背景:作為眼外傷的一種嚴重的并發(fā)癥,增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變（PVR）是視網(wǎng)膜復位術后失明的主要原因,其主要特征是眼外傷后視網(wǎng)膜色素上皮細胞過度的增殖,遷移和收縮。PVR的形成機制很復雜,目前對其理解仍然不夠透徹。在PVR中,蛋白表達譜發(fā)生了明顯變化,蛋白質組學作為一種鑒定和定量技術可為包括PVR在內的多種疾病的早期診斷和臨床治療提供分子標志和作用靶點,基于此我們可將差異表達的蛋白進行深入研究。目的:首先,對外傷性PVR患者的視網(wǎng)膜和正常人眼的視網(wǎng)膜進行蛋白質組學分析,以找出兩種狀態(tài)下視網(wǎng)膜組織中存在的差異表達蛋白,力求為外傷性PVR的發(fā)病機制提供新的依據(jù),并為PVR的預防和治療尋找新的突破口。接著,在人視網(wǎng)膜色素上皮細胞（Human retinal pigment epithelial,RPE）系ARPE-19細胞中敲降人視網(wǎng)膜特異性ATP結合盒轉運體（ABCA4）的表達,研究其對RPE細胞活力、增殖、凋亡和遷移能力的影響,為外傷性PVR的防治提供新思路。方法:在蛋白質組學分析中,（1）獲取實驗組和對照組視網(wǎng)膜標本,并用BCA法對其蛋白濃度定量;（2）運用SDS-PAGE和考馬斯亮藍染... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２．２外傷性ＰＶＲ組和對照組樣品ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳圖??

?第二章蛋白質組學篩選外傷性ＰＶＲ中的差異蛋白與驗證???括：受體調節(jié)器活動（ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），酶調節(jié)活性（ｅｎｚｙｍｅ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ），抗氧化活性（ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ），催化活性（ｃａｔａｌｙｔｉｃ），分子傳感器??活性（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），載體活性（ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），結構分子活??性（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ?ｍｏｌｅｃｕｌｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），受體活性（ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），蛋白質結舍轉錄因??子活性（ｐｒｏｔｅｉｎ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），核酸結合轉錄因子活性??（ｎｕｃｌｅｉｃ?ａｃｉｄ?ｂｉｄｉｎｇ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），電子載體活性（ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｃａｒｒｉｅｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ?），化學引誘物活性（ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?），金屬伴侶活性??（ｍｅｔａｌｌｏｃｈａｐｅｒｏｎｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），綁定（ｂｉｎｄｉｎｇ），通路調節(jié)活性（ｃｈａｎｎｅｌ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ?）；注釋的蛋白質共富集９個細胞組分，包括：高分子配合物??（ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｃｏｍｐｌｅｘ），膜包圍腔（ｍｅｍｂｒａｎｅ－ｅｎｃｌｏｓｅｄ?ｌｕｍｅｎ），細胞器??（ｏｒｇａｎｅｌｌｅ），細胞連接（ｃｅｌｌ?ｊｕｎｃｔｉｏｎ），細胞（ｃｅｌｌ?），突觸（ｓｙｎａｐｓｅ?），膜（ｍｅｍｂｒａｎｅ），??胞外區(qū)（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａ

??利用Ｇｅｎｅ?Ｃｌｕｓｔｅｒ?３．０軟件對２４１個差異蛋白進行層次聚類分析，其具體結??果見圖２．６。在橫向的層次聚類樹中，對照組和實驗組中３次生物學重復分別分??類于同一分支下，說明３次實驗具有良好的重復性。在縱向層次聚類樹中，主??要表現(xiàn)為兩個分支。上分支包含１５３個差異蛋白，以上蛋白質在外傷性ＰＶＲ患??者中的表達量明顯低于對照組，它們包括：Ｑ５６２Ｒ１?（ＨＵＭＡＮ?Ｂｅｔａ－ａｃｔｉｎ－ｌｉｋｅ??ｐｒｏｔｅｉｎ

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3135040