小鼠真菌性角膜炎的拉曼光譜分析及真菌毒素檢測(cè)
發(fā)布時(shí)間:2021-03-24 11:31
目的:建立小鼠茄病鐮刀菌性角膜炎模型后,觀察在真菌性角膜炎(fungalkeratitis, FK)病變發(fā)展中角膜組織中生化物質(zhì)及真菌毒素的表達(dá)情況,以進(jìn)一步探討FK的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制。方法:按照隨機(jī)數(shù)表法將BALB/C小鼠分成2組:一組為真菌感染組(即實(shí)驗(yàn)組):另一組為損傷對(duì)照組(即對(duì)照組)。兩組均采用“改良角膜表面鏡片法”造模。在真菌感染后第1、3、5、7、12天采用半定量方法分別對(duì)角膜的臨床表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)分,并對(duì)角膜刮片物行病原學(xué)檢查。同時(shí)在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)取下小鼠實(shí)驗(yàn)眼角膜,用拉曼光譜分析離體角膜在相應(yīng)病程中生化物質(zhì)組成的變化情況。采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)鐮刀菌酸(FA)、伏馬菌素B1(FB1)、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)4種真菌毒素在不同病程中的感染角膜組織中的表達(dá)。結(jié)果:1.實(shí)驗(yàn)組小鼠角膜均成功感染接種的真菌,具有典型的FK臨床表現(xiàn)。在真菌感染早期,角膜表現(xiàn)為彌漫性炎癥反應(yīng),隨后浸潤(rùn)混濁加重,第3天角膜呈灰白色混濁,第5天時(shí)角膜潰瘍?cè)顢U(kuò)大,表面干燥、略隆起,新生血管從周邊角膜開始長(zhǎng)入,第7天時(shí)病變好轉(zhuǎn),潰瘍?cè)蠲娣e縮小,第12天時(shí)病變穩(wěn)定,角膜病灶瘢痕化,...
【文章來(lái)源】:福建醫(yī)科大學(xué)福建省
【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
茄病鐮刀菌菌落
13圖1 茄病鐮刀菌菌落圖2 茄病鐮刀菌鏡下圖(×400 倍)4.2 角膜刮片物鏡檢與培養(yǎng)結(jié)果分別將造模后第1、3、5、7、12天獲取的2組小鼠角膜刮片物行10%KOH濕片檢查,結(jié)果為:實(shí)驗(yàn)組第1、3天均可見茄病鐮刀菌菌絲,而第5、7、12天檢查均未見菌絲;對(duì)照組于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)檢查均未見菌絲。病原菌培養(yǎng)結(jié)果,實(shí)驗(yàn)組:在感染后第1、3天均有真菌生長(zhǎng),同時(shí)經(jīng)鑒定為所接種的茄病鐮刀菌,第5、7、12天培養(yǎng)無(wú)真菌生長(zhǎng);對(duì)照組于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)均未見真菌生長(zhǎng)。刮片物革蘭染色及
14細(xì)菌培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組所有時(shí)間點(diǎn)均未見細(xì)菌。圖3 角膜刮片真菌培養(yǎng)4.3 小鼠茄病鐮刀菌性角膜炎臨床表現(xiàn)造模后第1天(圖4.1a),裂隙燈下可見感染組小鼠實(shí)驗(yàn)眼結(jié)膜混合性充血,結(jié)膜囊內(nèi)可見大量分泌物,角膜表面略粗糙,基質(zhì)浸潤(rùn),前房存。對(duì)照組角膜表現(xiàn)為彌漫性水腫。接種后第2天,結(jié)膜混合充血加重,角膜浸潤(rùn)范圍較前增大,密度增高,角膜灰白色混濁欠均勻,潰瘍?cè)钊圆幻黠@。造模后第3天(圖4.1b),浸潤(rùn)擴(kuò)展至全角膜,質(zhì)地致密,角膜呈均勻的灰白色混濁,少數(shù)可見免疫環(huán)和衛(wèi)星灶。造模后第4天,病變加重,潰瘍形成,角膜中央可見壞死組織。造模后第5天(圖4.1c)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的毒性研究進(jìn)展[J]. 霍星華,趙寶玉,萬(wàn)學(xué)攀,郭璽,王建軍. 毒理學(xué)雜志. 2008(02)
[2]伏馬菌素B1對(duì)人外周血單個(gè)核細(xì)胞表面HLA-Ⅰ分子表達(dá)的影響[J]. 邢凌霄,申海濤,李月紅,王俊靈,嚴(yán)霞,王鳳榮,張祥宏. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2007(09)
[3]真菌孢子黏附和基質(zhì)金屬蛋白酶在角膜真菌感染中的作用[J]. 曾慶延,董曉光,史偉云,謝立信. 中華眼科雜志. 2004(11)
[4]鐮刀菌和曲霉菌性角膜潰瘍的組織病理學(xué)特點(diǎn)[J]. 白海青,金梅玲,趙桂秋,孫為榮. 中華眼科雜志. 2004(05)
[5]Etiological analysis on ocular fungal infection in the period of 1989-2000[J]. 孫旭光,張巖,李然,王智群,羅時(shí)運(yùn),金秀英,張文華. Chinese Medical Journal. 2004(04)
[6]常見鐮刀菌素與細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J]. 王會(huì)艷,張祥宏. 衛(wèi)生研究. 2000(03)
[7]108例真菌性角膜炎的臨床和組織病理學(xué)研究[J]. 謝立信,史偉云,董曉光,王治宇,劉敬,王晶. 眼科研究. 1999(04)
本文編號(hào):3097645
【文章來(lái)源】:福建醫(yī)科大學(xué)福建省
【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
茄病鐮刀菌菌落
13圖1 茄病鐮刀菌菌落圖2 茄病鐮刀菌鏡下圖(×400 倍)4.2 角膜刮片物鏡檢與培養(yǎng)結(jié)果分別將造模后第1、3、5、7、12天獲取的2組小鼠角膜刮片物行10%KOH濕片檢查,結(jié)果為:實(shí)驗(yàn)組第1、3天均可見茄病鐮刀菌菌絲,而第5、7、12天檢查均未見菌絲;對(duì)照組于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)檢查均未見菌絲。病原菌培養(yǎng)結(jié)果,實(shí)驗(yàn)組:在感染后第1、3天均有真菌生長(zhǎng),同時(shí)經(jīng)鑒定為所接種的茄病鐮刀菌,第5、7、12天培養(yǎng)無(wú)真菌生長(zhǎng);對(duì)照組于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)均未見真菌生長(zhǎng)。刮片物革蘭染色及
14細(xì)菌培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組所有時(shí)間點(diǎn)均未見細(xì)菌。圖3 角膜刮片真菌培養(yǎng)4.3 小鼠茄病鐮刀菌性角膜炎臨床表現(xiàn)造模后第1天(圖4.1a),裂隙燈下可見感染組小鼠實(shí)驗(yàn)眼結(jié)膜混合性充血,結(jié)膜囊內(nèi)可見大量分泌物,角膜表面略粗糙,基質(zhì)浸潤(rùn),前房存。對(duì)照組角膜表現(xiàn)為彌漫性水腫。接種后第2天,結(jié)膜混合充血加重,角膜浸潤(rùn)范圍較前增大,密度增高,角膜灰白色混濁欠均勻,潰瘍?cè)钊圆幻黠@。造模后第3天(圖4.1b),浸潤(rùn)擴(kuò)展至全角膜,質(zhì)地致密,角膜呈均勻的灰白色混濁,少數(shù)可見免疫環(huán)和衛(wèi)星灶。造模后第4天,病變加重,潰瘍形成,角膜中央可見壞死組織。造模后第5天(圖4.1c)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的毒性研究進(jìn)展[J]. 霍星華,趙寶玉,萬(wàn)學(xué)攀,郭璽,王建軍. 毒理學(xué)雜志. 2008(02)
[2]伏馬菌素B1對(duì)人外周血單個(gè)核細(xì)胞表面HLA-Ⅰ分子表達(dá)的影響[J]. 邢凌霄,申海濤,李月紅,王俊靈,嚴(yán)霞,王鳳榮,張祥宏. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2007(09)
[3]真菌孢子黏附和基質(zhì)金屬蛋白酶在角膜真菌感染中的作用[J]. 曾慶延,董曉光,史偉云,謝立信. 中華眼科雜志. 2004(11)
[4]鐮刀菌和曲霉菌性角膜潰瘍的組織病理學(xué)特點(diǎn)[J]. 白海青,金梅玲,趙桂秋,孫為榮. 中華眼科雜志. 2004(05)
[5]Etiological analysis on ocular fungal infection in the period of 1989-2000[J]. 孫旭光,張巖,李然,王智群,羅時(shí)運(yùn),金秀英,張文華. Chinese Medical Journal. 2004(04)
[6]常見鐮刀菌素與細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J]. 王會(huì)艷,張祥宏. 衛(wèi)生研究. 2000(03)
[7]108例真菌性角膜炎的臨床和組織病理學(xué)研究[J]. 謝立信,史偉云,董曉光,王治宇,劉敬,王晶. 眼科研究. 1999(04)
本文編號(hào):3097645
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