目的:通過糖尿病大鼠和體外模擬人角膜緣干細胞高糖環(huán)境,探討高糖引起的角膜緣干細胞的遷移能力和細胞表型轉(zhuǎn)變,并探究P物質(zhì)促進糖尿病角膜病變創(chuàng)傷后修復的分子機制。研究方法:1.動物實驗:取30只SPF大鼠進行糖尿病造模,15只為糖尿病組,15只為P物質(zhì)組。另取15只SPF大鼠為對照組,刮除三組大鼠角膜上皮觀察上皮創(chuàng)傷愈合情況,并進行HE染色和波形蛋白（Vimentin）、β連環(huán)蛋白（β-catenin）及P63蛋白的免疫組化染色。2細胞及分子實驗:取人角膜緣干細胞進行高糖培養(yǎng)24小時后,加入P物質(zhì),48小時后劃痕實驗和transwell分析檢測對照組、高糖組和P物質(zhì)組角膜緣干細胞的增殖及遷移功能,western-blot及細胞免疫熒光法檢測角膜緣干細胞波形蛋白（Vimentin）、β連環(huán)蛋白（β-catenin）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP9）、吻蛋白（FAK）及胰島素樣生長因子1（IGF-1）的表達及胞內(nèi)定位。免疫共沉淀法檢測IGFBP—IGF-1復合體的濃度探討P物質(zhì)促進IGF-1信號通路的作用機制。實驗結(jié)果:1.糖尿病大鼠在刮除角膜上皮后,愈合速度較正常對照組明顯延遲,在24h時原已修復... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．角膜上皮愈合面積百分比圖??正常組大鼠刮除上皮后，上皮修復迅速，在４８ｈ即完成上皮修復

而糖尿病大鼠的角膜上皮明顯變薄，表層上皮缺失或僅殘留１層，翼狀上??｜?皮細胞形態(tài)各異、細胞連接疏松、排列紊亂，基底細胞層細胞失去其原有高柱??狀細胞形態(tài)，細胞變小，呈多邊形或短柱狀，排列紊亂。（圖３）??２３??

角膜基底細胞層可見Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和卩－ｃａｔｅｎｉｎ蛋白高表達，而表層上皮和翼狀上皮??層表達量極低。而糖尿病大鼠的角膜基底細胞的Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表達??明顯降低，其表達量與表層上皮和翼狀上皮層類似。（圖４）??２４??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]2型糖尿病患者角膜知覺改變及其影響因素[J]. 季迅達,朱皓皓,許速.  中國實用眼科雜志. 2007 (12)
[2]共焦顯微鏡觀察糖尿病性視網(wǎng)膜病變患者角膜細胞的變化[J]. 馬山,孫先勇,張杰,劉秀花,吳國慶.  中國實用眼科雜志. 2013 (05)



本文編號：3289755