發(fā)布時(shí)間：2019-07-29 07:58

【摘要】：背景與目的 角膜堿燒傷是一種臨床常見(jiàn)的眼外傷。堿燒傷后,角膜組織發(fā)生炎性水腫,嚴(yán)重者可出現(xiàn)角膜新生血管(corneal neovascularization, CRNV)。由于CRNV的長(zhǎng)入,其出血滲出和繼發(fā)纖維化都將影響角膜透明性并最終導(dǎo)致失明。角膜的新生血管會(huì)嚴(yán)重影響角膜移植的成功率,同時(shí)堿燒傷誘導(dǎo)的角膜新生血管模型是研究新生血管的較好模型。多項(xiàng)研究均發(fā)現(xiàn)一氧化氮(nitric oxide, NO)與新生血管發(fā)生關(guān)系密切。NO由一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)催化生成。在炎性環(huán)境中,誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible NOS, iNOS)是NO的主要提供者。然而該酶在新生血管形成中的作用目前尚存爭(zhēng)議。本課題從建立小鼠堿燒傷CRNV模型著手,觀察NO(NOS)和iNOS被抑制后對(duì)堿燒傷CRNV的影響,利用免疫熒光、RT-PCR探討NO(NOS)、iNOS在堿燒傷CRNV形成中的作用與機(jī)制。 材料與方法 1. 40只BALB/c小鼠制作左眼堿燒傷誘導(dǎo)CRNV模型。將其隨機(jī)分為對(duì)照組及L-NAME干預(yù)組,每組各20只小鼠。造模前1 w,實(shí)驗(yàn)組予含NOS抑制劑—L-NAME飲水,對(duì)照組正常飲水。1 w后行角膜堿燒傷誘導(dǎo)CRNV,并繼續(xù)飲水至造模后第14 d。裂隙燈顯微鏡下觀察堿燒傷后第1 d、3 d、7 d、14 d各組角膜的炎癥反應(yīng)、角膜穿孔及新生血管形成情況。于傷后第2 d、4 d每組隨機(jī)取5只小鼠,RT-PCR法檢測(cè)角膜組織中NOS的表達(dá)情況。并于傷后第14 d,免疫熒光標(biāo)記兩組剩余小鼠角膜中新生血管并對(duì)其面積進(jìn)行比較。 2. 40只BALB/c小鼠堿燒傷后將其隨機(jī)分為對(duì)照組及AG干預(yù)組,每組20只小鼠,自堿燒傷后分別給予含有iNOS抑制劑—AG的0.2%透明質(zhì)酸鈉(sodium hyaluronate, HA)或0.2%HA點(diǎn)眼,每日3次。裂隙燈顯微鏡下觀察堿燒傷后第1d、3 d、7 d、14 d各組角膜的炎癥反應(yīng)、角膜穿孔及新生血管形成情況。于傷后第2 d、4 d每組隨機(jī)取5只小鼠,RT-PCR法檢測(cè)角膜組織中iNOS、VEGF的表達(dá)情況。并于傷后第14 d,免疫熒光標(biāo)記兩組剩余小鼠角膜組織中的新生血管并對(duì)其面積進(jìn)行比較。 結(jié)果 1.堿燒傷后2 d、4 d,L-NAME干預(yù)組小鼠角膜組織中NOS基因表達(dá)較對(duì)照組明顯降低(P0.05)。傷后14 d,L-NAME干預(yù)組CRNV面積較對(duì)照組顯著減少(P0.05)。 2.堿燒傷后2 d、4 d,AG干預(yù)組小鼠角膜組織中iNOS基因表達(dá)較對(duì)照組明顯降低(P0.05),而VEGF的基因表達(dá)明顯增強(qiáng)(P0.05)。傷后第14 d,AG干預(yù)組CRNV面積與對(duì)照組之間無(wú)明顯差異(P0.05)。 結(jié)論 1. NO(NOS)在堿燒傷誘導(dǎo)小鼠CRNV模型中起促進(jìn)新生血管發(fā)生發(fā)展的作用; 2. iNOS在堿燒傷誘導(dǎo)小鼠CRNV模型中對(duì)新生血管發(fā)生發(fā)展無(wú)促進(jìn)作用。
【圖文】：

對(duì)照組堿燒傷后第14dCRNV

L-NAME干預(yù)組堿燒傷后第14dCRNV
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R779.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 李靜,柳林,唐維強(qiáng),溫新富,沈煒;誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶在大鼠角膜新生血管模型的表達(dá)及意義[J];國(guó)際眼科雜志;2004年02期

2 邱培瑾,姚克;角膜新生血管的動(dòng)物模型[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).眼科學(xué)分冊(cè);2000年06期

3 賀玖成,鄭小紅,外園千惠,木下茂;基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑治療角膜新生血管的實(shí)驗(yàn)研究[J];眼科研究;2001年02期

4 陸培榮;李龍標(biāo);張學(xué)光;;小鼠角膜堿燒傷后前炎性因子、趨化因子及其受體的表達(dá)[J];眼科研究;2007年04期

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本文編號(hào)：2520347