本文選題：探針制備 + 原位雜交��； 參考：《中華耳科學雜志》2014年03期

【摘要】：目的介紹一種雞胚原位雜交探針制備方法。方法攜帶Bmp4和Cath1基因特異片段的質粒載體,通過質粒小提試劑盒擴增,限制性內切酶線性化,酚氯仿抽提純化,T3 RNA聚合酶體外轉錄,合成地高辛標記的反義探針,通過電泳及雞胚原位雜交檢測探針的質量.結果獲得了效果良好的Bmp4和Cath1的RNA探針.結論用質粒小提試劑盒對質粒載體擴增,進而通過線性化、純化、轉錄等步驟來制備原位雜交探針的方法,具有時間短、費用低、質量高、雜交效果好等優(yōu)點。
[Abstract]:Objective to introduce a method for preparation of chicken embryo in situ hybridization probe. Methods the plasmid vector carrying the specific fragments of Bmp4 and Cath1 gene was amplified by plasmid small extraction kit. The restriction endonuclease was linearized, the phenol chloroform was extracted and purified to transcribe the T 3 RNA polymerase in vitro, and the antisense probe labeled with digoxin was synthesized. The quality of the probe was detected by electrophoresis and in situ hybridization of chicken embryo. Results the RNA probes of Bmp4 and Cath1 were obtained. Conclusion the method of amplification of plasmid vector by plasmid small extraction kit and then preparation of in situ hybridization probe by linearization, purification and transcription has the advantages of short time, low cost, high quality, good hybridization effect and so on.
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科解放軍耳鼻咽喉研究所;
【基金】：國家自然基金專項基金項目(31140047)(31340055) 解放軍總醫(yī)院專利轉化基金項目(42411D19) 解放軍總醫(yī)院苗圃基金項目(07MP24)聯(lián)合資助
【分類號】：R764

【共引文獻】

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本文編號：1933111