本文選題：喉腫瘤 + 流式分選術(shù)��； 參考：《臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志》2014年18期

【摘要】：目的:探討喉癌細胞株Hep-2中干細胞樣側(cè)群(SP)細胞的分選方法及其干細胞特性。方法:制備喉癌Hep-2單細胞懸液,經(jīng)Hoechst 33342染色后,用熒光激活細胞分選技術(shù)分選出人喉癌SP和非側(cè)群(NSP)細胞,測定SP細胞亞群所占的比例。電子顯微鏡下觀察SP及NSP細胞形態(tài),檢測兩群細胞的細胞周期、CCK8檢測細胞的增殖能力。熒光定量PCR檢測SP及NSP細胞中的ABCG2mRNA的相對量,結(jié)果用2-ΔΔCt計算。結(jié)果:流式細胞儀分析結(jié)果表明,SP細胞在Hep-2細胞株中占(13.17±1.85)%。生長曲線(CCK8法)示,SP細胞較NSP細胞有更強的增殖能力;兩者所處的細胞周期相似,S期細胞比例及增殖指數(shù)兩者相比,t分別為0.678、0.614(P0.05)。熒光定量PCR示SP細胞中ABCG2mRNA含量高于NSP細胞。結(jié)論:人Hep-2細胞株中存在一部分能將Hoechst33342排出細胞外的SP細胞。SP細胞較NSP有更強的增殖及體內(nèi)成瘤能力,具有干細胞活性。SP細胞中ABCG2mRNA表達量明顯高于NSP細胞。
[Abstract]:Aim: to investigate the sorting method and stem cell characteristics of stem cell like side group (SPN) cells in laryngeal carcinoma cell line Hep-2. Methods: the single cell suspension of Hep-2 was prepared. After Hoechst 33342 staining, SP and non-SSP cells of laryngeal carcinoma were separated by fluorescence activated cell sorting technique, and the percentage of SP cell subsets was measured. The morphology of SP and NSP cells were observed under electron microscope, and the cell cycle and the proliferative ability of the two groups of cells were detected by CCK8. The relative amount of ABCG2mRNA in SP and NSP cells was detected by fluorescence quantitative PCR. The results were calculated with 2- 螖 螖 Ct. Results: the results of flow cytometry showed that SP cells accounted for 13.17 鹵1.85% of Hep-2 cell lines. Growth curve (CCK8) showed that SP cells had stronger proliferative ability than NSP cells, and the cell ratio and proliferation index of the two cells were similar to those of NSP cells. Fluorescence quantitative PCR showed that the content of ABCG2mRNA in SP cells was higher than that in NSP cells. Conclusion: there are some SP cells in human Hep-2 cell line which can expel Hoechst33342 from the cells. Sp cells have stronger proliferation and tumorigenic ability than NSP. The expression of ABCG2mRNA in the stem cell activity. Sp cells is significantly higher than that in NSP cells.
【作者單位】： 廣州市第十二人民醫(yī)院耳鼻咽喉科;
【分類號】：R739.65

【參考文獻】

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本文編號：1776397