【摘要】：目的: 研究玻璃體結(jié)構(gòu)的完整性對高氧誘導(dǎo)的晶狀體代謝的保護作用。 方法: 1. 16只雄性新西蘭大白兔(2.4-2.5 kg/只,6月齡),隨機分為A,B兩組。A組12只,其中右眼(A1組,12眼)實施玻璃體切除術(shù),左眼(A2組,12眼)未行手術(shù),術(shù)后第二日開始A組12只兔子放入高氧環(huán)境(一個大氣壓,氧濃度80%-85%)中飼養(yǎng),每日4小時。其余時間正常喂養(yǎng)。B組4只(8眼)未作任何處理為對照組。A組右眼為手術(shù)眼,在噻拉嗪(5 mg·kg-1)和氯胺酮(45 mg·kg-1)肌肉注射麻醉下行玻璃體切除術(shù),確保切除兔眼玻璃體腔中軸、晶狀體后及視網(wǎng)膜前的玻璃體凝膠。術(shù)中平均玻璃體切除和平衡液灌注時間為10 min。手術(shù)嚴(yán)格無菌操作,術(shù)中注意避免手術(shù)器械碰傷晶狀體和視網(wǎng)膜。 2.術(shù)后用1%復(fù)方托吡卡胺滴眼液散瞳,麻醉后使用瑞士產(chǎn)BQ900裂隙燈觀察兔晶狀體混濁情況,每周觀察1次并記錄和照相。晶狀體混濁情況分級標(biāo)準(zhǔn)參考英國牛津大學(xué)眼科實驗室晶狀體分級方法。 3. 6個月后空氣栓塞處死新西蘭白兔,取出晶狀體,每組取1只晶狀體做HE染色,其余晶狀體分為晶狀體囊膜皮質(zhì)部和核部兩部分,分別進行水溶性蛋白質(zhì),丙二醛(malonaldehyde,MDA),谷胱甘肽(glutathione, GSH),轉(zhuǎn)化生長因子-β2(transforming growth factor-β2, TGF-β2)和抗壞血酸(Ascorbate, AsA)含量測定及Na~+-K~+-ATP酶、過氧化氫酶(catalase, CAT)和谷胱甘肽還原酶(glutathione reductase, GR)活性檢測。 4.同期,抽取房水和玻璃體液,分別測定其中轉(zhuǎn)化生長因子-β2(transforming growth factor-β2, TGF-β2)的含量。測定玻璃體液中抗壞血酸(Ascorbate, AsA)含量。 結(jié)果: 1.玻璃體切除術(shù)后6個月,玻切+高氧組與對照組的晶狀體在透明度和組織形態(tài)學(xué)上沒有明顯差異。 2.以對照組為標(biāo)準(zhǔn),單純高氧組的晶狀體核部水溶性蛋白質(zhì)含量與對照組相比減少了7.74%(P =0.02)。與對照組晶狀體囊膜皮質(zhì)部和核部相比,單純高氧組相應(yīng)部位的GSH含量,GR活性,Na+-K+-ATP酶活性和CAT活性均發(fā)生了降低,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而MDA含量有所增加,但無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。 3.玻璃體切除術(shù)后給予高氧處理6個月,玻切+高氧組與對照組相比,晶狀體囊膜皮質(zhì)部水溶性蛋白質(zhì)含量減少了8.27%(P=0.004),核部水溶性蛋白質(zhì)含量減少了10.09%(P0.001)。玻切+高氧組與對照組相對應(yīng)部位相比,GSH含量,GR活性,Na+-K+-ATP酶活性和CAT活性均發(fā)生了降低,但差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。同時,玻切+高氧組晶狀體囊膜皮質(zhì)部和核部MDA含量比對照組相應(yīng)部位MDA含量分別增加了15.11%(P =0.029)和16.20%(P =0.011)。 4.與單純高氧組相比,玻切+高氧組晶狀體囊膜皮質(zhì)部和核部水溶性蛋白質(zhì)含量分別減少了3.7%(P0.05)和1.3%(P0.05)。玻切+高氧組晶狀體兩部分與單純高氧組相應(yīng)部位比較,GSH含量,GR活性,Na~+-K~+-ATP酶活性和CAT活性均發(fā)生了降低,但均無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。同時,玻切+高氧組與單純高氧組相比,晶狀體囊膜皮質(zhì)部和核部MDA含量分別增加了11.11%(P0.05)和5.1%(P0.05)。 5.給予高氧處理6個月后,與對照組相比,單純高氧組晶狀體核部TGF-β2含量增加了75.88%(P=0.043),而房水,晶狀體核部以及玻璃體液中TGF-β2含量與對照組相應(yīng)部位相比,均無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。而玻璃體切除+高氧處理6個月后,與對照組相比,玻切+高氧組眼內(nèi)四個部分TGF-β2含量均有明顯的增加,其中晶狀體囊膜皮質(zhì)部和核部分別增加了90.47%(P=0.016)和217.94%(P=0.001),玻璃體TGF-β2含量增加了148.40%(P=0.002),房水中TGF-β2含量比對照組稍有增加,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。玻切高氧組與單純高氧組相比,晶狀體囊膜皮質(zhì)部TGF-β2含量增加了54.81%(P=0.048),晶狀體核部TGF-β2含量增加了80.87%(P=0.007),玻璃體中TGF-β2含量增加了70.34%(P=0.039),房水部TGF-β2含量有所增加,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 6.單純高氧組在給予高氧處理6個月后,晶狀體兩部分和玻璃體中AsA含量與對照組相應(yīng)部位相比,均發(fā)生了不同程度的降低,但是差別未達(dá)到統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。玻切+高氧組與對照組相比,晶狀體囊膜皮質(zhì)部、核部和玻璃體液中AsA含量均發(fā)生了減少,其中以玻璃體中AsA含量的減少最為明顯,降低了50.6%。而玻切+高氧組與單純高氧組相比,同樣晶狀體兩部分和玻璃體中AsA含量均發(fā)生了減少,其中玻璃體中AsA減少了42.2%。 結(jié)論: 高氧可使成年兔晶狀體發(fā)生生物化學(xué)改變,包括房水,玻璃體再形成液中細(xì)胞因子的變化。而玻璃體切除術(shù),破壞了玻璃體結(jié)構(gòu)的完整性,失去了玻璃體對晶狀體的保護作用,使高氧誘導(dǎo)的晶狀體損傷更加顯著。說明玻璃體凝膠結(jié)構(gòu)的完整性對于維持晶狀體正常的代謝狀態(tài)具有重要的保護作用。 創(chuàng)新點 本研究首次報道通過制備聯(lián)合高氧和玻璃體切除的動物模型,研究玻璃體結(jié)構(gòu)的完整性對晶狀體氧化損傷的保護作用,提出玻璃體屏障的作用對晶狀體及其周圍組織抗氧化損傷的重要性,為闡明玻切術(shù)后白內(nèi)障的發(fā)病機制和防治玻璃體切除術(shù)后相關(guān)性眼部并發(fā)癥提供新的思路和實驗依據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R776.4

【共引文獻(xiàn)】

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1 賀春梅;王z牖，

本文編號：2459487