Wnt信號通路在小鼠內(nèi)耳中的表達(dá)及對具有干/祖細(xì)胞樣細(xì)胞特性的Wnt反應(yīng)細(xì)胞的調(diào)控
發(fā)布時間:2021-01-17 05:17
第一部分小鼠內(nèi)耳Wnt信號的基因表達(dá)研究目的:Wnt信號通道可調(diào)控干細(xì)胞的自我更新和分化。目前研究表明,Wnt信號通路可調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng),胃腸道系統(tǒng),心臟系統(tǒng),骨骼系統(tǒng),乳腺干細(xì)胞,皮膚干細(xì)胞,造血干細(xì)胞,胚胎干細(xì)胞以及其他系統(tǒng)器官干細(xì)胞功能。為了解經(jīng)典Wnt信號通道在調(diào)控內(nèi)耳毛細(xì)胞再生中所起的作用,本章先檢測Wnt信號通道下游靶基因Axin2在小鼠內(nèi)耳的表達(dá),為進(jìn)一步研究提供基礎(chǔ)。方法:通過利用野生型和作為經(jīng)典Wnt信號通道激活表現(xiàn)模型的雜合子Axin2-LacZ轉(zhuǎn)基因小鼠,1.以新生和成年小鼠作為研究對象,無菌條件下取出聽泡,X-gal染色后行冰凍切片,以觀察Axin2基因在內(nèi)耳中表達(dá)的部位及表達(dá)部位的細(xì)胞種類,或者直接做冰凍切片,用各種不同細(xì)胞標(biāo)志物(毛細(xì)胞,支持細(xì)胞,上皮細(xì)胞,間質(zhì)細(xì)胞,增殖細(xì)胞)行免疫組化染色以鑒定細(xì)胞表型。2.分別在野生型小鼠出生1天(P1)、P7、P21、P28體內(nèi)注射Edu (50mg/kg),2天后取出聽泡冰凍切片或者整個橢圓囊觀察Edu陽性細(xì)胞位置和數(shù)目以了解耳蝸內(nèi)具自我增殖潛力的細(xì)胞種類和不同年齡的增殖能力。3.分別取出耳蝸和橢圓囊,以X-gal染...
【文章來源】:中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:110 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 小鼠內(nèi)耳Wnt信號的基因表達(dá)研究
1.1 材料與方法
1.2 實驗結(jié)果
1.3 討論
1.4 結(jié)論
第二部分 新生小鼠耳蝸Axin2表達(dá)細(xì)胞自我增殖和分化功能及Wnt信號通道對其調(diào)控的研究
2.1 材料與方法
2.2 實驗結(jié)果
2.3 討論
2.4 結(jié)論
第三部分 小鼠橢圓囊Axin2表達(dá)細(xì)胞增殖分化功能及Wnt信號通道對其調(diào)控的研究
3.1 材料與方法
3.2 實驗結(jié)果
3.3 討論
3.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
小結(jié)
綜述
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表文章和參與研究
致謝
本文編號:2982277
【文章來源】:中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:110 頁
【學(xué)位級別】:博士
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ABSTRACT
前言
第一部分 小鼠內(nèi)耳Wnt信號的基因表達(dá)研究
1.1 材料與方法
1.2 實驗結(jié)果
1.3 討論
1.4 結(jié)論
第二部分 新生小鼠耳蝸Axin2表達(dá)細(xì)胞自我增殖和分化功能及Wnt信號通道對其調(diào)控的研究
2.1 材料與方法
2.2 實驗結(jié)果
2.3 討論
2.4 結(jié)論
第三部分 小鼠橢圓囊Axin2表達(dá)細(xì)胞增殖分化功能及Wnt信號通道對其調(diào)控的研究
3.1 材料與方法
3.2 實驗結(jié)果
3.3 討論
3.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
小結(jié)
綜述
參考文獻(xiàn)
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