發(fā)布時間：2019-10-23 14:34

【摘要】：目的：通過標(biāo)準(zhǔn)真菌菌株DNA構(gòu)建一多重PCR反應(yīng)體系,并初步探討其對真菌性鼻竇炎臨床標(biāo)本快速診斷及同時鑒定常見致病菌的臨床應(yīng)用。通過與傳統(tǒng)的診斷方法比較,評價多重PCR反應(yīng)體系快速診斷及菌種鑒定的診斷價值。 方法：選擇三對引物(真菌通用引物、曲霉特異性引物、毛霉特異性引物)建立多重PCR反應(yīng)體系,采用曲霉菌、毛霉菌、鏈格孢菌、白色念珠菌等6種標(biāo)準(zhǔn)菌株DNA驗證體系的適用性和摸索反應(yīng)條件。同時將多重PCR、真菌培養(yǎng)兩種方法用于真菌性鼻竇炎的鼻竇內(nèi)容物的真菌檢測,比較二者敏感性。 結(jié)果：三對引物具有較好的通用性和特異性,在適宜的反應(yīng)條件下能擴(kuò)增出特異性目的片段(真菌通用引物、曲霉特異性引物、毛霉特異性引物的目的片段長度分別為：300-400bp、240bp、170bp),無明顯非特異性條帶干擾,目的條帶清晰。該反應(yīng)體系的檢測靈敏度為10pg/ul。 25例真菌性鼻竇炎標(biāo)本,真菌培養(yǎng)檢測陽性10例,陽性率40%；多重PCR體系檢測陽性18例,陽性率72%,采用配對資料χ2檢驗,兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論：利用6種標(biāo)準(zhǔn)真菌菌株成功建立了多重PCR反應(yīng)體系,其最低可檢測到10pg/ul的真菌DNA,可對真菌性鼻竇炎做出快速診斷并鑒定常見的致病菌屬。多重PCR體系對真菌性鼻竇炎的標(biāo)本的檢測陽性率高于傳統(tǒng)真菌培養(yǎng)法。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R765.21

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2552143