基因重組PACAP 27衍生多肽RP2制備及促角膜上皮細胞增殖研究
本文關(guān)鍵詞:基因重組PACAP 27衍生多肽RP2制備及促角膜上皮細胞增殖研究 出處:《中國生物工程雜志》2015年03期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:利用基因工程技術(shù)高效制備具有促進角膜上皮細胞增殖功能的垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP 27)衍生多肽RP2,在細胞水平初步研究其生物學(xué)作用,為其用于角膜損傷治療提供實驗基礎(chǔ)。采用基因重組技術(shù)表達重組肽RP2,經(jīng)Chitin-Beads和HPLC純化、SDS-PAGE和質(zhì)譜鑒定后,研究其對小鼠角膜上皮細胞增殖的影響。實驗結(jié)果表明:利用基因重組技術(shù)制備的PACAP 27衍生多肽RP2的分子量為3.3 k Da,純度達96%;分別用重組肽RP2、PACAP 27及PBS作用于小鼠角膜上皮細胞,處理24 h及48 h時,RP2處理組角膜上皮細胞增殖率分別為(49.6±3.1)%、(93.0±1.7)%,PACAP 27處理組細胞增殖率分別為(29.0±2.4)%、(78.8±2.6)%,PBS對照組細胞增殖率為(20.2±1.1)%,(40.9±3.3)%。利用建立的重組多肽制備技術(shù)條件,可實現(xiàn)PACAP衍生多肽RP2高效制備,制備的RP2可有效促進角膜上皮細胞的增殖,從而有望成為一種新型角膜損傷治療候選藥物。
【作者單位】: 暨南大學(xué)細胞生物學(xué)系;暨南大學(xué)生物醫(yī)藥研究院
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上項目(81373314) 廣東省自然科學(xué)基金(S2012010008756) 高等學(xué)校博士學(xué)科點專項科研基金(20124401120012) 廣東省高等學(xué)?萍紕(chuàng)新項目(2012KJCX0015) 廣東省教育部產(chǎn)學(xué)研結(jié)合項目(2010B090400544,2013B090500105) 廣州市科技計劃項目(2011J4300112)資助項目
【分類號】:R772.2
【正文快照】: 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(pituitary adenylatecyclase activating polypeptide,PACAP)是促胰液素/胰高血糖素/血管活性肽(VIP)家族中的一員,具有的較強的AC(腺苷酸環(huán)化酶)激活活性。主要以PACAP 38及PACAP 27(PACAP 38氨基末端1~27位aa序列)兩種形式存在,并被證實來源于一個共
【參考文獻】
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【共引文獻】
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【二級參考文獻】
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,本文編號:1330593
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