發(fā)布時(shí)間：2017-11-24 10:31

  本文關(guān)鍵詞：免疫性內(nèi)耳病模型的建立及內(nèi)耳干擾素-γ的表達(dá)

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【摘要】：目的：建立免疫性內(nèi)耳病模型，并檢測(cè)內(nèi)耳干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）的表達(dá)變化情況。 方法：20只豚鼠按配對(duì)設(shè)計(jì)方法，分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組采用鑰孔戚血藍(lán)蛋白（Keyhole Limpet Hemocyanin, KLH）在已致敏的豚鼠圓窗龕局部免疫，對(duì)照組用磷酸鹽緩沖液（Phosphate Buffered Saline，PBS）代替KLH免疫豚鼠。分別于免疫前和末次免疫2周后，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定血清中特異性抗KLH抗體水平變化，采用聽覺誘發(fā)電位測(cè)試系統(tǒng)測(cè)試并記錄聽性腦干誘發(fā)電位（authority brainstem response audiometry，ABR）Ⅲ波閾值，之后斷頭和制作內(nèi)耳石蠟切片，光鏡觀察豚鼠內(nèi)耳結(jié)構(gòu)變化，并行酶免疫組織化學(xué)試驗(yàn)，觀察內(nèi)耳干擾素-γ的表達(dá)。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組免疫前后ABRⅢ波閾值的均值差異有顯著性（P＜0.001），以免疫前全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均值加2倍標(biāo)準(zhǔn)差（41.10dB）判斷，實(shí)驗(yàn)組有7只動(dòng)物（12耳）出現(xiàn)聽損，，且免疫后血清中特異性KLH抗體水平較免疫前明顯升高（P＜0.01）。免疫前后對(duì)照組ABRⅢ波閾值的均值和血清特異性KLH抗體水平的差異均無(wú)顯著性（P＞0.05）。組間對(duì)比，免疫后實(shí)驗(yàn)組ABRⅢ波閾值的均值和血清特異性抗KLH抗體水平均高于對(duì)照組，差異有著性（P＜0.05）。內(nèi)耳石蠟切片光鏡觀察發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組免疫后內(nèi)耳組織中有炎細(xì)胞浸潤(rùn)，部分豚鼠內(nèi)耳有迷路積水。酶免疫組織化學(xué)試驗(yàn)觀察顯示對(duì)照組豚鼠內(nèi)耳組織中無(wú)明顯褐色反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)組褐色反應(yīng)（即抗IFN-γ特異性抗體陽(yáng)性反應(yīng)）主要分布在以下部位：血管紋，螺旋韌帶，螺旋神經(jīng)節(jié)，Corti器，蝸軸小血管周圍。 結(jié)論：采用KLH在已致敏的豚鼠圓窗龕局部免疫，誘導(dǎo)并造成免疫性內(nèi)耳病模型的成功率較高。正常豚鼠內(nèi)耳中幾乎沒有IFN-γ表達(dá)，而在免疫性內(nèi)耳病豚鼠內(nèi)耳中IFN-γ呈顯著表達(dá)。依據(jù)其作用機(jī)制，提示免疫性內(nèi)耳病發(fā)生發(fā)展可能與IFN-γ表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R764.3;R-332

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 陳冬;李玉曉;李添應(yīng);馮煉強(qiáng);文衛(wèi)平;林志斌;;實(shí)驗(yàn)性過(guò)敏性鼻炎大鼠血漿細(xì)胞因子IL-4和IFN-γ時(shí)相的變化[J];中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志;2009年04期

2 曾惠瓊;葉志中;汪迅;尹志華;何英;高建華;董慧娟;;SLE患者外周血IFN-γ水平與疾病活動(dòng)性的相關(guān)研究[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2007年01期

3 王云龍;李玲玲;李晨陽(yáng);吳陽(yáng);;豬γ干擾素基因的合成、表達(dá)及純化[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2007年07期

4 孟曉麗;弓鴻飛;殷國(guó)榮;劉紅麗;王海龍;劉美娜;;重組人干擾素γ聯(lián)合弓形蟲STAg鼻內(nèi)免疫小鼠的免疫保護(hù)作用[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2009年05期

5 弓鴻飛;劉紅麗;孟曉麗;劉轉(zhuǎn)轉(zhuǎn);殷國(guó)榮;;弓形蟲可溶性速殖子抗原聯(lián)合IFNγ滴鼻免疫小鼠誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2009年07期

6 田園;祝令偉;張國(guó)利;吳廣謀;朱平;岳玉環(huán);;豬干擾素γ的原核表達(dá)及抗血清的制備[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2010年04期

本文編號(hào)：1221985