【摘要】：目的 研究鈣離子拮抗劑維拉帕米(verapamil,Ver)對(duì)體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞(huamn lens epithelial cell,HLEC)增殖、凋亡和黏附的影響。 方法 體外培養(yǎng)人晶狀體上皮細(xì)胞株(SRA01/04)。Ver處理第二代人晶狀體上皮細(xì)胞。MTT法觀察不同濃度的Ver對(duì)HLEC增殖的影響,流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)Ver對(duì)HLEC周期的影響,AO/EB雙染法觀察細(xì)胞凋亡形態(tài),Annexin V-FITC/PITC凋亡試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。MTT法測(cè)定Ver對(duì)HLEC貼壁的影響。 結(jié)果 (1)隨著Ver藥物濃度的增加,HELC增殖率減少,以72小時(shí)最為明顯。(2)FCM檢測(cè)細(xì)胞周期細(xì)胞變化時(shí)發(fā)現(xiàn):G1期細(xì)胞在藥物組(77.97±0.18、78.15±0.12、82.86±0.56、84.84±0.42)較正常組(72.67±0.94)增加(P0.05);S期的細(xì)胞在藥物組(10.26±0.06、10.08±0.76、8.52±0.31、8.42±0.27)較正常組(16.87±0.33)明顯減少(P0.05)。(3)形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)HELC在80mg/l濃度的Ver作用72小時(shí)后發(fā)生了一系列形態(tài)改變,包括細(xì)胞核固縮、染色質(zhì)邊集等凋亡改變。流式細(xì)胞儀測(cè)定了10、20、40、80mg/l濃度的Ver可以誘導(dǎo)HLEC發(fā)生凋亡,且隨著濃度的升高凋亡率顯著升高。(4)用藥24h后HELC的貼壁量為對(duì)照組的73.17%。 結(jié)論 Ver對(duì)體外培養(yǎng)的HLEC生長(zhǎng)有抑制作用,使細(xì)胞停留在G1期。Ver可以誘導(dǎo)HLEC凋亡,隨著藥物濃度增加細(xì)胞凋亡率增加,而且Ver有抑制HLEC貼壁的作用。提示Ver能改變細(xì)胞周期的進(jìn)程而有效抑制HLEC的增生、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并且抑制HLEC的黏附,有望成為防治后發(fā)性白內(nèi)障的理想藥物。
【圖文】：

圖 1 細(xì)胞培養(yǎng)（×200）晶狀體上皮細(xì)胞增殖的影響度的增加，，細(xì)胞增殖率逐漸減少，以 72 小時(shí)最l 藥物濃度組隨時(shí)間增加細(xì)胞抑制率增加，差0mg/l藥物濃度組培養(yǎng)48h與72h差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。濃度不同時(shí)間 Ver 對(duì) HLEC 增殖率的影響（x吸光值（A）培養(yǎng) 24h 培養(yǎng) 48h 培養(yǎng)0.73±0.08 0.74±0.12 0.770.71±0.18*#^0.59±0.02*#^0.540.70±0.01*#^0.52±0.03*#^0.52

對(duì)照組
【學(xué)位授予單位】：遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R776.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2516626