發(fā)布時(shí)間：2016-10-30 20:47

  本文關(guān)鍵詞：銀杏葉提取物對(duì)大鼠視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體跨膜電位及視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《河北醫(yī)科大學(xué)》 2014年

銀杏葉提取物對(duì)大鼠視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體跨膜電位及視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白表達(dá)的影響

李志新  

【摘要】：目的：視神經(jīng)損傷是一種視力損傷嚴(yán)重、預(yù)后較差的視神經(jīng)病變，其治療方法少、治療效果差。探求視神經(jīng)損傷后修復(fù)再生的方法，，謀求改善視神經(jīng)功能的策略一直是眼科研究的熱點(diǎn)，但目前尚缺乏安全、有效的治療藥物。越來(lái)越多的證據(jù)表明，銀杏葉提取物（Ginkgo Bilobaextract,EGb761）具有抗氧化、抗缺血、保護(hù)線粒體、抑制一氧化氮合酶、抑制谷氨酸毒性以及抑制血小板活化因子等多種作用，且長(zhǎng)期應(yīng)用未發(fā)現(xiàn)其毒、副作用[1]，是一種有潛力并且可以長(zhǎng)期應(yīng)用的視功能保護(hù)劑。 本研究通過(guò)建立大鼠視神經(jīng)不完全損傷模型，腹腔注射銀杏葉提取物，來(lái)觀察視神經(jīng)損傷后，銀杏葉提取物對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinalganglion cell,RGCs)線粒體跨膜電位(mitochondrial transm embranepotentials,△ψm)變化及視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白(heatshock proteins,HSPs)27表達(dá)的影響，從而探討銀杏葉提取物對(duì)外傷性視神經(jīng)損傷的作用，進(jìn)而為銀杏葉提取物臨床治療視神經(jīng)損傷提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：清潔級(jí)健康SD大鼠60只，雌雄不限，體重250g±10g。常規(guī)眼部檢查無(wú)眼疾。隨機(jī)分為3組,正常對(duì)照組（正常組）20只（20眼），實(shí)驗(yàn)對(duì)照組（對(duì)照組）20只（20眼），實(shí)驗(yàn)治療組（治療組）20只（20眼）。正常組不做任何處理。對(duì)照組和治療組建立左眼視神經(jīng)損傷模型，造模后1小時(shí)開(kāi)始，治療組給予0.35%銀杏葉提取物(100mg/kg)，生理鹽水配置腹腔注射[2，3]，對(duì)照組給予同治療組體積的生理鹽水直接腹腔注射，此后每日一次，至試驗(yàn)結(jié)束。于實(shí)驗(yàn)3d、7d、14d、28d，每組各取5眼的動(dòng)物視網(wǎng)膜組織，用HE染色觀察各組視網(wǎng)膜組織形態(tài)學(xué)的改變、免疫組織化學(xué)染色觀察熱休克蛋白27的表達(dá)情況、流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體跨膜電位的變化。研究中計(jì)量資料均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x s))表示，采用方差分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析，以P0.05為差異有顯著性。 結(jié)果： 1視網(wǎng)膜組織HE染色 正常組：視網(wǎng)膜各細(xì)胞層、內(nèi)核層及外核層的細(xì)胞排列致密，結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn)，邊界清楚；對(duì)照組：各時(shí)間點(diǎn)RGCs排列紊亂，數(shù)量不同程度的減少，在損傷3d、7d，部分細(xì)胞可出現(xiàn)水腫及空泡樣變化，隨著損傷時(shí)間延長(zhǎng)，大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層的胞核明顯變稀疏、變薄且排列紊亂，內(nèi)核層和外核層也不同程度的減少；治療組亦可見(jiàn)上述改變，但其各時(shí)間點(diǎn)均較對(duì)照組的3d、7d、14d、28d時(shí)間點(diǎn)損傷情況輕，其中14d損傷的情況明顯明顯輕于3d、7d和28d。 2熱休克蛋白27免疫組織化學(xué)染色： HSPs27的表達(dá)可位于視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層，其強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)呈棕色。正常組實(shí)驗(yàn)中所見(jiàn)呈現(xiàn)弱陽(yáng)性表達(dá)淺黃色染色，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯變化；對(duì)照組3d為弱陽(yáng)性表達(dá)呈淺黃染色，7d染色加深，14d達(dá)高峰呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)棕色，28d染色呈淺黃色；實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)陽(yáng)性表達(dá)均弱于對(duì)照組，但明顯強(qiáng)于正常組。 免疫組織化學(xué)的半定量檢測(cè)結(jié)果：正常組3d、7d、14d及28d的半定量檢測(cè)結(jié)果分別為：0.113士0.015、0.117士0.009、0.115士0.124、0.117士0.006；對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)的半定量檢測(cè)結(jié)果分別為：0.424士0.031、0.538士0.073、0.337士0.022、0.252士0.014；治療組各時(shí)間點(diǎn)的半定量檢測(cè)結(jié)果分別為：0.330士0.021、0.327士0.183、0.211士0.015、0.172士0.007。在實(shí)驗(yàn)的3d、7d、14d及28d，對(duì)照組和治療組HSPs27的陽(yáng)性表達(dá)較正常組顯著升高，治療組較對(duì)照組HSPs27的陽(yáng)性表達(dá)各時(shí)間點(diǎn)顯著降低，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）。 3流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體跨膜電位 正常組正常大鼠RGC△ψm為825.648±5.822；對(duì)照組：3d、7d、14d、28d， RGC△ψm為分別為714.574±6.386、633.108±6.305、657.360±4.879、698.838±5.630，各時(shí)間點(diǎn)的△ψm均明顯低于正常組，且各時(shí)間點(diǎn)間△ψm差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05)；治療組：3d、7d、14d、28d，RGC△ψm為分別為784.879±6.424、732.538±4.851、755.698±6.993、766.769±5.134，各時(shí)間點(diǎn)的△ψm均低于對(duì)照組，但高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05)。 結(jié)論： 1視神經(jīng)損傷后RGCs排列紊亂，細(xì)胞數(shù)量不同程度的減少。 2視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白27的表達(dá)上升，線粒體跨膜電位下降。 3應(yīng)用銀杏葉提取物治療后可以使視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白的表達(dá)下降，線粒體跨膜電位上升。 4銀杏葉提取物參與了視神經(jīng)損傷大鼠視網(wǎng)膜的修復(fù)過(guò)程。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R774.6
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

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4 黃漢明;熊增慧;劉輝;余啟枝;;金可樂(lè)與銀杏葉提取物對(duì)心腦血管保護(hù)作用的比較[A];中國(guó)制藥工業(yè)藥理學(xué)會(huì)20周年學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2002年

5 嚴(yán)海東;劉娜;徐太靜;王俊;;銀杏葉提取物在TGF-β1誘導(dǎo)的人腎小管上皮細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化中的作用研究[A];2007年浙滬兩地腎臟病學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2007年

6 陳松芳;王小同;黃漢津;邵勝敏;鄭國(guó)慶;龔永生;周紅宇;;慢性低O_2高CO_2大鼠行為學(xué)的變化及銀杏葉提取物的影響[A];第十一屆全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

7 周玲生;王巖;周路坦;康愛(ài)英;丁可;;銀杏葉提取物對(duì)兔動(dòng)脈粥樣斑塊bcl-2、bax表達(dá)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)日程及論文匯編[C];2010年

8 潘永峰;;羅格列酮聯(lián)合銀杏葉提取物治療非酒精性脂肪性肝病的臨床療效觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

9 章蘊(yùn)毅;李端;李佩芬;;銀杏葉提取物對(duì)大鼠腦缺血的作用[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)第八次全國(guó)代表大會(huì)論文摘要集（第一部分）[C];2002年

10 歐明洪;;銀杏葉提取物的藥理及臨床研究概況[A];全國(guó)第三屆心腦血管疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2003年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 本報(bào)記者 馬建忠;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

2 記者 柳路;[N];光明日?qǐng)?bào);2002年

3 記者劉志強(qiáng);[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

4 雯麗;[N];中國(guó)食品報(bào);2011年

5 蔣成博;[N];廠長(zhǎng)經(jīng)理日?qǐng)?bào);2002年

6 蔡德山;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

7 清源;[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2004年

8 王銀華;[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

9 梁立興;[N];湖南科技報(bào);2004年

10 本報(bào)記者 嚴(yán)鴻珍;[N];新華日?qǐng)?bào);2001年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 丁麗萍;銀杏葉提取物預(yù)處理對(duì)缺血—再灌注大鼠心肌蛋白質(zhì)組學(xué)的影響[D];中南大學(xué);2012年

2 徐為民;尾加壓素Ⅱ在大鼠心肌纖維化發(fā)病機(jī)制中的作用及銀杏葉提取物的干預(yù)研究[D];吉林大學(xué);2012年

3 李強(qiáng);銀杏葉提取物對(duì)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡及L-型鈣通道電流影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2011年

4 吳寧玲;葛根素及銀杏葉提取物對(duì)視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜血流影響的臨床及實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院;2012年

5 宋立剛;銀杏葉提取物對(duì)缺血性腦血管病介入治療的影響以及其中糖類的優(yōu)化分離和動(dòng)物體內(nèi)腦保護(hù)作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

6 池靜端;銀杏葉化學(xué)成分及其有效成分分析方法的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1997年

7 沈建穎;銀杏葉提取物（GBE50）預(yù)防血管內(nèi)皮功能障礙的體外實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

8 敖強(qiáng);大鼠脊髓損傷后細(xì)胞凋亡及其相關(guān)治療學(xué)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2003年

9 楊淑娟;銀杏葉提取物增強(qiáng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療糖尿病作用研究[D];吉林大學(xué);2009年

10 李相軍;tTG在大鼠腎間質(zhì)纖維化中的作用及銀杏葉提取物干預(yù)的研究[D];吉林大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊芳;銀杏葉提取物體外抗乙型肝炎病毒分泌抗原的作用[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 孫微;腦缺血—再灌注損傷時(shí)MMP-9的表達(dá)及銀杏葉的干預(yù)作用[D];吉林大學(xué);2006年

3 王英麗;銀杏葉提取物抗輻射作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2006年

4 梁潔;銀杏葉提取物微丸的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

5 陳三妹;銀杏葉提取物對(duì)糖尿病大鼠腎臟保護(hù)作用[D];浙江大學(xué);2006年

6 王雪;銀杏葉制劑對(duì)青光眼術(shù)后視神經(jīng)保護(hù)作用的臨床研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2006年

7 鄭欣;銀杏葉提取物對(duì)糖尿病大鼠腎小管上皮—間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響與機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

8 張?jiān)?鋰-匹羅卡品癲癇大鼠小腦中膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性觀察及銀杏葉提取物干預(yù)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2005年

9 陳淑萍;銀杏葉提取物（EGb761）預(yù)處理對(duì)兔移植肺缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究[D];浙江大學(xué);2006年

10 周輝;銀杏葉提取物（舒血寧）對(duì)老年病人全身麻醉術(shù)后認(rèn)知功能的作用[D];中南大學(xué);2007年

  本文關(guān)鍵詞：銀杏葉提取物對(duì)大鼠視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體跨膜電位及視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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