靶向納米造影劑C225-USPIO對EGFR高表達(dá)鼻咽癌CNE1細(xì)胞系磁共振免疫顯像研究
本文選題:C225 + USPIO; 參考:《華中科技大學(xué)》2010年碩士論文
【摘要】:目的制備針對表皮生長因子受體(EGFR)的靶向納米磁共振造影劑并進(jìn)行體外檢測。方法將西妥昔單抗(C225)與超小型超順磁性氧化鐵(USPIO)通過碳二亞胺法連接成針對EGFR的靶向納米造影劑C225-USPIO。選擇EGFR高表達(dá)鼻咽癌CNE1細(xì)胞系,流式細(xì)胞術(shù)、間接免疫熒光檢測C225-USPIO與CNE1細(xì)胞的免疫結(jié)合活性。普魯士藍(lán)染色以及細(xì)胞透射電鏡(TEM)檢測CNE1細(xì)胞對C225-USPIO靶向結(jié)合攝取情況。4.7T磁共振成像(MRI)檢測Fe濃度為50μg/ml的C225-USPIO孵育CNE1細(xì)胞不同時間梯度后引起的MRI信號強(qiáng)度變化。 結(jié)果流式細(xì)胞術(shù)、間接免疫熒光結(jié)果顯示C225-USPIO對鼻咽癌CNE1細(xì)胞表面EGFR有良好的免疫結(jié)合活性。普魯士藍(lán)染色及細(xì)胞透射電鏡(TEM)檢測顯示C225-USPIO可在CNE1細(xì)胞表面特異性結(jié)合EGFR并被攝取入胞內(nèi)。4.7T MRI結(jié)果顯示,CNE1細(xì)胞可以結(jié)合攝取C225-USPIO,引起MRI T2信號強(qiáng)度明顯降低。結(jié)論C225-USPIO能特異性的與高表達(dá)EGFR的鼻咽癌CNE1細(xì)胞結(jié)合,具有良好的特異性和靶向性,并且可以明顯的降低磁共振的T2信號強(qiáng)度,為以后的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)提供了充足的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:Objective to prepare an EGF receptor EGFR targeted nano magnetic resonance contrast medium and detect it in vitro. Methods C225-USPIO-targeted nano-contrast agent C225-USPIO-targeted EGFR was prepared by ligation of cetuximab C225) and ultrasmall superparamagnetic iron oxide (USPIO) by carbodiimide method. The high expression of EGFR in nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE1 cell line, flow cytometry and indirect immunofluorescence assay were used to detect the immunobinding activity of C225-USPIO and CNE1 cells. Prussian blue staining and transmission electron microscopy (TEM) were used to detect the uptake of C225-USPIO targeting by CNE1 cells. 4.7T MRI) was used to detect the changes of MRI signal intensity induced by C225-USPIO incubated with 50 渭 g/ml Fe for different time gradient. Results flow cytometry and indirect immunofluorescence showed that C225-USPIO had good immunobinding activity to EGFR on the surface of nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE1 cells. Prussian blue staining and transmission electron microscopy (TEM) analysis showed that C225-USPIO could specifically bind to EGFR on the surface of CNE1 cells and be ingested into the cells. The results showed that C225-USPIO could be combined with the uptake of C225-USPIO. the signal intensity of MRI T2 was significantly decreased. Conclusion C225-USPIO can specifically bind to CNE1 cells of NPC with high expression of EGFR. It has good specificity and targeting, and can obviously reduce the intensity of T2 signal of MRI, which provides sufficient experimental basis for future in vivo experiments.
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號】:R739.63
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本文編號:1882251
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