本文關鍵詞：PET濾膜用于承載耳蝸基底膜培養(yǎng)的實驗研究　出處：《中華耳科學雜志》2015年01期 　論文類型：期刊論文

  更多相關文章： 聚對苯二甲酸乙二醇酯(PET)濾膜 耳蝸器官培養(yǎng) 毛細胞 齒間細胞 免疫熒光 透射電鏡 掃描電鏡

【摘要】：目的探討一種適宜耳蝸組織貼壁培養(yǎng)的方法。方法 PET濾膜預先置入層粘連蛋白、鳥氨酸、胎牛血清按2:2:1比例混合均勻的液體中在4℃預孵過夜,選取出生四天的C57BL/6J小鼠作為研究對象。剝?nèi)』啄ひ訮ET濾膜作為承載介質(zhì)培養(yǎng)在加入含青霉素的培液中,48小時后收取樣本,進行免疫熒光(一抗goat anti-otoancorin、mouse anti-beta tubu-linⅢ及對應二抗采用cy3 donkey anti goat,647 donkey anti mouse,染核試劑DAPI,phalloidin)觀察不同部位細胞,掃描電鏡及制備原位超薄切片透射電鏡觀察體外培養(yǎng)新生小鼠基底膜內(nèi)外毛細胞、螺旋緣內(nèi)細胞、螺旋神經(jīng)元細胞顯微結構的改變。結果耳蝸基底膜在PET膜上貼附生長良好。各種細胞的微小結構和超微結構保持正常狀態(tài)。結論 PET濾膜能作為一種新穎的承載基底膜培養(yǎng)的介質(zhì)。
[Abstract]:Objective to explore a suitable method for the cultivation of the cochlear tissue. Methods the PET membrane was pre implanted with laminin, ornithine and fetal bovine serum in a uniform mixture of 2:2:1 ratio and incubated at 4 C for the night. C57BL/6J mice, who were born on the four day, were selected as the research subjects. Stripping the basement membrane with PET membrane as the bearer of culture media in culture medium containing penicillin in 48 hours after receiving samples for immunofluorescence (goat anti-otoancorin, mouse anti-beta, anti tubu-lin and anti Cy3 III corresponding to two by donkey anti goat, 647 donkey anti mouse staining reagent DAPI, phalloidin) were observed in different parts cells were prepared by in situ scanning electron microscope and transmission electron microscope mice were cultured in the basement membrane and inner hair cells, spiral limbus cells and spiral ganglion cell changes in the microstructure of in vitro. Results the epiphytic length of the cochlear basement membrane was attached to the PET membrane. The microstructures and ultrastructures of all kinds of cells remained normal. Conclusion PET filter membrane can be used as a novel medium for bearing basement membrane culture.
【作者單位】： 南京大學醫(yī)學院附屬鼓樓醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;
【基金】：江蘇省自然科學基金資助(項目號BK2010104)
【分類號】：R764
【正文快照】： 目前耳蝸體外培養(yǎng)常用的方法是組織貼壁培養(yǎng)法,介導貼壁常用的方法有鼠尾膠包被培養(yǎng)皿[1,2]和鼠尾膠凝膠液滴法[3]。兩種培養(yǎng)方法基底膜都能存活良好,但都有各自的優(yōu)缺點。在實驗過程中我們發(fā)現(xiàn)了一種新穎的承載基底膜培養(yǎng)的方法,能同時結合現(xiàn)有兩種方法的優(yōu)點。用Millicell中

【參考文獻】

相關期刊論文 前5條

1 ;Overexpression of TIMP-1 mediated by recombinant adenovirus in hepatocellular carcinoma cells inhibits proliferation and invasion in vitro[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2006年03期

2 原紅艷,李樹華,李興啟;新生大鼠耳蝸柯替器體外培養(yǎng)的初步報告[J];聽力學及言語疾病雜志;2005年01期

3 亓衛(wèi)東;丁大連;蔣海燕;Richard J Salvi;;全耳蝸毛細胞定量分析系統(tǒng)[J];聽力學及言語疾病雜志;2007年02期

4 陳杰;高下;麻曉峰;;Ad-DsRed2-NT3轉(zhuǎn)染小鼠離體耳蝸基底膜預防慶大霉素耳毒性的實驗研究[J];中華耳科學雜志;2012年01期

5 姜成鋼;劉芙蓉;徐惠綿;吳濤;高建;;西咪替丁對人胃癌細胞SGC-7901生物學行為的影響[J];中華醫(yī)學雜志;2006年26期

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 劉瑩瑩;楊一兵;湯勇;;神經(jīng)營養(yǎng)因子對損傷的SGNs保護的研究進展[J];臨床醫(yī)學;2014年06期

2 楊大志;王正敏;李華偉;白燕;;新霉素致?lián)p小鼠聽覺上皮后線粒體轉(zhuǎn)錄因子B1與毛細胞凋亡的關系[J];第三軍醫(yī)大學學報;2015年02期

3 魏玲;宋現(xiàn)讓;王興武;孫菊杰;宋寶;鄭燕;;低氧射線雙調(diào)控的TK表達載體的構建及其對人乳腺癌細胞系的放射增敏作用[J];基礎醫(yī)學與臨床;2010年08期

4 DING Dalian;JIANG Haiyan;FU Yong;LI Yongqi;Richard Salvi;Shinichi Someya;Masaru Tanokura;;OTOTOXIC MODEL OF OXALIPLATIN AND PROTECTION FROM NICOTINAMIDE ADENINE DINUCLEOTIDE[J];Journal of Otology;2013年01期

5 王曉花;章建程;王慶敏;李中付;周宏元;袁海霞;;白細胞介素-1對新生大鼠內(nèi)耳毛細胞再生能力的影響[J];海軍醫(yī)學雜志;2014年05期

6 黃世勇;陶澤璋;肖伯奎;;連翹酯苷對順鉑耳毒性防護作用的實驗研究[J];聽力學及言語疾病雜志;2011年02期

7 Liang Chang;Aimei Wang;;Calpain mediated cisplatin-induced ototoxicity in mice[J];Neural Regeneration Research;2013年21期

8 閆輝;邢蔚;宋勇莉;王人鳳;陳俊;邱建華;;硫酸卡那霉素聯(lián)合呋塞米快速致聾大鼠模型的研究[J];聽力學及言語疾病雜志;2014年03期

9 宋海燕;董楊;王靜;彭垠婷;;耳聾左慈丸防治慶大霉素誘發(fā)大鼠腎耳毒性實驗研究[J];上海中醫(yī)藥雜志;2014年05期

10 胡姚;周柳青;魯海濤;袁琨;龔樹生;;Excitotoxic Effects of Glutamate on Cochlear Organotypic Cultures[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2015年01期

相關博士學位論文 前4條

1 劉天奇;Glut-1反義寡核苷酸對人肝癌HepG2細胞Glut-1、MMP-2、MT-MMP表達及對HepG2細胞葡萄糖吸收的影響[D];浙江大學;2011年

2 韓宇;c-Myc在噪聲條件下對耳蝸毛細胞的作用及分子機制[D];第四軍醫(yī)大學;2010年

3 毛小波;Nob1在耳蝸毛細胞損傷中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

4 劉虹;Notch1蛋白在肝細胞癌中的表達及其意義[D];中南大學;2012年

相關碩士學位論文 前9條

1 吉勝樸;TIMP-2、MMP-2、CD147在肝細胞癌中的表達及臨床意義[D];天津醫(yī)科大學;2011年

2 �？�;二膦酸鹽對人骨肉瘤細胞株MG-63細胞生長及OPG/RANKL表達影響的實驗研究[D];安徽醫(yī)科大學;2008年

3 田冬艷;MMP-2和TIMP-2在宮頸癌中的表達意義[D];天津醫(yī)科大學;2009年

4 劉瑾;基質(zhì)金屬蛋白酶-3在膀胱移行細胞癌中的表達與臨床病理特征及預后的關系[D];河北醫(yī)科大學;2012年

5 孫鵬暉;軍事噪聲性聽力損失群體中TECTA基因多態(tài)性的研究[D];昆明醫(yī)科大學;2012年

6 陳星睿;噪聲引起的耳蝸金屬蛋白酶變化及其對聽功能的影響[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2013年

7 劉煜;原發(fā)性肝細胞性肝癌中EphA2、N-cadherin及E-cadherin的表達及其臨床意義[D];中南大學;2013年

8 陳曉棟;AIF在阿司匹林抗慶大霉素耳毒性中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學;2014年

9 劉瑩瑩;耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細胞損傷后BDNF對其存活的影響[D];昆明醫(yī)科大學;2014年

【二級參考文獻】

相關期刊論文 前4條

1 祝威,王蘋,金昕,丁大連,SalviR,杜寶東;Tiron對抗外源性過氧化氫對離體培養(yǎng)小鼠耳蝸Corti器損傷研究[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2003年04期

2 郭維,胡吟燕,周娜,翟所強,楊偉炎;NT3重組腺病毒對耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)的保護作用[J];聽力學及言語疾病雜志;2002年04期

3 巴云鵬,董明敏,董民聲,湯文學;丁胺卡那霉素誘發(fā)豚鼠耳蝸外毛細胞凋亡的實驗研究[J];中國耳鼻咽喉顱底外科雜志;2001年02期

4 劉君,蒲永東,范志忠,劉軍;西米替丁對大腸癌根治術后患者的免疫調(diào)節(jié)作用及臨床意義[J];中華普通外科雜志;2002年02期

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 方萍,劉春新,胡莉萍,陳保平,雷森林,梁惠;人體組織基底膜超微結構病變的分析[J];武漢大學學報(醫(yī)學版);2002年02期

2 胡靜;郭尚福;馮玉寬;馮克儉;;基底膜特殊顯色反應在淋巴管研究中的應用[J];牡丹江醫(yī)學院學報;2007年06期

3 方玲,李美華,郝鵬程;基底膜蛋白在口腔粘膜扁平苔癬中的表達[J];中國實驗診斷學;2002年06期

4 朱桂彬,高緒蘭,張雅潔;基底膜PATSC-GMS染色法[J];臨床與實驗病理學雜志;1997年01期

5 繆吉昌;肖中舉;周凌宏;;耳蝸基底膜的力學仿真模型[J];南方醫(yī)科大學學報;2014年01期

6 楊國標,Albrecht Eiber;人耳蝸基底膜模型的動力特性有限元數(shù)值模擬[J];醫(yī)用生物力學;2005年01期

7 辛榕,卞修武,張樹輝;腎基底膜六胺銀染色方法的改進[J];第三軍醫(yī)大學學報;2000年12期

8 周克敏;;惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移[J];云南醫(yī)藥;1984年01期

9 李美華,方玲,郝鵬程;基底膜蛋白與口腔粘膜癌前病變研究進展[J];白求恩醫(yī)科大學學報;1998年02期

10 鄧衛(wèi)安;鄧俠進;;基底膜與腫瘤[J];遵義醫(yī)學院學報;1989年04期

相關會議論文 前9條

1 陶明德;吳云崗;張?zhí)煊?戴培東;;耳蝸中基底膜振動的研究[A];第七屆全國水動力學學術會議暨第十九屆全國水動力學研討會文集（上冊）[C];2005年

2 陳杰;高下;徐琳;;重組腺病毒轉(zhuǎn)染新生小鼠離體耳蝸基底膜的實驗研究[A];中華醫(yī)學會第十次全國耳鼻咽喉-頭頸外科學術會議論文匯編（下）[C];2007年

3 趙婷婷;李平;郭景珍;沙洪;;基底膜蛋白多糖在糖尿病腎病中的作用[A];中華中醫(yī)藥學會第二十一屆全國中醫(yī)腎病學術會議論文匯編（下）[C];2008年

4 周函;徐琳;朱光潔;董磊;張俊峰;高下;;聚乙酰亞胺納米粒轉(zhuǎn)染離體培養(yǎng)C57BL/6J小鼠耳蝸基底膜的實驗研究[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學術會議論文匯編[C];2010年

5 姜篤銀;付小兵;盛志勇;陳偉;周崗;孫同柱;;假性上皮瘤樣增生病變中上皮-間質(zhì)連接區(qū)基底膜相關成分缺失機制的研究[A];全國燒傷創(chuàng)面處理、感染專題研討會論文匯編[C];2004年

6 任雅麗;程明;;IgA腎病和腎小球微小病變合并基底膜變薄的情況比較[A];第八屆全國生物醫(yī)學體視學學術會議、第十一屆全軍軍事病理學學術會議、第七屆全軍定量病理學學術會議論文（摘要）匯編[C];2012年

7 卞徽寧;陳華德;鄭少逸;賴文;高輝;熊兵;劉族安;;外源性堿性成纖維細胞生長因子對創(chuàng)面愈合病理變化的影響[A];第八屆全國燒傷外科學年會論文匯編[C];2007年

8 趙祥輝;龍長才;;基底膜濾波器與耳蝸信號處理新特征[A];中國聲學學會2006年全國聲學學術會議論文集[C];2006年

9 劉凱;原媛;龐明姝;鄧昊;熊春陽;方競;;基于微圖案技術的高通量細胞牽引力顯微鏡[A];第十屆全國生物力學學術會議暨第十二屆全國生物流變學學術會議論文摘要匯編[C];2012年

相關重要報紙文章 前1條

1 王慧梅 曾顯成 張杰;鄉(xiāng)醫(yī)課堂思考病例[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2005年

相關碩士學位論文 前3條

1 顏羅;人耳基底膜濾波器仿真研究[D];北京交通大學;2009年

2 周健軍;含主動耳蝸的耳聲傳遞有限元模型研究[D];華中科技大學;2012年

3 彭春龍;一性連鎖Alport綜合征中國家系COL4A5基因新突變位點的檢測[D];浙江大學;2004年

，

本文編號：1342819