖 4 可以看出，相對于未處各期細(xì)胞總數(shù)由 2.8%±0.20%上升至 5.62%±0但在 G31P 預(yù)處理組，細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯減輕p<0.01)。以上結(jié)果顯示，給予 CXCL8 刺激可誘

3 G31P 拮抗 CXCL8 誘導(dǎo)的 RGC-5 細(xì)胞凋亡應(yīng)用Hoechst 33258 染色法觀察了 CXCL8及CXCL8 和G31P核的影響，以驗證 CXCL8 對 RGC-5 細(xì)胞活性的抑制作用是否與以及 G31P 處理是否可改變其作用。在 CXCL8 單獨處理組可見染現(xiàn)為濃染片段化的藍(lán)色熒光，有細(xì)胞凋亡的特征，而在 G31P 處胞染色質(zhì)濃縮，凋亡現(xiàn)象減輕，正常對照組視野下幾乎沒有凋亡通過流式細(xì)胞術(shù)對各組細(xì)胞凋亡率進(jìn)行測定，評估 G31P 對 胞凋亡的影響。由圖 4 可以看出，相對于未處理細(xì)胞，CXCL8 各期細(xì)胞總數(shù)由 2.8%±0.20%上升至 5.62%±0.50%，差異具有統(tǒng)計但在 G31P 預(yù)處理組，細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯減輕，基本同正常對照p<0.01)。以上結(jié)果顯示，給予 CXCL8 刺激可誘導(dǎo) RGC-5 細(xì)胞發(fā)生受體拮抗劑 G31P 可減輕這種凋亡作用，從而起到保護(hù)作用。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]白細(xì)胞介素-4和白細(xì)胞介素-12對純化培養(yǎng)小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存活的影響[J]. 魏煒,黃萍,張紹丹,黃琛,張紹敏,張純,王薇.  中國實驗動物學(xué)報. 2011(04)
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[3]開角型青光眼患者外周血細(xì)胞因子與視神經(jīng)損傷關(guān)系的研究[J]. 黃萍,齊越,徐永勝,張純.  眼科研究. 2007(06)



本文編號：3398869