【摘要】： 目的觀察白細胞介素10 (interleukin-10,IL-10)及環(huán)氧合酶2(cyclooxygenase,COX-2)在大鼠真菌性角膜炎中的表達情況,給予選擇性COX-2抑制劑NS-398,觀察藥物干預前后IL-10的變化并分析其意義。方法健康Wistar大鼠85只,雌雄不限,在刮除上皮的大鼠角膜涂布以茄病鐮刀菌標準菌落并覆蓋自制角膜接觸鏡,建立角膜真菌感染模型。大鼠隨機分為3組,A組5眼為空白對照組、B組40眼為真菌感染模型組、C組40眼為模型加藥物干預組,其中A組不予任何處理,B、C兩組右眼均為實驗眼,建立真菌模型,左眼為實驗對照眼,僅覆蓋角膜接觸鏡。模型建立后實驗組分別于模型建立后第1天打開眼瞼,B組給予PBS滴眼,C組給予NS-398滴眼,每日4次。造模后第1d、3d、7d、14d處死大鼠,取角膜。HE染色、PAS染色觀察角膜組織病理變化并檢測真菌生長,運用免疫組織化學和RT-PCR技術檢測各組不同時間點COX-2與IL-10的表達情況。結果1、組織病理學觀察見真菌性角膜炎病灶內(nèi)有大量中性粒細胞浸潤并伴有嚴重的組織壞死,PAS染色檢查見菌絲及孢子可達基質(zhì)淺層及中層。2、COX-2在空白對照及對照眼角膜基本不表達；B組在接種真菌后1d開始出現(xiàn)COX-2的表達,并逐漸增高,第14d表達減弱至不明顯,各時間點比較差異具有顯著性(P0.01)；C組與B組比較第1d、14d COX-2表達差異無顯著性(P0.05),3d、7d表達明顯降低,差異具有顯著性(P0.01)。3、IL-10在空白對照及對照組角膜基本不表達；B組在接種真菌后IL-10的表達先增高后降低,各時間點比較差異有顯著性(P0.01)；右眼C組與B組比較第1d IL-10表達差異無顯著(P0.05),3d下降、7d、14d表達明顯增高,差異具有顯著性(P0.01)。 結論1、PAS染色、10%氫氧化鉀涂片及組織刮取物行菌落培養(yǎng)證實大鼠真菌性角膜炎動物模型建立成功。2、COX-2表達于真菌性角膜炎組織中,是真菌性角膜炎病變過程中的敏感炎性因子,NS-398可抑制真菌性角膜炎COX-2的表達。3、IL-10表達于真菌性角膜炎組織中,提示IL-10可能參與了真菌性角膜炎的發(fā)生與發(fā)展,NS-398可增強真菌性角膜炎角膜組織中IL-10的表達,即使在病變后期IL-10也有較強的表達,同時段病理顯示角膜混濁減輕,提示IL-10可能參與了后期角膜組織的抗損傷修復過程。
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R772.21

【參考文獻】

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本文編號：2514254