目的:探討黑豆提取物花青素對(duì)大鼠晶狀體上皮細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響。方法:1.利用H202誘導(dǎo)制備大鼠白內(nèi)障模型,獲取氧化后大鼠晶狀體上皮細(xì)胞。2.采用微波輔助法提取黑豆花青素,并選用D101大孔吸附樹脂進(jìn)行純化。3.選取已篩選出的大鼠晶狀體上皮細(xì)胞,同時(shí)設(shè)對(duì)照組,加入10 ug/ml、20 ug/ml、30ug/ml、50ug/ml、80ug/ml、100ug/ml、150ug/ml濃度的黑豆花青素提取物,采用MTT法觀察大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的增殖;采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的凋亡;采用劃痕法檢測(cè)大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的遷移。結(jié)果:1.在正常的組織培養(yǎng)條件下,大鼠晶狀體上皮細(xì)胞可以迅速地增殖、生長(zhǎng)。2.加入 10ug/ml、20ug/ml、30ug/ml、50ug/ml、80ug/ml、100ug/ml、150ug/ml 濃度的花青素提取物后大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的增殖出現(xiàn)不同程度的抑制效果,抑制作用與濃度呈正相關(guān)性,且隨著時(shí)間的增加,抑制效果越明顯�；ㄇ嗨靥崛∫禾幚砑�(xì)胞48h后的IC50為98.43 ug/ml,數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。3.隨著花青素作用時(shí)間的... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１大鼠模型??

ＭＴＴ?法觀察細(xì)胞增殖，加入?１０ｕｇ／ｍｌ、２０ｕｇ／ｍｌ、３０ｕｇ／ｍｌ、５０ｕｇ／ｍｌ、８０ｕｇ／ｍｌ、１００??ｕｇ／ｍｌ、１５０?ｉｉｇ／ｍｌ濃度的花青素提取物后大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的增殖出現(xiàn)不同程度的抑制??效果，抑制作用與濃度呈正相關(guān)性，且隨著時(shí)間的增加，抑制效果越明顯。見圖２。??ｒ：：ｆ＾??Ｊ??〇Ｊ＿，＿，＿，?，?１?１?１??１０?２０?３０?５０?８０?１００?１５０??花青素濃度（Ｍｇ／ｍｌ）??圖２不同濃度的花冉素作用于人鼠ＬＥＣｓ的細(xì)胞存活率??結(jié)果顯示：黑豆花青素提取液處理細(xì)胞４８ｈ后的ＩＣ５Ｇ為９８．４３?Ｕｇ／ｍｌ，數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)??計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜?０．０５）。因此，在下面劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移中選用濃度為１００?ｕｇ／ｍ丨的花??青素溶液。??１１??

不同濃度藥物對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)皿進(jìn)行劃痕后，ＬＥＣｓ遷移能力有所不同。與１０?ｕｇ／ｍｌ花青??素組相比較，２０?ｕｇ／ｍｌ，３０?ｕｇ／ｍｌ，５０?ｕｇ／ｍｌ，８０?ｕｇ／ｍｌ，１００?ｕｇ／ｍｌ?及?１５０?ｕｇ／ｍｌ?花青素??處理組４８ｈ后劃痕距離較大，見圖３。??６００????劃?５００?．?Ｖ＊?＊??痕?？??距?／??忐?４００?．?／??＾?３００?－??＾?？??２００?－?產(chǎn)，??／??１００?－?／??／??１０?２０?３０?５０?８０?１００?１５０??花青素濃度（ｕｇ／ｍｌ）??圖３?ｆ同濃度的花占＇素作用４８ｈ晶狀體上皮細(xì)胞的劃痕距離??各組細(xì)胞培養(yǎng)皿劃痕４８ｈ后，２５ｕｇ／ｍｌ，?５０ｕｇ／ｍｌ，１００ｕｇ／ｍ丨花青素組的劃痕面積移??行愈合率均明顯低于對(duì)照組，且隨著花青素組質(zhì)量濃度升高，劃痕面積移行愈合率均明顯??低于其相鄰的低質(zhì)量濃度組，５０?ｕｇ／ｍｌ，?１００?ｕｇ／ｍ丨時(shí)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜?０．０５），見??圖４。??１３??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大孔樹脂純化胭脂蘿卜花青素及抗氧化活性研究[J]. 梁姍,蔣子川,劉歡.  中國(guó)食品添加劑. 2017(12)
[2]藥用黑豆的研究進(jìn)展[J]. 劉秀玉,王利麗,左瑞庭,陳隨清.  亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥. 2017(20)
[3]黑豆多肽的研究現(xiàn)狀[J]. 高洋,于棟.  現(xiàn)代食品. 2017(16)
[4]花青素抗炎機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 楊霞,王利,李少偉,韓璐,郭曉明,陳琦.  山東醫(yī)藥. 2017(18)
[5]黑豆蛋白的分級(jí)提取及黑豆花色苷的成分鑒定[J]. 江甜,何毅,祝振洲,李書藝,何靜仁.  食品科學(xué). 2017(04)
[6]黑豆皮花青素的不同提取方法及其體外抗菌活性比較研究[J]. 褚盼盼,靳澤榮,喬元彪.  大豆科學(xué). 2015(04)
[7]Effect of Apigenin on Gap Junctional Intercellular Communication in Human Tenon’s Capsule Fibroblasts[J]. Shanshan Liu,Jibing Wang,Huihui Zou,Xudong Huang.  Eye Science. 2013(02)
[8]紫甘薯花青素對(duì)小鼠急性乙醇性肝損傷的預(yù)防保護(hù)作用[J]. 閆倩倩,周玉珍,張雨青.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(05)
[9]黑豆皮原花青素提取工藝的優(yōu)化[J]. 徐亞維,趙楊,魏馨,趙剛,饒嬈.  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(12)
[10]ERK1/2信號(hào)傳導(dǎo)通路介導(dǎo)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)人晶狀體上皮細(xì)胞中環(huán)氧合酶2的表達(dá)[J]. 張雪巖,劉遠(yuǎn)光,賈琳琳,張雪松,張滌,楊笑天,徐志剛.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(02)



本文編號(hào)：3300464