【摘要】：目的:膜迷路積水是梅尼埃病的病理基礎,能由醛固酮誘導產(chǎn)生,但其機制尚不清楚。本實驗通過研究組蛋白H3K79甲基化轉(zhuǎn)移酶Dot1l在豚鼠耳蝸中的表達模式及醛固酮對Dot1l在豚鼠耳蝸中表達的調(diào)控,探討Dot1l在膜迷路積水中的作用及機理,以期為梅尼埃病發(fā)病機制和治療的研究提供新的線索。方法:將6只經(jīng)ABR檢測聽力正常的豚鼠耳蝸切片,以免疫組織化學(IHC)檢測Dot1l在豚鼠耳蝸中的表達模式。將28只經(jīng)ABR檢測聽力正常的豚鼠隨機分為對照組與實驗組。實驗組豚鼠腹腔注射醛固酮(1mg.kg-1.d-1),對照組腹腔注射生理鹽水20ul,各7天。1月后再次以ABR檢測兩組豚鼠聽閾后處死,應用HE染色檢測豚鼠耳蝸形態(tài)學,以免疫組織化學(IHC)、Western blot檢測Dot1l表達。結果:Dot1l表達于正常豚鼠耳蝸的血管紋、螺旋韌帶、前庭膜、螺旋神經(jīng)節(jié)、Corti器、螺旋緣、外螺旋溝根細胞,在螺旋韌帶的表達由底轉(zhuǎn)向頂轉(zhuǎn)減少(P0.01),在螺旋神經(jīng)節(jié)中的表達由底轉(zhuǎn)向頂轉(zhuǎn)逐漸增多(P0.05)。醛固酮作用后實驗組聽閾(18.57±6.02dBSPL)與對照組(20.71±4.74dBSPL)差異不具有顯著性(P0.05)。實驗組豚鼠耳蝸膜迷路積水率達到75%,對照組未觀察到內(nèi)淋巴積水。Western blot顯示實驗組耳蝸Dot1l表達明顯低于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。IHC顯示醛固酮降低Dot11在血管紋、前庭膜、螺旋緣、柯蒂器、螺旋韌帶等部位的表達。結論:豚鼠耳蝸中存在組蛋白H3K79甲基化轉(zhuǎn)移酶Dot11。醛固酮可能通過抑制其表達引起膜迷路積水。
【圖文】：

按前庭膜向前庭階膨隆程度可將膜迷路積水分為輕、中、重度。正常豚鼠切逡逑片發(fā)現(xiàn)前庭膜未向前庭階膨隆，蝸管面積由頂轉(zhuǎn)到底轉(zhuǎn)逐漸變小（圖１）。造模完逡逑成后，對照組豚鼠耳蝸底轉(zhuǎn)未見積水形成（圖２ａ），實驗組取１２只耳蝸進行觀察，逡逑有９只出現(xiàn)輕度積水（圖２ｂ），主要表現(xiàn)在底轉(zhuǎn)，造模成功率７５％。逡逑ｍｍ逡逑圖１正常豚鼠耳蝸切片ＨＥ染色逡逑Ｆｉｇ．邋１．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｎｏｒｍａｌ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｃａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（邋ＨＥ邋ｘｌＯＯ）逡逑ｍｌ逡逑圖２豚鼠耳蝸ＨＥ染色（ａ：對照組ｂ：實驗組ＨＥ邋ｘｉ00）逡逑Ｆｉｇ．邋２．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｅａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（ａ：邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ邋ｂ：逡逑ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｇｒｏｕｐ邋ＨＥｘｌ00）逡逑１４逡逑

２．３耳蝸形態(tài)學檢測結果（ＨＥ染色）逡逑按前庭膜向前庭階膨隆程度可將膜迷路積水分為輕、中、重度。正常豚鼠切逡逑片發(fā)現(xiàn)前庭膜未向前庭階膨隆，蝸管面積由頂轉(zhuǎn)到底轉(zhuǎn)逐漸變�。▓D１）。造模完逡逑成后，，對照組豚鼠耳蝸底轉(zhuǎn)未見積水形成（圖２ａ），實驗組取１２只耳蝸進行觀察，逡逑有９只出現(xiàn)輕度積水（圖２ｂ），主要表現(xiàn)在底轉(zhuǎn)，造模成功率７５％。逡逑ｍｍ逡逑圖１正常豚鼠耳蝸切片ＨＥ染色逡逑Ｆｉｇ．邋１．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｎｏｒｍａｌ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｃａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（邋ＨＥ邋ｘｌＯＯ）逡逑ｍｌ逡逑圖２豚鼠耳蝸ＨＥ染色（ａ：對照組ｂ：實驗組ＨＥ邋ｘｉ00）逡逑Ｆｉｇ．邋２．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｅａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（ａ：邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ邋ｂ：逡逑ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｇｒｏｕｐ邋ＨＥｘｌ00）逡逑１４逡逑
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R764

【參考文獻】

相關期刊論文 前4條

1 蔣子棟;高帆;孫程成;;不同方法構建豚鼠膜迷路積水模型的對比研究[J];中華耳科學雜志;2015年04期

2 許慶慶;郭維維;翟所強;楊仕明;;耳蝸血管紋細胞離子轉(zhuǎn)運的研究進展[J];中華耳科學雜志;2015年01期

3 溫雅;鐘時勛;;去氨加壓素對耳蝸功能及上皮鈉通道表達的調(diào)節(jié)作用[J];中華耳科學雜志;2014年03期

4 蔣子棟,張連山;醛固酮誘發(fā)豚鼠雙耳膜迷路積水[J];中國醫(yī)學科學院學報;2002年05期

本文編號：2626400