發(fā)布時間：2018-10-19 20:13

【摘要】： 目的： 研究前房內(nèi)免疫微環(huán)境的動態(tài)變化與角膜移植免疫排斥反應(yīng)的關(guān)系。 方法： 建立小鼠穿透性角膜移植術(shù)(PKP)模型。60只BALB/c小鼠隨機分為三組：異系PKP組(A組)、異系PKP+FK506前房植入組(B組)和原位PKP組(C組),術(shù)后裂隙燈觀察各組是否有植片免疫排斥發(fā)生及排斥時間,病理學(xué)檢測3天、7天及植片免疫排斥時各組角膜植片及虹膜睫狀體內(nèi)炎細胞浸潤情況；免疫熒光法檢測3天、7天及植片免疫排斥時各組植片及虹膜睫狀體內(nèi)CD4+T細胞及MHC-Ⅱ+細胞的表達；Real-time RT-PCR檢測A組及B組7天、14天、21天虹膜睫狀體內(nèi)CD4+T細胞的亞群--Th1及Th17細胞的特征性細胞因子(IFN-γ和IL-17)和特征性轉(zhuǎn)錄因子(T-bet和RORγt)的mRNA表達水平。 結(jié)果： A組植片發(fā)生植片免疫排斥的平均時間為16.18±4.81天,B組和C組未見明顯的免疫排斥反應(yīng)發(fā)生。組織病理學(xué)顯示A組3天時角膜緣出現(xiàn)炎癥細胞浸潤,并可見炎癥細胞粘附于角膜內(nèi)皮面,角膜植片未見明顯炎細胞浸潤；7天時除角膜緣有炎癥細胞浸潤外,可見前房角內(nèi)多量淋巴細胞,部分粘附于角膜內(nèi)皮,角膜植片未見明顯炎細胞浸潤；植片免疫排斥時角膜緣無明顯炎細胞浸潤,植片內(nèi)可見大量炎細胞浸潤,且有大量新生血管長入。B組及C組3天、7天及A組植片免疫排斥同時間點時僅角膜緣有炎癥細胞浸潤,前房及角膜內(nèi)皮和角膜植片均未見明顯炎細胞。免疫熒光示A組術(shù)后3天僅少量CD4+、MHC-Ⅱ+細胞沿虹膜睫狀體走形,角膜植片無表達；7天時可見虹膜睫狀體、前房角及角膜緣多量CD4+、MHC-Ⅱ+細胞聚集,角膜植片無明顯表達；角膜植片排斥時可見虹膜睫狀體及角膜植片大量CD4+細胞表達,并可見前房內(nèi)CD4+細胞團,MHC-Ⅱ+細胞在虹膜睫狀體、角膜緣及角膜植片少量表達。B組虹膜睫狀體及角膜植片均未見明顯CD4+、MHC-Ⅱ+細胞表達。C組僅7天時在虹膜及角膜緣有CD4+、MHC-Ⅱ+表達,余時間點均無明顯表達。Real一t ime RT-PCR示A組術(shù)后7天IL-17mRNA及其轉(zhuǎn)錄因子RORγt明顯升高,術(shù)后14天及21天IFN-γ及其轉(zhuǎn)錄因子T-bet表達逐漸上升,IL-17mRNA及其轉(zhuǎn)錄因子RORγt水平逐漸下降;前房FK506-DDS植入組細胞因子及其轉(zhuǎn)錄因子的表達水平在各個時間點均處于低水平,未見明顯變化。 結(jié)論： 前房內(nèi)免疫微環(huán)境的動態(tài)失衡是引起角膜移植免疫排斥的主要因素。虹膜睫狀體-角膜內(nèi)皮途徑輸送免疫活性細胞在微環(huán)境的改變中發(fā)揮重要作用,阻斷這一途徑可以有效預(yù)防角膜移植免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生。Th17細胞在角膜移植免疫排斥反應(yīng)的早期可能起促進作用,Th1細胞在角膜移植免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生中起主要作用。
[Abstract]:Aim: to study the relationship between the dynamic changes of immune microenvironment in anterior chamber and corneal allograft rejection. Methods: the (PKP) model of penetrating keratoplasty in mice was established. Sixty BALB/c mice were randomly divided into three groups: group A (allogeneic PKP), group B (anterior chamber implantation of heterologous PKP FK506) and group C (orthotopic PKP). To observe whether the graft immune rejection occurred and the time of rejection in each group, The infiltration of corneal grafts and iridocyclitis cells in 3 days, 7 days and graft rejection was detected by pathology. The expression of CD4 T cells and MHC- 鈪，

本文編號：2282239