【摘要】：研究目的 建立早期形覺(jué)剝奪性近視(form-deprivation myopia, FDM)動(dòng)物模型,檢測(cè)豚鼠視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 (transforming growth factor-beta2, TGF-β2)及活化蛋白-1 (activator protein-1, AP-1)的水平;形覺(jué)剝奪同時(shí)分別給予AP-1的抑制劑姜黃素和視黃酸受體β(retinoic acid receptorβ, RARβ)特異性抑制劑LE540,比較不同處理對(duì)屈光狀態(tài)的影響,并檢測(cè)視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中TGF-β2和AP-1的水平,探討TGF-β2和AP-1在形覺(jué)剝奪性近視豚鼠視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中的作用及其與視磺酸(retinoic acid, RA)信號(hào)傳遞過(guò)程的關(guān)系。 方法 第一部分：同批次3周齡豚鼠12只,采用戴頭套法遮蓋左眼,右眼為自身對(duì)照眼。飼養(yǎng)至21天作為形覺(jué)剝奪動(dòng)物模型。觀測(cè)指標(biāo)：1.實(shí)驗(yàn)前后均測(cè)量屈光度,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后摘除眼球,測(cè)量眼軸長(zhǎng)；2.應(yīng)用ELISA法檢測(cè)視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中TGF-β2含量,western blotting方法檢測(cè)視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中AP-1含量的變化。 第二部分：另選同種豚鼠40只,隨機(jī)分為4組,Ⅰ組6只,為正常對(duì)照組,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組各12只。Ⅱ組為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組,左眼球后注射0.1%DMSO0.1ml;Ⅲ組左眼球后注射0.1m(1.5g/L)姜黃素；Ⅳ組左眼球后注射0.1ml (0.1 g/L) LE540;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組均隔日給藥一次,共3次,并遮蓋左眼至第21天。右眼為自身對(duì)照眼。觀測(cè)指標(biāo)同第一部分。計(jì)量資料數(shù)據(jù)以x±s表示,采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,并進(jìn)行正態(tài)分布及Levene方差齊性檢驗(yàn)后行t檢驗(yàn)和方差分析。 結(jié)果 第一部分：12只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)眼誘導(dǎo)出明顯的相對(duì)近視,且與自身對(duì)照眼比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.575,P=0.001)。實(shí)驗(yàn)眼眼軸均長(zhǎng)于自身對(duì)照眼(t=-4.920,P=0.000)。實(shí)驗(yàn)眼視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中TGF-β2水平較自身對(duì)照眼明顯降低(t=-4.933, P=0.004), Western blotting所得c-Fos和GAPDH的灰度圖顯示,實(shí)驗(yàn)眼視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中AP-1活性較自身對(duì)照眼減低(t=-2.832,P=0.037)。 第二部分：實(shí)驗(yàn)干預(yù)后Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ組的實(shí)驗(yàn)眼形成相對(duì)近視,三組左右眼屈光度差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Ⅲ組和Ⅳ組之間實(shí)驗(yàn)眼實(shí)驗(yàn)前后屈光度變化差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組干預(yù)后左右眼眼軸長(zhǎng)度差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組實(shí)驗(yàn)眼視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中TGF-β2含量較自身對(duì)照眼明顯降低(P0.05)；Ⅰ組實(shí)驗(yàn)后雙眼視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中的TGF-β2含量與自身對(duì)照眼相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組實(shí)驗(yàn)后實(shí)驗(yàn)眼視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中的AP-1活性表達(dá)與自身對(duì)照眼相比均明顯降低(P0.05)；Ⅰ組實(shí)驗(yàn)后雙眼視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中的AP-1活性表達(dá)與自身對(duì)照眼相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 豚鼠形覺(jué)剝奪可導(dǎo)致近視發(fā)生；豚鼠早期形覺(jué)剝奪眼視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中AP-1活性和TGF-β2表達(dá)下調(diào)；AP-1抑制劑姜黃素的使用可以影響豚鼠形覺(jué)剝奪性近視的形成作用,豚鼠早期形覺(jué)剝奪眼視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中TGF-β2表達(dá)受AP-1活性的影響；RARβ抑制劑LE540的使用可以影響豚鼠早期形覺(jué)剝奪性近視的形成作用；豚鼠早期形覺(jué)剝奪眼視網(wǎng)膜色素上皮-脈絡(luò)膜中RARβ可以調(diào)控AP-1和TGF-β2的活性表達(dá),AP-1和TGF-β2可能是調(diào)控豚鼠FDM形成的RA信號(hào)通路的重要因子,RA--RARp--AP-1--TGF-β2的視磺酸信號(hào)通路可能是調(diào)控豚鼠FDM形成的重要通路之一。
【圖文】：

實(shí)驗(yàn)眼均為左眼，右眼為自身對(duì)照眼。形覺(jué)剝奪均采用6號(hào)同色氣球(河北雄縣乳膠廠)于豚鼠口鼻、雙耳及非實(shí)驗(yàn)眼處開(kāi)窗，制成大小合適的頭套遮蓋左眼，頸部以膠帶固定防止脫落，，飼養(yǎng)至21天(見(jiàn)圖1)，期間動(dòng)物處于活動(dòng)狀態(tài)。于預(yù)計(jì)時(shí)間點(diǎn)用10%水合氯醛過(guò)度麻醉處死。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中動(dòng)物的使用遵循《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》。圖1豚鼠形覺(jué)剝奪性近視模型制作1.1.3實(shí)驗(yàn)方法1.1.3.1屈光度的測(cè)量12只豚鼠實(shí)驗(yàn)干預(yù)前后均行屈光度測(cè)量，本實(shí)驗(yàn)采用單盲法，由同一名有多年驗(yàn)光經(jīng)驗(yàn)的視光師檢影。動(dòng)物處于安靜狀態(tài)下，結(jié)膜囊內(nèi)點(diǎn)l%復(fù)方托毗咔胺滴眼液共3次，每次間隔 5min，30min后于暗室內(nèi)行視網(wǎng)膜檢影。動(dòng)物頭部位置固定，工作距離為0.50m，以0.25D間隔在水平及垂直子午線上帶狀光檢影

胺滴眼液共3次，每次間隔 5min，30min后于暗室內(nèi)行視網(wǎng)膜檢影。動(dòng)物頭部位置固定，工作距離為0.50m，以0.25D間隔在水平及垂直子午線上帶狀光檢影，散光以半量計(jì)入球鏡(見(jiàn)圖2)。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R778.11

【引證文獻(xiàn)】

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1 馮雪莉;段山;;信號(hào)通路與近視眼局部生長(zhǎng)調(diào)控研究進(jìn)展[J];眼科新進(jìn)展;2013年05期

本文編號(hào)：2531856