發(fā)布時(shí)間：2017-04-27 12:03

  本文關(guān)鍵詞：沙眼衣原體質(zhì)粒致病機(jī)制分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：、第一部分沙眼衣原體質(zhì)粒編碼蛋白的表達(dá)和相互作用的分析目的分析沙眼衣原體質(zhì)粒編碼蛋白的相互作用。方法采用基因克隆的方法將沙眼衣原體質(zhì)�；騊gp1-4及Pgp8分別克隆到pRAC和pRBR上,通過轉(zhuǎn)錄激活細(xì)菌雙雜交系統(tǒng)分析蛋白相互作用。結(jié)果Western blot結(jié)果顯示Pgp1、Pgp3與大腸桿菌RpoA氨基末端功能區(qū)(α-NTD)融合蛋白及Pgp1、Pgp3、Pgp4與DNA結(jié)合蛋白λCI融合蛋白,能在大腸桿菌中表達(dá)。在報(bào)告菌株中,共表達(dá)與α-NTD融合的Pgp3蛋白(α-Pgp3)及與 CI融合的Pgp3蛋白(CI-Pgp3),導(dǎo)致報(bào)告基因產(chǎn)物p-半乳糖苷酶的活性升高。而余無明顯變化。結(jié)論P(yáng)gp3編碼的Pgp3能與自身相互作用。第二部分沙眼衣原體質(zhì)粒編碼蛋白Pgp3和Pgp4致病作用分析目的探究沙眼衣原體質(zhì)粒編碼蛋白Pgp3及Pgp4的致病作用。方法用轉(zhuǎn)化菌株L2GFP△Pgp3、L2GFP△Pgp4、L2GFP和野生菌株L2及不含質(zhì)粒菌株L2建立HeLa 229細(xì)胞感染模型,分別對(duì)各菌株進(jìn)行經(jīng)菌落PCR驗(yàn)證,Titration測(cè)定IFUs繪制生長曲線,激光共聚焦觀察不同感染時(shí)間點(diǎn)包涵體形態(tài),Western Blotting檢測(cè)主要外膜蛋白(MOMP)表達(dá)量,糖原定量試劑盒測(cè)定HeLa細(xì)胞糖原含量,SEAP Quanti-Blue檢測(cè)TLR2和NF-kB信號(hào)通路的激活情況。結(jié)果菌落PCR驗(yàn)證各菌株均正確；衣原體表型分析結(jié)果顯示：質(zhì)粒及其編碼蛋白Pgp4不影響衣原體繁殖(P0.05),但缺失突變后可使包涵體內(nèi)容物在感染早期提前釋放,感染后期內(nèi)容物減少從而影響包涵體形態(tài)；Western blotting、糖原定量、SEAP Quanti-Blue結(jié)果顯示：與野生菌株相比,L2GFP△Pgp4 MOMP的表達(dá)量較高(P0.001),糖原累積能力及激活TLR2及NF-kB信號(hào)通路能力較弱(P0.001)。與Pgp4相比,Pgp3對(duì)包涵體表型、MOMP表達(dá)、糖原累積、誘發(fā)宿主免疫的影響均較小(P0.05)。結(jié)論質(zhì)粒及Pgp3和Pgp4與沙眼衣原體胞內(nèi)寄生相關(guān)；誘發(fā)的宿主免疫反應(yīng)與致病性相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：沙眼衣原體 質(zhì)粒 Pgp3 蛋白相互作用 沙眼衣原體 質(zhì)粒 Pgp3 Pgp4 致病性
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R777.32
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對(duì)照5-8
• 中文摘要8-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-17
• 參考文獻(xiàn)16-17
• 第一部分 沙眼衣原體質(zhì)粒編碼蛋白的表達(dá)和相互作用的分析17-32
• 前言17-18
• 1 實(shí)驗(yàn)材料18-20
• 2 實(shí)驗(yàn)方法20-26
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-28
• 4 討論28-29
• 5 小結(jié)29-30
• 參考文獻(xiàn)30-32
• 第二部分 沙眼衣原體質(zhì)粒編碼蛋白Pgp3與Pgp4致病作用分析32-50
• 前言32-33
• 1 實(shí)驗(yàn)材料33-34
• 2 實(shí)驗(yàn)方法34-36
• 3 結(jié)果36-44
• 4 討論44-46
• 5 小結(jié)46-47
• 參考文獻(xiàn)47-50
• 文獻(xiàn)綜述50-59
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 致謝59-60
• 攻讀碩士研究生學(xué)位期間發(fā)表文章及科研情況60

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  本文關(guān)鍵詞：沙眼衣原體質(zhì)粒致病機(jī)制分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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