本文選題：喉癌 + 端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶　； 參考：《武漢大學(xué)》2013年博士論文

【摘要】：目的：研究端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)在喉癌細胞增殖過程中的作用,研究c-fos和c-jun二聯(lián)體在TERT促進喉癌細胞增殖過程中的作用。方法：CCK-8法分別檢測Ad-TERT和Ad-shTERT腺病毒載體處理前后的喉癌Hep-2細胞增殖能力的變化；real-time PCR法檢測Ad-TERT和Ad-shTERT腺病毒載體處理前后的喉癌Hep-2細胞中TERT、c-fos以及c-jun mRNA的表達；RT-PCR法檢測32例喉癌組織中TERT、c-fos和c-jum mRNA的表達；量子點標記免疫熒光法檢測54例喉癌組織切片中TERT、c-fos和c-jun蛋白的表達；spearman相關(guān)性檢驗比較TERT與c-fos、c-jun表達的相關(guān)性。 結(jié)果：Ad-TERT腺病毒載體處理后,Hep-2細胞的增殖速率增加55%, TERT mRNA表達分別增加59%, c-fos mRNA表達分別增加52%,c-jun mRNA表達分別增加51%。Ad-shTERT腺病毒載體處理后,Hep-2細胞的增殖速率降低46%、。TERT mRNA表達分別減少70%, c-fos mRNA表達分別減少79%, c-jun mRNA表達分別減少71%。RT-PCR法檢測32例喉癌組織中TERT/actin mRNA表達比值為(0.003～0.969), c-fos/actin mRNA表達比值為(0.001-2.768),c-jun/actin mRNA表達比值為(0.015-1.587), spearman相關(guān)性檢驗比較TERT/actin與c-fos/actin mRNA表達相關(guān)系數(shù)r=0.659(P0.01),TERT/actin與c-jun/actin mRNA表達相關(guān)系數(shù)r=0.763(P0.01),c-fos/actin與c-jun/actin mRNA表達相關(guān)系數(shù)r=0.929(P0.01)。量子點標記免疫熒光法檢測54例喉癌組織切片中TERT與c-fos、c-jun表達部位一致率分別為85%和82%,TERT表達陽性率為(36%-61%),c-fos表達陽性率為(32%-55%),c-jun表達陽性率為(40%-67%),spearman相關(guān)性檢驗比較TERT與c-fos蛋白表達相關(guān)系數(shù)r=0.712(P0.01),TERT與c-jun蛋白表達相關(guān)系數(shù)r=0.683(P0.01),c-fos與c-jun蛋白表達相關(guān)系數(shù)r=0.958(P0.01)。 結(jié)論：TERT在促進喉癌細胞增殖過程中發(fā)揮了非常重要的作用,靶向沉默TERT mRNA后c-fos和c-jun mRNA表達均明顯降低,過表達TERT后c-fos和c-jun mRNA表達均明顯增高。c-fos和c-jun的表達呈高度相關(guān),與文獻中報道c-fos和c-jun通常是以二聯(lián)體形式存在一致。c-fos、c-jun與TERT在喉癌中的表達呈中-高度相關(guān),且相關(guān)性具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義,我們推測在TERT促進喉癌細胞增殖的過程中,c-fos和c-jun二聯(lián)體發(fā)揮了重要的作用,但其具體機制仍需進一步研究。
[Abstract]:Aim: to study the role of telomerase reverse transcriptase (TERT) in the proliferation of laryngeal carcinoma cells and the role of c-fos and c-jun dimer in the process of TERT promoting the proliferation of laryngeal cancer cells.Methods Ad-TERT and Ad-shTERT adenovirus vectors were used to detect the proliferative ability of Hep-2 cells before and after treatment with Ad-TERT and Ad-shTERT adenovirus vectors respectively. The expression of TERTc-fos and c-jun mRNA in Hep-2 cells of laryngeal carcinoma before and after Ad-TERT and Ad-shTERT adenovirus vector treatment were detected by real-time PCR method. RT-PCR was used to detect the expression of TERTc-fos and c-jun mRNA in Hep-2 cells treated with Ad-TERT and Ad-shTERT adenovirus vectors.Expression of TERTnc-fos and c-jum mRNA in laryngeal carcinoma;The expression of TERTnc-fos and c-jun protein in 54 cases of laryngeal carcinoma was detected by quantum dot immunofluorescence method. The correlation between TERT and c-fos-c-jun expression was compared by Spearman correlation test.Results the proliferation rate of Hep-2 cells was increased by 55% Ad-TERT adenovirus vector, the expression of TERT mRNA and c-fos mRNA were increased, respectively. The expression of c-fos mRNA and c-jun mRNA were increased, respectively. The proliferation rate of Hep-2 cells was decreased by 46T mRNA after treatment with 51%.Ad-shTERT adenovirus vector.By 71%.RT-PCR method, the expression ratio of TERT/actin mRNA and c-fos/actin mRNA in 32 cases of laryngeal carcinoma was 0.003 ~ 0.969 and 0.001-2.768, respectively. The expression ratio of c-fos mRNA and c-jun mRNA were 0.015-1.587. spearman correlation test compared TERT/actin with c-fos/actin mRNA.The correlation coefficient between the expression of TERT / actin and the expression of c-jun/actin mRNA was 0.763P0.01and the correlation coefficient between c-fos-ractin and c-jun/actin mRNA expression was 0.929 and P0.01.The correlation coefficient between the expression of c-jun protein and the expression of TERT was 0.683P0.01. the correlation coefficient between c-fos and c-jun protein was 0.958 and P0.01.Conclusion the expression of c-fos and c-jun mRNA decreased after targeted silencing of TERT mRNA, and the expression of c-fos and c-jun mRNA increased significantly after overexpression of TERT. The expression of c-fos and c-jun were highly correlated.The expression of c-fos and c-jun in laryngeal carcinoma was significantly correlated with that of c-fos and c-jun in laryngeal carcinoma, and there was a significant correlation between c-fossil-c-jun and c-jun in laryngeal carcinoma, and there was a significant correlation between c-fossil-c-jun and c-jun in laryngeal carcinoma.We speculate that TERT plays an important role in promoting the proliferation of laryngeal cancer cells, but its mechanism needs further study.
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R739.65

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本文編號：1733384