發(fā)布時(shí)間：2018-08-05 17:37

【摘要】：利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)制備了重組融合蛋白antiEGFR/MEL,并用Ni2+層析柱對(duì)其進(jìn)行了純化.該重組蛋白中抗表皮生長(zhǎng)因子受體(antiEGFR)單鏈抗體(scFv)主要靶向喉癌細(xì)胞中的EGFR,而蜂毒肽(MEL)主要抑制腫瘤細(xì)胞增殖.采用SDS-PAGE和Westernblot檢測(cè)證明了antiEGFR/MEL的有效表達(dá).共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,antiEGFR/MEL可與Hep-2腫瘤細(xì)胞有效結(jié)合,而幾乎不與EGFR陰性的Jurkat細(xì)胞結(jié)合.噻唑藍(lán)(MTT)檢測(cè)結(jié)果說(shuō)明,antiEGFR/MEL可有效抑制人喉癌細(xì)胞Hep-2的增殖.以上結(jié)果表明,antiEGFR/MEL能夠有效靶向EGFR陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞,并有效抑制腫瘤細(xì)胞增殖,有望應(yīng)用于EGFR靶向腫瘤治療.
[Abstract]:The recombinant fusion protein antiEGFR/MEL was prepared by the Escherichia coli expression system and purified by Ni2+ chromatography column. The anti epidermal growth factor receptor (antiEGFR) single chain antibody (scFv) was mainly targeted to the EGFR in the larynx cells, and MEL was used to inhibit the proliferation of the tumor cells. SDS-PAGE and Westernblot were used to detect the proliferation of the tumor cells. The effective expression of antiEGFR/MEL was demonstrated. The results of confocal microscopy and flow cytometry showed that antiEGFR/MEL could be effectively combined with Hep-2 tumor cells, but almost not combined with EGFR negative Jurkat cells. The results of thiazolium blue (MTT) showed that antiEGFR/MEL could effectively inhibit the proliferation of Hep-2 in human larynx cells. The above results showed that AntiEGFR/MEL can effectively target EGFR-positive tumor cells and inhibit the proliferation of tumor cells.
【作者單位】： 吉林省腫瘤醫(yī)院頭頸外一科;吉林大學(xué)第二臨床醫(yī)院耳鼻咽喉科;吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院超聲科;日照市東港區(qū)人民醫(yī)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):81101140) 國(guó)家“八六三”計(jì)劃項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):2012AA02A407) 吉林省科技發(fā)展計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):20130206041NY)資助~~
【分類號(hào)】：R739.65

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2166506