本文關鍵詞：地塞米松聯(lián)合曲安奈德對兔視網膜缺血再灌注損傷的保護作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《河北聯(lián)合大學》 2014年

地塞米松聯(lián)合曲安奈德對兔視網膜缺血再灌注損傷的保護作用

李杏  

【摘要】：目的探討地塞米松聯(lián)合曲安奈德玻璃體腔注射在兔視網膜缺血再灌注損傷（retina ischemia-reperfusion injury, RIRI）中的作用，為地塞米松聯(lián)合曲安奈德在治療RIRI方面提供實驗依據，并為臨床治療具有RIRI病理過程的疾病探索新的治療途徑。 方法體重2.0～2.5kg的純種日本大耳白兔81只，健康雄性，隨機分為3組。第1組5只，為正常對照組，不做任何處理。另2組為實驗損傷組76只，其中右眼為損傷治療組，左眼為損傷對照組，均通過前房灌注升高眼內壓的方法制作RIRI模型，傷后立即右眼玻璃體腔注射地塞米松與曲安奈德的混合液100ul（體積比1:1），左眼玻璃體腔注射等量的乳酸鈉林格注射液作為對照。實驗損傷組分別于缺血即時、再灌注后6h、12h、24h、48h、72h、1w每個時間點各取4只兔子活體行眼底照相及造影，正常對照組任選2只兔子用于眼底照相及眼底熒光血管造影（fundus fluorescein angiography, FFA）。另外，實驗損傷組分別于再灌注后1h、6h、12h、24h、48h、72h、1w每個時間點各取6只兔處死后立即取眼球組織，行HE染色，免疫組化檢測wt-p53和Caspase-3蛋白的表達，正常對照組取3只兔行此檢測；實驗損傷組另取6只兔于造模前、造模后1h、6h、12h、24h、48h、72h、1w重復行光學相干斷層掃描（optical coherence tomography, OCT）檢查，精確測量視網膜厚度。所得結果進行圖像分析，數(shù)據資料均用SPSS17.0軟件包進行統(tǒng)計分析。 結果1眼底照相：正常兔視網膜呈橘紅色，血管走行良好；缺血后視網膜顏色蒼白，血管閉塞；再灌注后視網膜呈暗紅色，血管擴張，視網膜逐漸水腫并可見白色棉絮狀滲出，24h表現(xiàn)最重。損傷治療組與損傷對照組同一時間點相比，視網膜水腫及白色棉絮狀滲出程度輕。2FFA檢查：正常眼底血管造影未見熒光素滲漏；高眼壓后熒光素積存于視盤，視網膜血管未見熒光素充盈；再灌注后視盤及視網膜血管恢復充盈，可見熒光素滲漏及無灌注區(qū)，24h熒光素滲漏達最大量；損傷治療組與損傷對照組同一時間點比較，血管閉塞程度輕，熒光素滲漏少。3OCT檢查：損傷對照組與損傷治療組損傷后1w視網膜厚度分別與損傷前相比均變薄，差異有統(tǒng)計學意義（P0.05）；損傷后1w時間點，損傷對照組視網膜厚度薄于損傷治療組，差異有統(tǒng)計學意義（P0.05）。損傷前到損傷后24h時間段，組間處理因素、時間因素、處理因素和時間因素交互效應差異均有統(tǒng)計學意義（P0.05）；損傷后24h～1w時間段，組間處理因素、時間因素、處理因素和時間因素交互效應差異均有統(tǒng)計學意義（P0.05）。4HE染色：正常兔視網膜三層細胞分界清楚，細胞排列整齊而緊密損傷對照組再灌注后視網膜水腫逐漸加重，細胞間隙逐漸增大，核固縮散在分布于視網膜神經節(jié)細胞層及內核層，上述現(xiàn)象以24h最嚴重；48～72h視網膜水腫逐漸減輕，視網膜神經節(jié)細胞及內核層細胞數(shù)量減少；1w時視網膜水腫完全消失，視網膜神經節(jié)細胞及內核層細胞明顯減少，神經纖維層及內叢狀層萎縮變薄。損傷治療組再灌注后各時間點視網膜病理變化與損傷對照組一致，但較損傷對照組輕。5wt-p53和Caspase-3蛋白免疫組織化學染色：正常視網膜未檢測到棕黃色的陽性細胞。損傷對照組再灌注后1h神經節(jié)細胞層偶見陽性細胞；6h陽性細胞數(shù)開始增多，主要在視網膜神經節(jié)細胞層；12h陽性細胞數(shù)進一步增多，主要在視網膜神經節(jié)細胞層，內核層也有少量陽性細胞；24h陽性細胞數(shù)達高峰，，此時除在神經節(jié)細胞層外，內核層也見部分陽性細胞；48h仍見大量陽性細胞；72h已明顯下降；1w時基本未見陽性細胞。損傷治療組wt-p53和Caspase-3陽性細胞數(shù)變化趨勢同損傷對照組，但在6～72h期間，同一時間點損傷治療組wt-p53和Caspase-3陽性細胞數(shù)明顯少于損傷對照組（P0.05）。損傷對照組和損傷治療組組內相鄰時間點之間比較差異有統(tǒng)計學意義（p0.05），wt-p53和Caspase-3陽性細胞數(shù)均在24h達高峰。 結論1視網膜水腫是RIRI的表現(xiàn)之一，細胞凋亡可能是RIRI的最終結局；2地塞米松聯(lián)合曲安奈德通過減輕視網膜水腫及抑制細胞凋亡保護RIRI；3OCT檢查在評估RIRI的程度及治療效果中具有極高的應用價值。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：河北聯(lián)合大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R774.1
【目錄】：

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